Окрашивание blur: Обзор популярных видов окрашивания волос

На самом деле я не сторонник использования поддерживающих масок или шампуней с оттеночным эффектом. У меня есть свой индивидуальный метод по составлению формулы цвета для блондинок.  Бывают, конечно, исключения, когда, например, клиент улетает отдыхать  в жаркие страны. В этой ситуации следует использовать тонирующий продукт для поддержания цвета. Но это должно быть какое-то одно средство, а не комплекс: шампунь, маска, кондиционер. Я советую маску с пигментами цвета для нейтрализации желтых оттенков. Хочу обратить внимание, что в наше время специалисты должны уметь составить такую формулу цвета, которая при смывание не даст желтый оттенок.

Набор для окрашивания Alcian Blue Stain Kit

Магазин не будет работать корректно, если куки отключены.

Похоже, в вашем браузере отключен JavaScript. Для наилучшего взаимодействия с нашим сайтом обязательно включите Javascript в своем браузере.

Как мне запросить расценки или оптовые цены?

Для запроса цен на продукцию:

1. Нажмите «Связаться с нами» в строке заголовка выше;
2. Щелкните «Служба поддержки»;
3. Заполните форму и укажите следующую информацию в разделе «Комментарии»: обратите внимание, что вы хотите получить цитату, номер позиции (SKU) и количество;
4. Нажмите «Отправить».

Описание

Набор для окрашивания Alcian Blue (pH 2,5) предназначен для использования при гистологической визуализации мукополисахаридов сульфатированных и карбоксилированных кислот, а также сульфатированных и карбоксилированных сиаломуцинов (гликопротеинов).

• Кислотные сульфатированные слизистые вещества: синий
• Гиалуроновая кислота: синий
• Сиаломуцины: синий
• Ядра: Красные

Контрольная ткань: Тонкий кишечник, аппендикс, толстая кишка

Технические характеристики

Компоненты набора

Компоненты:

• Раствор альцианового синего (pH 2.5), 30 мл
• Nuclear Fast Red (Enhanced), 30 мл
• Раствор уксусной кислоты (3%), 60 мл (30 мл x 2)

Техническая информация

Компоненты:

• Раствор альцианового синего (pH 2.5), 30 мл
• Nuclear Fast Red (Enhanced), 30 мл
• Раствор уксусной кислоты (3%), 60 мл (30 мл x 2)

Примечания:

a) Интенсивность должна быть оптимизирована для каждого типа ткани, используемого фиксатора и формы (замороженной или залитой парафином)

b) Соблюдайте стандартные лабораторные меры предосторожности, чтобы избежать контакта с кожей и глазами.

c) Вредно при проглатывании. Не принимать внутрь.

d) Эти реагенты предназначены только для исследовательских целей.

e) При утилизации соблюдайте все федеральные, государственные и местные правила.

Обзор его химии и клинической применимости

Abstract

Толуидиновый синий — это основной тиазиновый метахроматический краситель с высоким сродством к кислым компонентам ткани, тем самым окрашивая ткани, богатые ДНК и РНК. Он нашел широкое применение как в качестве витального красителя в живых тканях, так и в качестве специального красителя благодаря его метахроматическим свойствам.Толуидиновый синий был использован in vivo для выявления дисплазии и рака полости рта. Толуидиновый синий в срезах тканей используется с целью выделить компоненты, такие как гранулы тучных клеток, муцины и хрящи. В этой статье представлен обзор химии, техники и различных применений толуидинового синего.

Ключевые слова: Метахромазия, толуидиновый синий, витальное окрашивание

ВВЕДЕНИЕ

Толуидиновый синий (также известный как хлорид толония) представляет собой ацидофильный метахроматический краситель, который избирательно окрашивает кислые компоненты ткани (сульфаты, карбоксилаты и фосфатные радикалы).[1] Толуидиновый синий (ТВ) имеет сродство к нуклеиновым кислотам и поэтому связывается с ядерным материалом тканей с высоким содержанием ДНК и РНК. [2] Он входит в группу тиазинов и частично растворяется как в воде, так и в спирте. [3] Толуидиновый синий был известен для различных медицинских применений с момента его открытия Уильямом Генри Перкином в 1856 году, после чего он в основном использовался в красильной промышленности. Также известный как метиланалин или аминотолуол, он в основном имеет 3 изоформы, а именно орто-толуидин, пара-толуидин и метатолуидин.Толуидиновый синий широко использовался в качестве жизненно важного красителя для поражений слизистой оболочки, а также нашел применение в срезах тканей для специфического окрашивания определенных компонентов из-за его метахроматических свойств.

Витальное окрашивание — это окрашивание клеток или тканей в живом состоянии. Самая ранняя техника, разработанная Полем Эрлихом в 1885 году, заключалась в погружении только что удаленной ткани в метилированный синий цвет. Существует два метода витального окрашивания, а именно, прижизненное окрашивание в живом организме ( in vivo, ) и суправитальное окрашивание вне тела, обычно применяемое для препарата на предметном стекле отделенной клетки.[4] Туберкулез был впервые применен для окрашивания in vivo Райхартом в 1963 году для рака шейки матки in situ . [5]

В 1960-х годах было высказано предположение, что ТБ может окрашивать злокачественный эпителий слизистой оболочки in vivo , тогда как нормальная ткань не удерживала краситель. ТБ обнаруживает относительные, а не абсолютные различия между нормальными и злокачественными клетками и тканями. Их можно использовать как 1% или 2% для полоскания полости рта или как аппликацию в водной форме или в виде слабого кислотного раствора или неопределенного состава.Только около 5% красителя по весу остается в полости рта после отхаркивания. [6] Его использование in vivo основано на том факте, что диспластические и неопластические клетки могут содержать количественно больше нуклеиновых кислот, чем нормальные ткани. Также злокачественный эпителий может содержать внутриклеточные каналы, которые шире, чем нормальный эпителий, что может способствовать проникновению красителя. [1]

Витальное окрашивание эпителия полости рта было предложено в качестве средства наблюдения за пациентами с риском развития рака полости рта и для тех, у кого были подтвержденные новообразования других частей пищеварительного тракта.[6] ТБ использовался в качестве жизненно важного красителя для выявления потенциально злокачественных поражений полости рта и для выявления ранних поражений, которые можно было пропустить при клиническом обследовании. Более того, он может выявить полную степень диспластического эпителия или карциномы до иссечения [7] и может обнаруживать многоцентровые или вторичные опухоли и может помочь в последующем наблюдении за пациентами с раком полости рта. Это полезно для получения пограничного контроля карциномы и при выборе места для биопсии при предраковых поражениях. Утрата гетерозиготности может быть обнаружена в очагах поражения, окрашенных туберкулезом.Ткань, окрашенная туберкулезом, может иметь темно-синий или бледный королевский синий цвет. [3]

Большинство красителей окрашивают ткани с разной степенью интенсивности одного и того же цвета, однако некоторые компоненты тканей, которые в присутствии определенных основных красителей из группы каменноугольной смолы, будут окрашивать ткани в цвет, отличный от цвета красителя. Такая реакция окрашивания известна как метахромазия, и считается, что ткань проявляет метахромазию, а краситель — метахроматический краситель. К основным тканевым компонентам, которые проявляют метахромазию, относятся муцин, хрящ и гранулы тучных клеток.Красители, проявляющие метахроматические свойства, в основном состоят из тиазиновой группы, тионина, ТВ, лазурного А, лазурного В, метилового фиолетового, сафранина и акридинового апельсина. [4] ТБ — один из таких красителей, который использовался в срезах тканей для идентификации различных клеток.

Окрашивание тканей

Принцип

ТБ окрашивает ткани по принципу метахромазии. Краситель вступает в реакцию с тканями, давая цвет, отличный от цвета исходного красителя и остальной ткани. Метахромазия была открыта в 1875 году Корнилом, Юргенсом и Ранвье.Метахромазия важна, поскольку она очень избирательна и только определенные тканевые структуры могут окрашиваться метахроматически. Это явление, при котором краситель может поглощать свет с разными длинами волн в зависимости от его концентрации и окружающей среды, и он имеет способность изменять свой цвет без изменения своей химической структуры. Физические изменения, вызывающие это изменение цвета, представляют собой специализированную упорядоченную форму агрегации красителя. Для возникновения метахромазии на поверхности тканей должны быть свободные электроотрицательные группы.[8]

Метахромазия связана с укладкой катионов красителя в места с высокой плотностью анионных групп в ткани. Укладка укорачивает длину волны максимального поглощения, гипсохромный сдвиг, так что максимальная длина волны в спектре проходящего света становится длиннее, что делает наблюдаемый цвет красным, а не синим [9]. Вещества, которые могут быть окрашены таким образом, называются хромотропами, и они включают муцины, тучные клетки и так далее. [10] Хромотропы несут кислотные группы с минимальной плотностью не более 0.5 нм между соседними отрицательно заряженными группами. Они изменяют цвет метахроматических красителей. В основном силы Ван-дер-Ваальса удерживают краситель вместе с образованием димеров, тримеров или полимеров. Другие формы, которые играют меньшую роль, — это водород и гидрофобные связи. Краситель существует от нормальной мономерной (ортохроматической) формы до потенциальной полимерной (метахроматической) формы. Отрицательные заряды на хромотропах притягивают положительно заряженные полярные группы на красителе, что приводит к агрегации краситель-краситель в специализированной упорядоченной форме, образуя полимерную форму.Есть три формы метахромазии: альфа (α), бета (β) и гамма (g), дающие диапазон цветов []. [4]

Таблица 1

Различные формы метахромазии

Цветовой сдвиг всегда происходит от синего или фиолетового красителя к желтому или красному пятну, что означает, что поглощение цвета смещается в сторону более коротких длин волн, оставляя видимыми только самые длинные волны. Считается, что это представляет собой полимеризацию красителя. Чем больше степень полимеризации, тем сильнее метахромазия.Метахромазия требует наличия воды между молекулами красителя для образования полимера и не выдерживает дегидратации и очистки. [10] Спектр поглощения TB с ортохромной тканью максимален примерно при 630 нм, и результат окрашивания синий. Для метахроматического вещества спектр поглощения максимален при 480–540 нм, а окраска имеет красный цвет [4]. Притяжение Ван-дер-Ваальса между ТБ и полианионами способствует сродству при связывании с ДНК или РНК, как и гидрофобное связывание. Однако гибкие гликозаминогликаны с высокой плотностью заряда (ГАГ) позволяют нейтрализовать заряд агрегатов или стопок красителя, образованных из-за ван-дер-ваальсового притяжения красителя и гидрофобного связывания.[9]

Тучные клетки были впервые обнаружены в результате метахромазии в 1877 году Полем Эрлихом. Соединение, ответственное за метахромазию, было идентифицировано как гепарин, гетерогликан, богатый полусульфатными эфирами. ТБ — небольшой слабогидрофильный катионный краситель. Прикрепленный к ДНК или РНК, в хроматине или веществе Ниссля, этот краситель имеет синий цвет. Прикрепленный к гликозаминогликанам, в гранулах тучных клеток или хрящевом матриксе, краситель имеет пурпурный метахроматический цвет [9]. TB обычно применяется из слабокислых водных растворов.Тогда ДНК, РНК и ГАГ являются полианионными, тогда как большинство белков протонированы и, следовательно, поликатионны. Таким образом, основные катионы красителя обмениваются с катионами подвижных тканей, связанными с различными полианионами, и этот процесс называется основным окрашиванием. Этот ионный обмен управляется энтропией, поскольку увеличивает хаотичность системы. Поскольку поликатионные белки не связаны с подвижными катионами, ионный обмен не может происходить, сводя к минимуму фоновое окрашивание [9].

VITAL STAINING

Использование TB в качестве витального красителя было впервые предложено Richart для выявления дисплазии и карциномы in situ шейки матки.Neibel, Chomet и Shedd и их сотрудники первыми сообщили о жизненно важном применении туберкулеза для выявления предраковых и злокачественных поражений полости рта. Они подтвердили свойство туберкулеза проверять клинически подозрительные поражения как неопластические, определять границы предраковых и злокачественных новообразований, а также обнаруживать незаметные или сателлитные опухоли [12].

TB используется на основании того факта, что диспластические и неопластические клетки могут содержать количественно больше нуклеиновых кислот, чем нормальные ткани.Кроме того, злокачественный эпителий может содержать внутриклеточные каналы, которые шире, чем нормальный эпителий, что может способствовать проникновению красителя. [1] Другие предложения относительно распространения туберкулеза диспластическими и карциномами включают высокую плотность ядерного материала, потерю сплоченности клеток и усиление митоза. [3]

Использование туберкулеза в качестве вспомогательного диагностического средства при выявлении злокачественных новообразований привело к публикации многочисленных исследований, однако с разными результатами. Разнообразие может быть связано с различиями в методологии, популяционных исследованиях и проанализированных поражениях.Кроме того, в некоторых исследованиях биопсия поражений, не сохранивших туберкулез, не выполнялась. Эти факторы могут помешать оценке окрашивания, тем самым ограничивая ценность полученных результатов. [13]

ТБ обычно готовят в концентрации 1% для перорального применения. 100 мл 1% TB состоит из 1 г порошка TB, 10 мл 1% уксусной кислоты, 4,19 мл абсолютного спирта и 86 мл дистиллированной воды, что составляет 100 мл. Уровень pH обычно регулируется до 4,5. [14] Техника применения обычно предполагает полоскание рта водой дважды в течение 20 с для удаления мусора.Затем наносят 1% уксусную кислоту на 20 с, чтобы удалить липкую слюну. Затем следует нанесение 1% ТБ на 20 секунд либо ватным тампоном, если обнаружено поражение слизистой оболочки, либо в виде полоскания, если явного поражения не обнаружено. Снова были выполнены 2 полоскания 1% уксусной кислотой, чтобы уменьшить степень механически удерживаемого пятна. Наконец, полоскание рта водой. [14] Интерпретация основана на цвете; темно-синее (королевское или темно-синее) окрашивание считается положительным, светло-синее окрашивание сомнительно, а когда цвет не наблюдается, оно интерпретируется как отрицательное окрашивание.В нормальных условиях ядросодержащие чешуйки, покрывающие сосочки на тыльной стороне языка, а также поры серомуцинозных желез твердого неба часто окрашиваются туберкулезом [15].

В течение многих лет было проведено несколько исследований для определения чувствительности и специфичности окрашивания in vivo на TB. Более ранние исследования показали чувствительность в диапазоне 86–100% и специфичность в диапазоне 44–100%. [14,16–18] Lingen et al [7] в своем обзоре упомянули чувствительность и специфичность ТБ при выявлении рака полости рта находится в диапазоне 78–100% и 31–100% соответственно.Оценка окрашивания на ТБ для выявления предраковых поражений полости рта и карциномы на животных моделях показала высокие ложноотрицательные результаты при предраковых заболеваниях (95,2%), вызывая сомнения в том, является ли ТБ достаточно чувствительным для обнаружения предраковых поражений. Напротив, было обнаружено, что окрашивание in vivo ТБ было очень чувствительным при обнаружении карциномы. [12]

В 1989 г. метаанализ имеющихся данных по оценке эффективности применения ТБ для выявления плоскоклеточного рака полости рта определил чувствительность в диапазоне от 93.От 5% до 97,8% и специфичность от 73,3% до 92,9% [19]. Эпштейн и др. [1] показали чувствительность и специфичность 92,5% и 63,2% соответственно.

Анализ окрашивания TB in vivo в 145 поражениях слизистой оболочки полости рта среди 102 включенных пациентов выявил 100% чувствительность и 62% специфичность. Было высказано предположение, что окрашивание на ТБ является неоценимым вариантом при наблюдении за субъектами высокого риска и, кроме того, имеет замечательную чувствительность при обнаружении инвазивной карциномы.Исследование также показало, что поражения с ограниченной дисплазией или атипией не всегда окрашиваются туберкулезом. Предраковые поражения полости рта показали 20,5% ложноотрицательных результатов, что могло быть связано с отсутствием объективных критериев для оценки поглощения пятен [6].

Применение туберкулеза в 81 очаге поражения, 48 из которых были признаны клинически подозрительными, а 33 — клинически доброкачественными, показало, что в 28 случаях окрашивание отсутствовало, в 20 случаях окрашивалось неоднозначно, а в 33 — положительно. При биопсии этих поражений 54 были доброкачественными, а 27 — карциномой.Исследование показало 100% чувствительность и 52% специфичность. [2]

Onofre et al [13] оценили окрашивание туберкулеза при предраковых заболеваниях и поверхностные изъязвления ротовой полости, предполагающие злокачественные новообразования. Исследование показало 100% чувствительность при обнаружении in situ и инвазивной карциномы, и ложноотрицательных результатов не было. Поражения, которые были диагностированы как дисплазия, не сохранили окраски и, таким образом, дали ложноотрицательные результаты. Причины могут заключаться в том, что точные механизмы, с помощью которых краситель по-разному окрашивает злокачественные или диспластические ткани, остаются неизвестными.Специфичность окрашивания составила 65%, поскольку воспалительные поражения были устранены впервые и повторно окрашены через 14 дней. В поражениях без дисплазии эпителия или атипичных клеток ложноположительный результат составил 35%.

Hegde et al [15] обнаружили чувствительность 97,29% и специфичность 62,5%. Было замечено ложноположительное значение 7,69% и ложное отрицание 16,67%. Авторы предположили, что специфичность была снижена из-за удержания красителя в некоторых доброкачественных поражениях. Gupta и др. [20] продемонстрировали чувствительность 96.9% и специфичность 86% для выявления злокачественных новообразований. Частота ложноположительных результатов составила 14%, что могло быть связано с язвенными, воспалительными или травматическими поражениями. Исследование также показало 64% ​​чувствительность и 86% специфичность в отношении предраковых поражений.

Сообщалось о ложноположительном удерживании в недиспластических условиях с различной частотой. Машберг [14] сообщил о 8,5% ложноположительных результатов. Они предположили, что ложноположительный результат можно уменьшить с помощью второго обследования, обычно через 14 дней, которое помогает исключить поражения, окрашивание которых связано с воспалением.

Избирательное окрашивание злокачественных и диспластических клеток можно объяснить тем фактом, что эти клетки содержат количественно больше нуклеиновой кислоты, чем нормальная ткань. In vivo Окрашивание TB может быть результатом немедленного связывания сульфатированных мукополисахаридов, которые обнаруживаются в больших количествах в тканях, которые активно растут, таких как опухоли и ткани, которые заживают, что может объяснить ложноположительные результаты. [17] Исследование Мартина и др. [21] показало 42% ложноотрицательных результатов для карциномы in situ и 58% ложноотрицательных результатов при дисплазии эпителия.Это могло быть связано с анализируемым образцом и тем фактом, что эти авторы считали положительными только очаги с точечным или темно-синим окрашиванием.

Проблемы с исследованиями туберкулеза включают в себя то, что исследования не проводились в среде первичной медико-санитарной помощи, данные исследований вторичной медико-санитарной помощи не обязательно применимы к общей популяции, отсутствие рандомизированных контролируемых испытаний, некоторые исследования включают только карциному или дисплазию, а некоторые включают и то, и другое (нет единообразия), гистологический диагноз редко используется в качестве «золотого стандарта», не используется единый стандартный метод окрашивания, путаница с включением двусмысленного (бледного) окрашивания как положительного или отрицательного.[7]

Заявка на ТБ является важным дополнением к клиническому обследованию, поскольку она может не только усилить клинические подозрения в отношении обследования, но также помочь в выявлении участков, нуждающихся в биопсии, и очерчивании краев поражений, что может привести к более серьезным последствиям. своевременная диагностика, позволяющая получить преимущества более раннего лечения и направить хирургическое лечение. [22] Хотя специфичность метода меньше, что может быть связано с невозможностью биопсии нормальных тканей, которые не выявляют туберкулез, его все же можно использовать в качестве важного адъюванта в качестве диагностического средства, поскольку в клинических условиях ложноположительные результаты вызывают меньшее беспокойство, чем ложноотрицательные результаты, и любые положительные результаты должны быть подтверждены биопсией на наличие дисплазии или карциномы.Кроме того, любое поражение, которое не является клинически подозрительным, но демонстрирует поглощение ТБ (из-за раздражающих и воспалительных факторов), следует повторно оценить через 10–14 дней после регресса состояния. Если положительный результат на ТБ все еще сохраняется, поражение следует рассматривать как подозрительное и следует провести биопсию, чтобы исключить рак. Единообразные методы окрашивания и их интерпретация (например, сомнения относительно включения двусмысленного окрашивания как положительного или отрицательного) еще больше повысили бы полезность окрашивания ТБ.Как видно из предыдущей литературы, большинство исследований было выполнено с использованием недостаточных параметров; дальнейшие исследования, включающие все соответствующие параметры (нормальный, воспалительный, пренеоплазия и неоплазия), подтвердят рутинное использование туберкулеза в качестве жизненно важного красителя.

Контуры патологии — Альцианский синий

Тема завершена: 1 декабря 2013 г.

Незначительные изменения: 23 июня 2021 г.

Поиск в PubMed: alcian blue [название]

просмотров страниц в 2020 году: 8,621

просмотров страниц в 2021 году на сегодняшний день: 6,870

Цитируйте эту страницу: Перник Н. Алсиан синий. Сайт PathologyOutlines.com. https://www.pathologyoutlines.com/topic/stainsalcianblue.html. По состоянию на 28 сентября 2021 г.

Определение / общее

• Обычное «обычное» окрашивание (не иммуногистохимическое окрашивание) для обнаружения муцинов (Википедия: Alcian Blue Stain [доступ 8 августа 2018 г.])
• При pH 2.5, обнаруживает кислые муцины
• При pH 1,0 обнаруживает очень кислые муцины.
• Окрашенные детали от синего до голубовато-зеленого
• Примечание: все приведенные ниже ссылки относятся к pH 2,5, если не указано иное.

Использование патологами

• Окрашивает кислые простые, несульфатированные и кислые простые мезенхимальные муцины при pH 2,5, кислотно-комплексные сульфатированные муцины при pH 1,0 и кислотно-сложные муцины соединительной ткани при pH 0,5; НЕ окрашивает нейтральные муцины
• PAS-Alcian blue может быть лучшей комбинацией пан-муцина; PAS также окрашивает гликоген, но предварительное переваривание диастазой удаляет гликоген.
• Альциановый синий диамин железа с высоким содержанием железа обнаруживает сульфомуцины (коричневый) и сиаломуцины (синий)

Микроскопические (гистологические) изображения

Положительное окрашивание — нормальное

• Коллоид щитовидной железы, бокаловидных клеток и слизистых желез

Положительное окрашивание — болезнь

• Аденокарцинома, аденосквамозная карцинома, лейкоз тучных клеток (Acta Med Croatica 2013; 67: 61)
• Муцинозные опухоли, микседема (кожный муцин), миксома (мукоидный матрикс), узловой муциноз (молочной железы и др.) И болезнь Педжета мошонки

Отрицательное окрашивание

• Липиды / липидные образования (липома, липосаркома), болезнь Педжета пищевода, плоскоклеточный рак (акантолитический вариант — грудь и другие участки, псевдогландулярный вариант — пенис и другие участки), ксантелазма

Blue Stain Fungi — Полевой справочник по насекомым и болезням лесов Аризоны и Нью-Мексико

Хозяева: Хвойные деревья

Симптомы / признаки: Сине-зеленое изменение цвета заболони (часто в форме клина) в недавно убитых деревьях. Грибки синей пятнистости часто возникают из галерей короеда.

Биология: Грибы с синей окраской переносятся короеды и другие древесные насекомые и связанные с ними со смертностью деревьев.В основном они окрашивают в синий цвет и в первую очередь из родов Ophiostoma и Ceratocystis . В споры прорастают и производят мицелий (нитевидную массу), который колонизирует флоэму и заболонь, в конечном итоге блокируя проводящую воду столбцы дерева. Образование клиновидного пятна связано с перемещению гиф по лучам с внешней стороны бревна.

Эффекты: Пятна грибов часто ускоряют смерть деревьев, атакованных короедами.Пятно может привести к уменьшению в стоимости древесины или деревянных изделий из-за обесцвечивания заболони, но не влияет на прочность древесины.

Подобные насекомые и болезни: Другая группа окрасочных грибов разносятся ветром, разного цвета (синий, коричневый или серый), и относятся к родам Aureobasidium и Альтернария . Грибы черной пятнистости, которые являются близкородственными для посинения грибков, также перекрывают водопроводящие колонки.Тем не мение, Грибы с черной пятнистостью распространяются на здоровые деревья путем прикосновения к корням.

Каталожные номера: 93, 101

Протокол окрашивания толуидиновым синим для тучных клеток

Протокол окрашивания толуидиновым синим для тучных клеток

Наборы специальных красителей NovaUltra

Описание: Тучные клетки находятся в соединительной ткани и их цитоплазме. содержит гранулы (метахроматические), состоящие из гепарина и гистамина.Толуидиновый синий должен окрашивать тучные клетки в красно-пурпурный (метахроматический). окрашивание) и синий фон (ортохроматическое окрашивание). Метахромазия, тканевые элементы окрашиваются в другой цвет, чем раствор красителя, зависит от pH, концентрации красителя и температуры основной краситель. Синие или фиолетовые красители покажут сдвиг красного цвета, а красные красители покажут сдвиг желтого цвета с метахроматической тканью элементы.

Фиксация: 10% Формалин.

Разделы: парафиновые секции на 5 мкм.

Растворы и реагенты:

Толуидиновый синий Стандартное решение:

Толуидиновый синий O (Sigma) ————— 1 г

70% спирт —————————— 100 мл

Смешивание растворить.

Хлорид натрия (1%):

Натрия хлорид ————————— 0,5 г

Дистиллированная вода —————————— 50 мл

Смешивание раствориться (каждый раз делать этот раствор свежим). Отрегулируйте pH до 2,0 ~ 2,5, используя ледяную уксусную кислоту или HCl.

Толуидиновый синий Рабочий раствор (pH 2.0 ~ 2,5):

1. Депарафинизируйте и гидратируйте срезы до дистиллированной воды.

2. Пятно срезы в рабочем растворе толуидинового синего на 2-3 минуты.

3. Стирать в дистиллированной воде, 3 смены.

4. Быстро обезвоживайте через 95% и 2 смены 100% спирта (10 окунаний каждый, так как пятно быстро исчезает в спирте).

5. Прозрачный в ксилоле или заменителе ксилола — 2 смены по 3 минуты каждая.

6. Покровное стекло со смолистой монтажной средой.

Полученные результаты:

Тучные клетки ————————— фиолетовый / красно-пурпурный.

Фон ————————- синий.

Найти изображения

Протокол окрашивания Alcian Blue

Протокол окрашивания Alcian Blue

Наборы специальных красителей NovaUltra

Описание: Алкиан синий окрашивает кислые слизистые вещества и уксусные муцины.Чрезмерные суммы несульфатированных кислых слизистых веществ обнаруживаются в мезотелиомах, определенные количества обычно встречаются в стенках кровеносных сосудов, но увеличиваются в ранние очаги атеросклероза. Сильно кислые слизистые вещества будут окрашены в синий цвет, ядра — от розового до красного, а цитоплазма будет окрашена в бледно-розовый цвет.

Фиксация: формалин фиксированные, залитые парафином срезы тканей.

Растворы и реагенты:

3% уксусная кислота Решение:

Ледяная уксусная кислота —————— 3 мл

Дистиллированная вода ——————— 97 мл

Раствор Alcian Blue (pH 2.5):

Альцианский синий, 8GX ——————— 1 г

Уксусная кислота, 3% раствор ———— 100 мл

Хорошо перемешайте и доведите pH до 2,5 с помощью уксусной кислоты.

Ядерный быстрый красный ——————- 0,1 г

Алюминий сульфат —————— 5 г

Дистиллированная вода ——————— 100 мл

Растворить алюминий сульфат в воде.Добавьте ядерно-быстрый красный и медленно нагрейте до кипения и остудите. Отфильтруйте и добавьте крупицу тимола в качестве консервант.

Процедура:

1. Депарафинизируйте слайды и гидрат до дистиллированной воды.

2. Пятно в раствор альцианового синего на 30 минут.

3. Стирать в проточной водопроводной воде. в течение 2 минут.

4. Промыть дистиллированной водой.

5. Контрастняк в ядерной быстрый красный раствор на 5 минут.

6. Стирать в проточной водопроводной воде. за 1 минуту.

7. Обезвоживать и через 95% спирт, 2 смены абсолютного спирта, 3 минуты каждый.

8. Очистить в ксилол или заменитель ксилола.

9. Крепление со смолой монтажная среда.

Результатов:

Сильно кислые сульфатированные слизистые вещества ————— синий

Ядра ————————————————- —— от розового до красного

Цитоплазма ————————————————- бледно-розовый

Найти изображения

Положительный контроль:

Маленький кишечник, аппендикс или толстая кишка.

Кумасси синее окрашивание | Thermo Fisher Scientific

Протокол окрашивания кумасси, описанный ниже, рекомендуется для окрашивания гелей Invitrogen ™ Novex ™. Вы можете использовать любой протокол окрашивания кумасси ™ по своему выбору.

Материалы, предоставленные пользователем:

Для окрашивания кумасси синим вам понадобятся следующие предметы.

• Invitrogen ™ SimplyBlue ™ SafeStain
• Набор для окрашивания коллоидным синим
• Контейнер для окрашивания
• Деионизированная вода
• Орбитальный шейкер
• 0.1% Coomassie® R-250 в 40% этаноле и 10% уксусной кислоте (при использовании окрашивания Invitrogen ™ Coomassie ™ R-250)
• Обесцвечивающий раствор, состоящий из 10% этанола и 7,5% уксусной кислоты (при использовании Invitrogen ™ Coomassie ™ R -250)
• Метанол

Для общего использования с гелями трис-глицина 1,0 мм и 1,5 мм, мини-гелями Tricine, Zymogram и IEF размером 1,0 мм (8 x 8 см).

После электрофореза следуйте приведенным ниже инструкциям. Убедитесь, что мини-гель свободно перемещается в воде или пятне, чтобы облегчить распространение на всех этапах.

1. Промойте мини-гель 3 раза в течение 5 минут 100 мл деионизированной воды для удаления SDS и буферных солей, которые препятствуют связыванию красителя с белком. Выбрасывайте каждое полоскание.


2. Окрашивайте мини-гель достаточным количеством Invitrogen ™ SimplyBlue ™ SafeStain (20–100 мл), чтобы покрыть гель. Окрашивать 1 час при комнатной температуре при легком встряхивании. Полосы начнут развиваться в течение нескольких минут. После инкубации выбросьте пятно. Пятно нельзя использовать повторно. Примечание: гель можно окрашивать до 3 часов, но через 3 часа чувствительность снизится.Если вам нужно оставить гель в пятне на ночь, добавьте 2 мл 20% NaCl (вес / объем) в воде на каждые 20 мл пятна. Эта процедура не повлияет на чувствительность.


3. Промойте мини-гель 100 мл воды в течение 1-3 часов. Гель можно оставить в воде на несколько дней без потери чувствительности. В воде есть небольшое количество красителя, который находится в равновесии с красителем, связанным с белком, поэтому белки останутся синими.


4. Чтобы получить самый чистый фон для фотографии, выполните вторую стирку продолжительностью 1 час 100 мл воды.