Меню Закрыть

По типу окрашивания: Страница не найдена | Мария Заика

Содержание

Окрашивание полотен: реактивное и пигментное Статьи

Практически все ткани подвергаются заключительной обработке — отбеливанию, печатанию или крашению. Последнее — самое популярное, и сегодня на первый план выходят два вида окрашивания полотна: пигментное и реактивное. Оба имеют свои особенности и позволяют добиться уникального эффекта.

Пигментное крашение: особый рисунок

Этот вид окрашивания выбирается, если на поверхности полотна нужно создать какой-либо печатный узор. Эта работа имеет несколько этапов:

  1. Изготовление трафарета под соответствующий тип рисунка;
  2. Нанесение краски на ткань через этот трафарет;
  3. Высушивание краски без применения высоких температур.

В итоге получается четкий, очень стойкий рисунок. Этот тип окрашивания, в целом, считается одним из самых долговечных: в данном случае краска наносится прямо на ткань, и этот метод позволяет надолго сохранить яркость оттенков и особенности самого узора.

Такая методика отлично подходит для создания эффекта батика — ручного крашения. Однако при этом очень важно выбрать полотно: от состава волокон зависит их сочетаемость с химическими компонентами красителей, а также подбор температуры окраски. Чем однороднее состав ткани, тем дольше продержится на ней трафаретный рисунок.

Для пигментного окрашивания используются не красители, а пигменты — специальные вещества, окрашивающие поверхность ткани, но при этом не проникающие в ее волокна. На материале они удерживаются при помощи химических соединений, и для разных полотен могут использоваться неорганические или натуральные пигментные соединения.

Реактивное крашение: самое нежное!

Эта процедура выбирается при работе над постельным бельем, причем она подходит даже для очень нежных и дорогостоящих изделий. Такой тип окрашивания уникален, поскольку он:

  • связывает краску с каждым отдельным волокном ткани, что позволяет сделать цвет составной частью полотна и исключить выцветание рисунка;
  • делает ткань одновременно и шелковистой, и прочной;
  • обеспечивает устойчивость материала к мокрым обработкам.

Для этого типа крашения выбираются реактивные красители (волоконно-реактивные или активные). Они были изобретены еще в 50-х гг. прошлого столетия и не утратили своей актуальности.

Какими бывают красители и пигменты?

Эти вещества подразделяются на классы в зависимости от сферы применения. Для окрашивания тканей используют восемь основных классов:

  1. Прямые — анионные водорастворимые вещества, которые очень легко проникают в структуру целлюлозных волокон, не требуя вспомогательных химических средств. Также могут использоваться для окрашивания вискозных и хлопковых полотен. Очень просты в применении, но неустойчивы к мокрой обработке, поэтому нуждаются в закрепителях.
  2. Сернистые — органические пигменты, при работе с которыми необходимо использовать химические реакции окисления и восстановления, чтобы перевести вещество в более удобную форму. Стоят очень недорого, но обладают малой яркостью и низкой устойчивостью к воздействию света и мокрой обработке.
  3. Азоидные — пигменты, которые синтезируются внутри волокон, обработанных двумя компонентами. Предлагают самые недорогие способы получения некоторых популярных оттенков, но часто бывают неустойчивыми к истиранию.
  4. Реактивные — становятся частью волокна, считаются одними из самых дорогих красителей, но при этом устойчивы к мокрой обработке. Иногда могут легко разрушаться под воздействием хлора или других отбеливателей.
  5. Кубовые — пигменты, похожие на сернистые. Устойчивы к мокрой обработке и свету. Стоят довольно дорого.
  6. Кислотные — образуют связи с волокнами ткани через органические солевые группы, обладают прочностью и устойчивостью к мокрой обработке.
  7. Основные (катионные) — образуют связь с волокном, но при этом мало устойчивы к свету.
  8. Дисперсные — используются для окрашивания ацетилцеллюлозных, полиэфирных и полиамидных волокон, почти не растворимы в воде. Единственный тип красителей, которые могут использоваться для окрашивания немодифицированных и ацетатных полиэфирных волокон.

Первые пять классов применяются для окрашивания целлюлозных волокон, остальные — для работы с натуральными и синтетическими тканями.

По химическому составу красители и пигменты подразделяются на два типа:

  1. Азокрасители (имеют основу в виде атомов азота) — обладают высокой красящей способностью, натуральных аналогов не имеют.
  2. Антрахиноновые красители — имеют более яркий цвет, но слабее азокрасителей по красящим свойствам.

Независимо от типа красителя, полотно, которое будет окрашиваться, должно специально готовиться к этому процессу. Чаще всего подготовка сводится к нагреву ткани и последующей химической или мокрой обработке. Само же крашение может быть периодическим, непрерывным или полунепрерывным, и выбор способа зависит от типа полотна, химической структуры его волокон и особенностей самих красителей.


« Назад

Как происходит окрашивание волос? | Wella

Чтобы понимать, как происходит процесс окрашивания с научной точки зрения, важно знать, что мы окрашиваем. Тип волос может быть самым разным от кудрявых до прямых, от тонких до густых, от светлых до темных. Не существует двух одинаковых прядей волос. Как же красить волосы в соответствии с типом волос?


При окрашивании очень важно знать свой тип волос. Вы можете получить общее представление о волосах в этой статье. Как только вы узнаете о строении волос, важно понять, как это влияет на ваши волосы. Естественный пигмент волос меланин находится в кортексе, в клетках выровненных вместе с волокнами волос. Поэтому окрашивание волос происходит в кортексе, так как влияет на естественный пигмент волос. 

Какие факторы влияют на цвет волос? 

Ваш текущий цвет волос (натуральный или уже окрашенный ранее) влияет на результат будущего окрашивания. Если вы не знаете, какой оттенок выбрать, следуйте давно известному правилу окрашивания, легко поменять цвет волос до трех оттенков светлее или темнее вашего цвета волос. Если вы сейчас шатенка, то вы можете осветлить волосы до цвета каштан или светлый каштан или сделать оттенок темнее. 

Тип волос также имеет значение. Плотные волосы, которые больше в диаметре, как правило, требуют больше времени для поглощения цвета, тогда как тонкие волосы, которые меньше в диаметре, занимают меньше времени. Сухие волосы или волосы с завивкой могут быстрее поглощать цвет. Так как время окрашивания зависит от нескольких факторов, то для оценки времени окрашивания нужно проводить тест на пряди волос. 

Процесс окрашивания волос 

Окрашивание волос стойкой краской без аммиака происходит путем окрашивания каждой пряди, а окрашивание волос стойкой краской происходит путем проникновения пигмента через кутикулу в кортекс. Если стойкая краска без аммиака может со временем смываться, то стойкая краска глубоко проникает в структуру волоса. Однако волосы со временем отрастут, и в итоге вернется натуральный цвет. Точно так же, как существуют различные типы волос, существуют различные типы цвета волос, как указано в диаграмме ниже.


 

Стойкая краска для волос

Этот вариант окрашивания отличается высокой стойкостью. Цвет глубоко проникает в структуру волоса, меняя цвет. Вернуть свой натуральный цвет волос можно будет только отрастив волосы. 

Некоторые факты о стойком окрашивании: 

100% закрашивание седины
Изменение цвета волос на 1-3 тона
Можно использовать для незначительных изменений цвета
Не смывается 
Рекомендуется подкрашивать корни каждые 4-6 недель 

Стойкая краска без аммиака 

Стойкая краска без аммиака покрывает цветом каждую прядь волос. Если вы в первый раз красите волосы или хотите только подчеркнуть свой натуральный цвет, попробуйте стойкую краску без аммиака.

Цвета хватит примерно на 24 процедуры мытья головы. 

Некоторые факты о стойком окрашивании без аммиака: 

pH ниже по сравнению со стойкой краской для волос
Не содержит аммиак, содержит заменитель аммиака (MEA или AMP)
Низкая концентрация перекиси
Палитра красок похожа на палитру стойких красок
Не оставляет следов по линии роста волос

Полуперманентное окрашивание 

Полуперманентного окрашивания хватает до 8 процедур мытья головы. Краска мягко обволакивает волосы, проникая в кутикулу волоса. Каждое мытье головы раскрывает чешуйки кутикулы и цвет вымывается. Не содержит аммиак и перекись водорода, не отбеливает естественный пигмент волоса. 

Некоторые факты о полуперманентном окрашивании:
Не нужно ничего смешивать, краска в тюбике уже готова
Смывается примерно через 8 процедур мытья головы

Не содержит аммиак или перекись водорода

Кондиционер для волос

Волосы почти всегда подвергаются вредному воздействию: ультрафиолетовое излучение, хлорированная вода, соленая вода, диета, завивка, укладка волос. Даже такие вещи, как мытье головы, сушка полотенцем и расчесывание, вызывают трение, которое может повредить волосы. После повреждения волосы становятся грубыми и тусклыми. Кондиционер поможет защитить волосы от повреждений, делая волосы блестящими и шелковистыми.

Некоторые факты об оттеночном бальзаме:

Разглаживает кутикулу, делает волосы гладкими 
Образует защитное покрытие и предотвращает повреждения
Помогает восстановить способность волос удерживать влагу

Теперь, когда вы знаете, какие бывают краски, пришло время задуматься о новом имидже!

Общая информация о продуктах окрашивания

ТИПЫ ПРОДУКТОВ ОКРАШИВАНИЯ

Современные парикмахерские салоны должны иметь в своём арсенале все необходимые продукты, а парикмахер обязан обладать глубокими профессиональными знаниями, необходимыми для удовлетворения любого пожелания клиента в отношении услуги окрашивания волос. Выбор подходящего красителя в соответствии с потребностями клиента и его типом волос – важный шаг при подготовке процедуры окрашивания.

Большинство красителей на рынке парикмахерских услуг можно разделить на следующие типы:

Тип 1. Временный, смываемый, поверхностный краситель, в форме пены, туши или помады. 

Неоксидативный препарат, сохраняет натуральный пигмент, в его составе отсутствует аммиак или щелочь. Этот продукт служит для поддержания природного оттенка или усиления искусственного. Результат окрашивания зависит от базового цвета.

Тип 2. Семи-перманентные

Семи-перманентные гели, кремы и пудры на растительной или органической основе. Неоксидативный препарат, полученный цвет зависит от исходной базы.

Семи-перманентные продукты для окрашивания обычно вымываются после 5-15-кратного мытья, и этот аспект очень привлекателен для клиентов, которые не уверены в необходимости изменять свой цвет волос.

Семи-перманентные красители содержат активированные пигменты прямого действия. Некоторые из них в состоянии проникнуть сквозь кутикулу, покрывающую кортекс. Но большинство пигментов задерживается на чешуйках кутикулярного слоя (см. изображение Проникновение пигмента: Семи-перманент в сравнении с перманентом).

Основой красителя прямого действия обычно служит мусс, крем или гель. В большинстве случаев волосы должны быть предварительно вымыты – это позволяет воде приоткрыть кутикулярный слой. Использование профессиональных линий окрашивающих средств даст гарантию, что семи-перманентные красители останутся яркими в течение их краткого времени действия.

Результат семи-перманентного окрашивания зависит от качества волос, поэтому уход за волосами – важный аспект для поддержания достигнутого эффекта. Большинство семи-перманентных красителей покрывают седые волосы всего до 20-ти процентов.

Некоторые семи-перманентные красители разработаны с таким расчетом, чтобы их было возможно полностью смыть после 1-2-кратного мытья; такие средства часто называются «временными» красителями, они содержат максимально крупные пигменты, которые закрепляются только на поверхностном слое волос. Краситель обычно наносится распылителем (лак), а также непосредственно из тюбика аппликатором (гель, тушь). Временные красители также могут содержаться в шампунях, кондиционерах и ухаживающих лосьонах.

Тип 3. Деми-перманентные

Деми-перманентные продукты. Слабо-оксидативные, с незначительной степенью осветления. Все ингредиенты химические, требуют участия щелочи и перекиси водорода. Результат окрашивания зависит от исходной базы. Процесс окрашивания носит химический характер.

Деми-перманентные красители – это относительно новая линия окрашивающих продуктов, комбинирующих перманентную и семи-перманентную технологии. Полу-перманентный процесс – это одновременно окислительный процесс и депонирование (накопление) пигментов прямого действия, поскольку деми-красители содержат и полуфабрикаты цвета, и готовые цветовые пигменты. Слабый раствор перекиси водорода позволяет полуфабрикатам цвета сформировать конечный пигмент после проникновения сквозь кутикулу, в то время как пигменты прямого действия главным образом депонируются между внешними слоями кутикулы.

Деми-перманентные красители обычно вымываются после 10-25-кратного мытья головы. Чаще всего такие красители не содержат аммиак, работают с самыми слабыми пероксидными лосьонами, что гарантирует деликатное воздействие красителя и яркий, насыщенный цвет.

Тип 4.  Перманентные окислительные красители

Перманентные окислительные красители. Все ингредиенты химические, краситель полностью перекрывает исходный цвет волос, и результат окрашивания мало зависит от базового цвета. Компоненты требуют участия аммиака (щелочи) и перекиси водорода. Процесс окрашивания носит химический характер.

Оксидативные красители включают три основных химических компонента: щелочной агент, бесцветные пигментные полуфабрикаты и базовый крем. Щелочной агент (аммиак) разрыхляет волосы и раскрывает внешний кутикулярный слой; в это же время аммиак действует, как катализатор для окисляющего агента в составе оксидирующего лосьона – перекиси водорода. В результате полуфабрикаты цвета начинают проникать сквозь слои кутикулы.

Пероксидные лосьоны имеют различную концентрацию, смешиваются с крем-красителями в различных пропорциях, и имеют двойное назначение. Кислород, освобожденный из перекиси водорода, осветляет натуральный пигмент волос и, в то же время, активирует пигментные полуфабрикаты, чтобы соединить их в большие молекулы пигмента внутри кортекса (реакция полимеризации). Новые сформированные мета-пигменты уже не способны выйти сквозь слои кутикулы обратно (см. изображение Оксидативный процесс в волосе). При слабой концентрации перекиси водорода возможно легкое изменение базового, более сильная концентрация перекиси приведет к более светлому, интенсивному результату.

Оксидативные красители имеют свойство вымываться быстрее, если волосы повреждены. Это происходит потому, что слои кутикулы остаются приоткрытыми или, при запущенных случаях с истонченными волосами, обнажен сам кортекс. Дополнительное воздействие солнечного излучения или неправильное использование продуктов ухода и стайлинга усиливает эти повреждения. Используйте соответствующие продукты ухода за волосами.

Тип 5. Обесцвечиватели. 

В состав этих продуктов входят персульфаты, щелочь и перекись водорода. Обесцвечивание позволяет максимально поднять глубину тона, как на натуральной, так и на ранее окрашенной базе. Процесс окрашивания носит химический характер.

Обесцвечивание (Монография 1) представляет собой частичное или полное растворение природного меланина, содержащегося в волосе. В основе самого распространённого метода – использование реакции между аммиаком и перекисью водорода (h3O2). Перекись водорода погружается в кислую среду лосьона, который в момент приготовления красителя смешивается со щелочным компонентом. Щелочная среда – непременный спутник обесцвечивания, так как, с приближением уровня рН к кислотному, способность продукта к осветлению снижается. В качестве щелочи обычно используется аммиак, поскольку с его помощью достигается наилучший результат обесцвечивания. Для придания составу густой консистенции, в состав подобных препаратов вводятся загустители. Степень обесцвечивания в основном зависит от времени воздействия – для тёмных волос процедура будет длиться гораздо дольше. После осветления часто необходимо провести дополнительную нейтрализацию с помощью тонирования (Монография 2).

Обесцвечивание происходит в два этапа. Первый этап заключается в уменьшении и осветлении гранул меланина. Этот процесс характеризуется изменением цвета волос от чёрного к коричневому, в результате волосы начинают проявлять красный подтон, особенно это заметно при обесцвечивании тёмных волос. За фазой осветления следует более длительная фаза растворения. Точная биохимия, лежащая в основе этих процессов, ещё до конца не изучена, но считается, что на стадии осветления разрушаются химические соединения, поддерживающие стабильность пигментных частиц, в то время как на стадии растворения происходит распад полимерных структур меланина. После обесцвечивания (Монография 2) структура волоса приобретает другое качество, поэтому использование кондиционеров нужно считать обязательным. Только использование профессиональных средств ухода будет поддерживать здоровое состояние окрашенных волос.

Растительные красители.

Растительные красители для волос были известны, насколько мы знаем, еще со времен Древнего Египта – в то время использовались кошениль (кошенильный червь, красный жук) и хна. Однако с 1970-го года красители с натуральными компонентами вновь стали популярной альтернативой искусственным красителям.

Растительные красители работают почти так же, как современные семи-перманентные продукты. Пигменты прямого действия, которые в готовой форме содержатся в растительном красителе, проникают во внешние слои структуры волоса. Эти молекулы маскируют натуральный пигмент, отражая и поглощая различные волны светового спектра, что создает естественный цветовой результат. Обычно такие продукты изменяют только оттенок волос, однако некоторые красители могут иметь умеренный осветляющий эффект.

Растительные красители по составу очень близки кератину – компоненту, из которого состоят волосы; поэтому растительные пигменты имеют способность постепенно проникать глубоко в ствол волоса. Волосы, окрашенные растительным продуктом, обычно обладают хорошим блеском из-за вяжущих свойств этих продуктов.

Окрашивание airtouch | Санкт-Петербург | Цены | Портфолио | Мастера | Отзывы | Советы

Новая техника окрашивания airtouch используется в России сравнительно недавно. Такую услугу оказывают не все салоны. Мастера в студии Екатерины Русиной придадут вашим волосам ухоженный роскошный вид и помогут сохранить этот эффект до полугода. Это оптимальный вариант для занятых женщин, желающих всегда быть на высоте.

Для кого подходит: типы волос, возраст

Окрашивание в технике airtouch одинаково красиво смотрится и на светлых, и на тёмных прядях. Строгих возрастных рамок эта процедура не имеет. Она подходит для молодых девушек и женщин зрелого возраста.

Отзывы об airtouch свидетельствуют о том, что процедура не вредит даже тонким и ослабленным прядям, а значит, применять можно для любых типов волос. Они не путаются после процедуры и не тускнеют в течение длительного времени (до шести месяцев). Волосы после airtouch выглядят гладкими и сияющими. Отсутствие резкого контраста между цветами придаёт причёске естественный и ухоженный вид. Кому идёт airtouch? Любым представительницам прекрасного пола, предпочитающим краситься в несколько оттенков.

О методе окрашивания

Airtouch нередко называют мелированием, но это разные техники. Можно сказать, что новый способ окрашивания постепенно вытесняет мелирование из индустрии красоты. В буквальном переводе с английского «Аир Тач» — прикосновение воздуха.

Своё название процедура получила благодаря воздействию на каждую прядь холодным воздухом в процессе нанесения краски. Таким образом из локона отсеиваются самые слабые, мелкие и непослушные волоски. Оставшаяся прядь окрашивается в тёмный или светлый оттенок.

Секреты техники

Такая техника окрашивания является сложной, поэтому доверять её лучше опытным мастерам. Airtouch в домашних условиях, не имея определённых навыков, сделать не получится. Это перевод времени и денег на краску. Плавных и равномерных переходов от одного оттенка к другому в результате не выйдет.

Все про airtouch рассказать невозможно. Ведь у мастеров, работающих с этой техникой, есть свои маленькие секреты. Хотите разобраться, что такое airtouch? Вот несколько нюансов процедуры:

  • перед походом в салон не нужно мыть волосы, чтобы защитный слой жира предотвратил повреждение структуры прядей при воздействии на них краски.
  • во время процедуры окрашиванию подвергается около 50-60% волос, поскольку ослабленные и непослушные отсеиваются при обдуве холодным воздухом.
  • при подборе оттенков мастер учитывает пожелание клиента и цветотип внешности.
  • кончики, особенно при использовании техники airtouch на тёмные волосы, осветляются примерно на восемь тонов, пряди от корней до кончиков — на пять тонов.
  • цена airtouch зависит от длины волос и используемых материалов.

Шатуш, мелирование и airtouch — разные техники. Мелирование отличается наличием резких переходов между прядями. У шатуша переходы плавные, но горизонтальные. Новая техника предполагает вертикальное окрашивание. Но границы между оттенками при «аиртач» мягкие, градиентные, едва уловимые. Особенно при окрашивании airtouch на светлые волосы.

Обращайтесь в нашу студию, если хотите найти «своего мастера», умеющего работать в технике «аиртач».

Окрашивание бактерий по Граму | справочник Пестициды.ru

Окрашивание в фиолетовый цвет
грамположительной бактерии Bacillus thuringiensis

Окрашивание в фиолетовый цвет


грамположительной бактерии Bacillus thuringiensis

Грамотрицательные и грамположительные бактерии отличаются строением клеточной стенки. Метод окрашивания бактерий по Граму был предложен в 1884 году датским ученым Х. Грамом[2]. К грамотрицательным бактериям, в частности, относятся кишечные палочки, сальмонеллы, бруцеллы, возбудители дизентерии, холеры, уксуснокислые бактерии, семейство Псевдомонадовые (Pseudomonadaceae).

Основы и сущность метода

Метод окрашивания бактерий по Граму основан на различной способности микроорганизмов удерживать в клетке красители трифенилметанового ряда – кристаллический фиолетовый или генциановый фиолетовый. Сущность метода основана на различии в химическом составе и строении клеточной стенки бактерий[2][1].

Как уже было указано, все бактерии по этому признаку делят на две группы:

  • грамположительные – красящиеся по Граму;
  • грамотрицательные – не красящиеся по Граму[1].

Техника окрашивания бактерий по Граму

Методика поверки бактерий на окрашивание по Граму включает следующие операции:

  1. На обезжиренное предметное стекло наносят в трех местах три капли воды и готовят три тонких мазка различных видов бактерий. При этом по краям располагают контрольные мазки с заведомо известным отношением к окраске по Граму. В центре – мазок исследуемой культуры[1].
  2. Мазки высушивают и фиксируют в пламени спиртовки[1].
  3. Мазки окрашивают в течение одной минуты генцианвиолентом. Для этого на предметное стекло кладут полоску фильтровальной бумаги, пропитанной красителем, и смачивают ее водой[1].
  4. Бумажку с красителем удаляют, на препарат наносят раствор Люголя (водой промывать не надо) и выдерживают 60 секунд, до полного почернения мазка[1].
  5. Не промывая водой, препарат обрабатывают 96% спиртом в течение 15–20 с. При этом предметное стекло покачивают. Важно четко соблюдать указанное время обесцвечивания, поскольку при увеличении его продолжительности наблюдается обесцвечивание и грамположительных бактерий[1].
  6. Препарат промывают водой и накладывают на его поверхность полоску фильтровальной бумаги, пропитанной фуксином Пфейфера, смачивают ее водой и окрашивают в течение 60 секунд[1].
  7. Фильтровальную бумагу с красителем удаляют, препарат промывают водой и осушают чистой фильтровальной бумагой[1].
  8. На препарат наносят кедровое масло и рассматривают с иммерсионным объективом[1].

После такой обработки грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый или синий цвет, а грамотрицательные – в красный[3][1].

 

Составитель: Григоровская П.И.

 

Страница внесена: 10.12.20 15:46

Последнее обновление: 13.04.21 13:27

Статья составлена с использованием следующих материалов:

Литературные источники:

1.

Красникова Л.В., Гунькова П.И. Общая и пищевая микробиология: Учеб. пособие. Часть I. – СПб.: Университет ИТМО, 2016. – 134 с &nbspСкачать >>>

2.

Лысак В.В. Микробиология : учеб. пособие / В. В. Лысак. – Минск: БГУ, 2007 – 430 с

Источники из сети интернет:

3.

Изображения (переработаны):

4. Свернуть Список всех источников

Лучше не надо: типы окрашивания, которые идут не всем — Красота

какое окрашивание подойдет не всем

Фото: www.unsplash.com

Казалось бы, выбирая окрашивание, ориентируемся на собственные предпочтения и тип внешности, какие могут возникнуть проблемы? Но все дело в том, что мы часто решаемся на определенный тип окрашивания, когда оно уже несколько сезонов не слишком актуально, а иногда и вовсе становится антитрендом. Кроме того, многие техники и виды окрашивания довольно трудно назвать подходящими для большинства. Давайте выясним, на какие предложения мастера в салоне лучше не соглашаться сразу.

Розовое золото

Супермодный оттенок, который чаще всего выполнялся в технике омбре. Конечно, наибольший эффект от красителя проявлялся на светлых волосах, брюнеткам приходилось труднее, но тем не менее розовые «головы» можно было встретить везде еще этим летом. Сегодня же этот оттенок уже не вызывает былых восторгов. К тому же обладательницам чувствительной кожи или кожи, склонной к куперозу, стоит осторожнее подбирать розоватые или теплые оттенки волосы, так как они сделают еще больший акцент на проблемах кожи.

Стальной русый

Довольно привлекательный эффект, который переживал свой пик еще прошлой зимой. Не было человека, который бы не видел «модную седину» в «Инстаграме» хотя бы раз, и при этом не подумал про себя: «А почему бы и нет?» Мы согласны, что стальной оттенок смотрится эффектно и имеет меньше «противопоказаний», чем розовый или медовый оттенок, но все же вас будут воспринимать, как человека, который «задержался» в прошлом сезоне и не в курсе, что серебристый русый/блонд уже далеко не тренд.

Цветное окрашивание

Кислотные пряди уже не вызывают смешанных чувств, если перед нами на улице мы видим человека с насыщенным желтым или синим оттенком волос. Сегодня подобный способ самовыражения не кажется чем-то из ряда вон, хотя каких-то 10 лет назад такое окрашивание могло стать серьезным поводом для многих компаний в отказе на собеседованиях. Пусть сегодня порядки уже не такие жесткие, кислотное окрашивание смотрится уместно лишь на школьниках или топовых блогерах, но никак не на бизнес-леди, которая уже давно вышла из этого возраста. Учитывайте этот момент.

Окрашивание в один тон

Универсальная техника, которая приелась почти всем. Здесь важно отметить, что окрашивание «сплошняком» делает цвет плоским и визуально скрадывает объем, с чем сталкиваются многие девушки, предпочитающие окрашивание в домашних условиях без привлечения колориста. Не советуем проводить самостоятельные эксперименты, доверьте свои волосы профессионалу, который расскажет, как сделать акценты именно в вашем случае и при этом не испортить волосы.

Пряжа и типы ее окрашивания

Сегодня прилавки специализированных магазинов и страницы интернет площадок пестрят разнообразием оттенков и ярких цветовых гамм различных типов пряжи. Причем, выбрать из этого разнообразия иногда достаточно трудно, поскольку далеко не всегда мы имеем представление о том, как тот или иной окрас ляжет в готовое изделие. И это характерно не только для начинающих, но и для вполне опытных вязальщиц: современные технологии, применяемые в производстве пряжи, каждый год нам предлагают что-то новое.

В этой статье мы остановимся на нескольких вариантах окраса пряжи как натуральной, так и смешанной или синтетической. Коснемся мы не только тех образцов, которые можно найти в нашем интернет магазине, но и предложений, присутствующих на Российском рынке в целом. Итак, говорим о способах окраса пряжи.

 

 

 

Различают два основных типа окрашивания пряжи – природными (натуральными, или естественными) и искусственными (синтетическими) красителями.К природным красителям относятся выжимки (отвары) плодов, листьев, стеблей или корней отдельных растений (например, свекольный бетанин, экстракт паприки, отвар луковой чешуи, куркумин, шафран, хлорофилл, мареновый ализарин, антоцианы и т.д.), а к искусственным (включая пигменты) –  продукты химии и нефтехимии (такие как анилин, фуксин, мовеин, синтетический индиго и т.п.).

Природные красители делаются из экологически чистого сырья, и вязаные изделия, сделанные из пряжи, окрашенной натуральными красителями, не дают аллергических реакций, чего не скажешь об синтетических красителях: часто такая пряжа не совсем комфортна для тела и годится только для верхней одежды.

 
Главный недостаток красителей на натуральной основе в том, что при крашении пряжи они производят обычно не очень насыщенные цвета. А если при этом не использовать  закрепители, то цвета таких вязаных изделий со временем и вовсе становятся блеклыми. Пряжа, окрашенная при помощи синтетических красителей, напротив, может иметь самые яркие оттенки. Но есть фирмы, как, например, в случаях с японской фирмой «Норо», уругвайской «Малабриго» или шотландсой «Шиласдейр», которые успешно используют натуральное сырье и получают при этом  весьма яркие и устойчивые цвета.Теперь поговорим о том, какие виды пряжи по способу окрашивания распространены на своременном международном рынке.
 

Однотонное  (гладкое, или ровное) окрашивание

Это обычный способ крашения, когда пряжа равномерно окрашивается в один цвет. Такую пряжу иногда называют ровницей, хотя это не совсем правильно. На самом деле ровница — это промежуточный продукт при производстве пряжи. Другими словами, это слабоскрученная нить, полуфабрикат, из которого в дальнейшем и получается конечный продукт. Что же касаетя однородно окрашенной пряжи, то это — классический вариант, который подходит для абсолютно любого вязания (в зависисмотси от состава).

Следует отметить, что не смотря на обилие различных модных окрасов, применение новейших технологий (как, например, принтование) именно однородно орашенная пряжа сегодня является наиболее популярной. Причина здесь не только в том, что такие нитки будут дешевле каких нибудь модных фантазийных, но и в универсальности: однотонную пряжу часто комбинируют между собой, с различными многцветными, используя ее как основу. Кстати, многие именитые производители в своих коллекциях тона подбирают таким образом, что два-три рядом расположенных оттенка (в цветовой палитре) чудесно подходят для вязания в одном изделии.

 

 

 

Секционное крашение

Это такой способ окрашивания пряжи, при котором нить красится её отдельными частями (секциями). По-английски – это «пулинг»  (pooling), а в народе пряжу, окращенную этим способом, часто называют «секционкой». Как понятно из названия, эта разновидность пряжи получается путем окрашивания нитей в разные цвета секциями. Технология весьма похожа на деграде (см. ниже), но в отличие от нее в секционной пряже используются более контрастные переходы и различные цвета, а не просто оттенки. Иногда производители одному цвету отдают предпочтение, делая оркашенные из него участки более длинными. В этом случае в готовом изделии будет превалировать наличие именно этого цвета. Наиболее равномерно распределение цветов в при вязании секционной пряжей заметно тогда, когда будете вязать одним целым полотном.

Очень важно при вязании больших изделий соблюсти переход от клубка к клубку, иначе будет заметен резкий переход от одного цвета к другому. Рекомендуется для таких вещей, как полувер, кофта или жакет искать секционную пряжу в больших мотках, чтобы одного хватило полностью на перед или спинку. Рукава же в этом случае рекомендуется вязать вкруговую, безшовным способом. Так же важно следить за тем, чтобы в клубках, из которых вы вяжете, последовательность цветов была одинаковой: бывают ситуации, когда чередование в двух разных клубках  обратное. В этом случае будут проблемы при вязании.

В видео, которое мы предлагаем просмотреть ниже, уделено внимание двум видам пряжи — секционной и меланжевой. И это не спроста: очень часто неопытные вязальщицы их путают.

 

 

Окраска «деграде» или «омбре»?..

Пряжу деграде (от франц. смягчение) некоторые производители называют омбре (на латыни – тень). Поэтому, если Вы встретите продукцию разных брендов с такими названиями, – это один и тот же способ окраски. Для него характерны мягкие переходы одного цвета в различные оттенки, например, от светло-голубого к тёмно-голубому, от ярко-красного к бардовому. Причём в пряже нет явной границы цветов – всё это делается плавно и еле заметно. Отсюда, собственно, и название. Ярких представителей такой пряжи можно найти и в нашем интернет-магазине в коллекции фирмы Lang Yarns, а именно – серию Sol Degrade.

Стоит отметить, что внешний вид готового изделия (или полотна) полностью находится в зависимости от длины окрашенных в один тон сегментов. При подборе пряжи деграде следует обращать на это внимание, чтобы в результате переход цвета из оттенка в оттенок не продолжался на протяжении, например, всей спинки или полочки. Помните: чем короче переход, тем заметнее и интереснее будет изделие. Правда, слишком короткий переход – это тоже не совсем хорошо: полотно получится слишком пёстрым. Однако на практике вывязывания изделий, например, японская фирма «Норо» не всегда следует этому общему правилу.

 

  

     

Пряжа мулине

Этот тип пряжи часто ошибочно называют меланжевым, хотя на самом деле они отличаются друг от друга. То, что на самом деле называется мулине, получают обычно в процессе скручивания различных ниток разных цветов и больше относится к типу пряжи, а не способу окрашивания. Их может быть как две, так и более – тут важен сам принцип. Меланж же можно получить как при смешивании нитей разных цветов, так и путем окрашивания пряжи короткими секциями. Более того, нитки, используемые в производстве пряжи мулине, могут иметь даже разную толщину, но за счет скручивания готовая пряжа все равно равномерна по всей длине – без утолщений.

Данный тип пряжи неплохо подходит для использования в вязании техниками, в результате которых получаются узорчатые ткани – жаккард, ленивый жаккард, интарсия (техника вывязывания рисунков из нескольких клубков разноцветной пряжи, определенным образом между собой соединяющихся), поскольку мулине весьма неплохо смотрится в сочетании с однотонной пряжей. Кстати, жаккард — разновидность принтовой окраски пряжи, при вязке которой полотна заданной ширины проявляется однотипный, повторяющийся рисунок, имитирующий жаккардовую ткань, и как правило такого эффекта можно добиться при вывязывании носков или маленьких изделий, например джемперочков для детей. Этот тип окраса характерен для т.н. носочной пряжи.

А вот при вязании рельефных узоров следует выбирать пряжу мулине с таким расчетом, чтобы цвета нитей, используемых в ней, как можно меньше контрастировали между собой. В этом случае узор будет более заметным и объемным. Стоит отметить так же, что у некоторых производителей можно встретить пряжу, в которой мулине делают из секционно окрашенных нитей. Если Вы решили попробовать вязать из такой необычной пряжи, при работе обращайте внимание на расположение окрашенных участков в изделии, чтобы получить максимально красивый и гармоничный результат.

Продолжение следует

Топ-5 типов окрашивания (со схемой)

Следующие пункты выделяют пять основных типов окрашивания. Типы: 1. Простое окрашивание 2. Дифференциальное окрашивание 3. Окрашивание по Граму 4. Кислотно-быстрое окрашивание 5. Окрашивание эндоспор.

Окрашивание
Тип № 1. Простое окрашивание:

Окрашивание микроорганизмов путем нанесения одного красителя на фиксированный мазок называется простым окрашиванием. Фиксированный мазок покрывают пятном на определенный период, после чего раствор смывают водой и промокают насухо.Основные красители, такие как кристаллический фиолетовый, метиленовый синий и карболфуксин, часто используются при простом окрашивании для определения размера, формы и расположения прокариотических клеток. (Рис 5.1)

Окрашивание
Тип # 2. Дифференциальное окрашивание :

Эти процедуры окрашивания используются для различения организмов на основе свойств окрашивания. Они немного более сложны, чем простые методы окрашивания, так как клетки могут подвергаться воздействию более чем одного красителя или окрашивания, например, использование окрашивания по Граму, которое делит бактерии на два класса — грамотрицательные и грамположительные.

Окрашивание
Тип # 3. Окрашивание по Граму :

Это один из наиболее важных и широко используемых методов дифференциального окрашивания в микробиологии. Этот метод был представлен в 1884 году датским врачом Кристианом Грамом. Процедура окрашивания по Граму представлена ​​на рис. 5.2.

На первом этапе мазок окрашивают кристаллическим фиолетовым основным красителем (Первичное окрашивание) с последующей обработкой раствором йода, действующим в качестве протравы.

Йод увеличивает взаимодействие между клеткой и красителем, так что клетки сильно окрашиваются.Затем мазок обесцвечивают, промывая этанолом или ацетоном. На этом этапе создается дифференциальный аспект окраски по Граму. Грамположительные бактерии сохраняют кристаллический фиолетовый цвет и становятся бесцветными.

Наконец, мазок контракрашивается простым основным красителем, отличным по цвету от кристально-фиолетового. Сафранин является наиболее распространенным контрокрасителем, который окрашивает грамотрицательные бактерии от розового до красного и оставляет грамположительные бактерии темно-пурпурным. (Рис 5.2)

Различия в ответах на окрашивание по Граму могут быть связаны с химическими и физическими различиями клеточных стенок.Стенка грамотрицательных бактерий представляет собой тонкую, сложную многослойную структуру и содержит относительно высокое содержание липидов в дополнение к белку и мукопептиду.

Более высокое количество липидов легко растворяется спиртом, в результате чего образуются большие поры в клеточной стенке, что способствует утечке комплекса кристалл-фиолетовый-йод (CV-I), что приводит к обесцвечиванию бактериальной клетки.

Который позже принимает пятно и становится красным. Напротив, клеточная стенка грамположительных бактерий толстая и химически простая и состоит в основном из мукопептидов.При обработке спиртом он вызывает обезвоживание и закрытие пор клеточной стенки, тем самым не позволяя потерять комплекс (CV-I), и клетки остаются пурпурными.

Окрашивание
Тип # 4. Кислотно-быстрое окрашивание :

Это еще одна важная процедура дифференциального окрашивания. Чаще всего он используется для идентификации Mycobacterium spp. Эти бактерии имеют клеточную стенку с высоким содержанием липидов, таких как миколиновая кислота — группа гидроксилипидов с разветвленной цепью, которые препятствуют легкому связыванию красителей с клетками.

Их можно окрашивать методом Циля-Нульсена, который использует тепло и фенол для выделения основного фуксина в клетки. Mycrobacterium spp. были пронизаны основным фуксином, который нелегко обесцвечивается подкисленным спиртом (кислым спиртом) и поэтому считается кислотоустойчивым.

Незасушливые быстрые бактерии обесцвечиваются засушливым спиртом и, таким образом, окрашиваются в синий цвет контркрашиванием метиленовым синим.

Окрашивание
Тип # 5. Окрашивание эндоспор :

Спорообразование происходит у некоторых родов бактерий, чтобы противостоять неблагоприятным условиям.Все бактерии не могут образовывать споры, только несколько родов бактерий, включая Bacillus, Clostridium, Desulfotomaculum, создают спорулирующую структуру внутри вегетативных клеток, называемую эндоспорами.

Морфология и расположение эндоспор варьируются в зависимости от вида и важны для идентификации. Эндоспоры плохо окрашиваются большинством красителей, но после окрашивания они сильно сопротивляются обесцвечиванию.

При процедуре Шаффера-Фултона эндоспоры сначала окрашивают путем нагревания бактерий малахитовым зеленым, который представляет собой очень сильное пятно, способное проникать в эндоспоры.После обработки малахитовым зеленым остальная часть клетки промывается водой от красителя и окрашивается сафранином. Этот метод дает зеленую эндоспору с красными вегетативными клетками. (Рис. 5.3)

Семь типов пятен — TheFinishingStore

Мы используем термин «морилка» для обозначения красителя, который мы наносим на древесину, чтобы изменить ее цвет. Но пятна не равны. Помимо очевидных различий в цвете, существует как минимум семь категорий коммерческих пятен, каждая из которых наносится и окрашивается по-своему.Если вы действительно хотите контролировать окрашивание, вам необходимо понимать различия и понимать, как определять и выбирать каждый тип.

Масляное пятно

Масляные пятна являются наиболее широко доступными и представляют собой тип пятен, о котором думает большинство людей, когда думают о пятнах. Их проще всего использовать, потому что связующее на основе льняного масла (иногда смесь льняного масла и лака) дает достаточно времени, чтобы удалить излишки, прежде чем пятно высохнет, даже на больших проектах.

Вы можете распознать масляные пятна по их разбавителю и очищающему растворителю: уайт-спирит (разбавитель для краски).Большинство производителей называют его «нефтяным дистиллятом». Некоторые бренды используют более техническое (и недружелюбное к пользователю) название: «алифатический углеводород».

Хотя некоторые масляные пятна содержат только пигмент, многие содержат пигмент и краситель, а некоторые — только краситель. Однако тип используемого красителя, похоже, не сильно влияет на внешний вид морилки на древесине из-за воздействия связующего. (Это касается всех пятен со связующим.)

Выберите масляную морилку для нанесения под любое покрытие, кроме водной основы, и во всех случаях, когда вам не нужны какие-либо особые характеристики, предлагаемые другими морилками.Перед нанесением финишного покрытия дайте высохнуть в течение ночи в теплом помещении.

Краска для лака

Пятна от лака во всем напоминают масляные пятна, кроме одного. При пятнах от лака в качестве связующего используется только лак (иногда полиуретановый лак), поэтому пятна от лака сильно сохнут, а масляные — нет. Таким образом, пятно от лака можно нанести щеткой на дерево и оставить сохнуть, не вытирая, в то время как излишки масляного пятна необходимо стереть, иначе покрытие, нанесенное сверху, может отслоиться или отслоиться.

Можно представить пятно от лака как алкидную краску с меньшим количеством красителя.

К счастью, большинство производителей маркируют пятна от лака, чтобы отличить их от масляных пятен, потому что для пятен от лака используется тот же растворитель, что и для масляных пятен: уайт-спирит. Если вы не уверены, является ли пятно лаком или маслом, нанесите лужу пятна на верхнюю часть банки или на другую непористую поверхность и посмотрите, сильно ли оно сохнет через несколько дней в теплой комнате. Густые масляные пятна никогда не затвердевают.

Пятна от лака труднее использовать, чем масляные, потому что у них меньше времени, чтобы стереть излишки.Расчесывание и удаление излишков обычно оставляет заметные следы от кисти, которые выделяются, потому что они цветные.

Выберите морилку, чтобы покрыть уже окрашенную и готовую поверхность, тусклую или потертую, или если вы стираете излишки на небольшом объекте.

Пятно на водной основе

Для красителей на водной основе в качестве связующего используется отделочный материал на водной основе, а органический разбавитель заменяется водой. Таким образом, эти пятна меньше загрязняют, меньше раздражают окружающих и их легче вымыть, чем пятна от масла или лака.

Пятна на водной основе можно распознать по их разбавителю и очищающему растворителю, которым является вода.

Морилки на водной основе обычно лучше всего использовать под лаками на водной основе, потому что они плохо сцепляются с масляными или лаковыми пятнами, если вы не дадите им неделю или больше, чтобы они полностью высохли. К сожалению, морилки на водной основе сложнее использовать, потому что они приподнимают текстуру древесины и быстро сохнут.

Шлифовка выступающих волокон неизбежно приводит к потере цвета в некоторых местах.Чтобы этого не произошло, приподнимите зерно и отшлифуйте его перед нанесением морилки или закопайте выступившее зерно.

Чтобы сначала поднять волокна, намочите древесину влажной тканью. Дайте дереву высохнуть на ночь или хотя бы на несколько часов в теплом сухом помещении. Затем отшлифуйте шероховатость и нанесите морилку. Чтобы скрыть выступающие зерна, просто нанесите первый слой финишного покрытия на пятно и рельефные волокна, а затем отшлифуйте до гладкости.

Преодолеть быстрое высыхание труднее. Вы можете добавить медленно испаряющийся растворитель (обычно пропиленгликоль), поставляемый некоторыми производителями, или вы можете добавить замедлитель схватывания лака.Но добавление любого из них снижает интенсивность цвета пятна и сводит на нет основную цель использования продуктов на водной основе — уменьшить воздействие растворителей.

Лучший способ — разделить ваш проект на более мелкие части и нанести и стереть пятно с каждой, прежде чем переходить к следующему. Вы также можете попросить второго человека следовать за вами, быстро стирая лишнее.

Выберите морилку на водной основе для использования под лаком на водной основе.

Гель-краситель

Большинство пятен от геля имеют масляную основу, поэтому их разжижают и очищают уайт-спиритом.Их можно отличить по толщине, как у майонеза. Это делает их довольно грязными в применении, но гелевые морилки решают единственную самую большую проблему при отделке древесины — пятна на сосне.

Пятна — это неравномерная окраска, вызванная различной плотностью и отложениями смолы в древесине, и это единственная проблема, которую нельзя решить путем зачистки и повторного использования. Единственный способ удалить пятно — отшлифовать его, что требует очень много времени, или покрасить дерево, что редко бывает желательным.

Таким образом, гель-морилка играет очень важную роль в отделке дерева. И они намного более предсказуемы и просты в использовании (можно наносить только один продукт), чем нанесение кондиционера для дерева или лака перед окрашиванием, что является наиболее часто предлагаемым методом.

Выбирайте гелевую морилку, особенно при окрашивании сосны, а также при окрашивании другой древесины, склонной к появлению пятен, если вы хотите уменьшить пятно.

Морилка

Для пятен от лака используются очень быстро сохнущие связующие и растворители.Профессиональным мастерам нравятся эти пятна, потому что лак можно нанести в течение 15 минут или около того, а пятно можно добавить в лак, чтобы сделать «тонер» для регулировки цвета между слоями отделки. Вероятно, это использование дало этим пятнам свое название, потому что они не используют лак в качестве связующего. Они используют очень быстросохнущий лак — короткоживущий масляный лак.

Пятна от лака можно распознать по их сильному резкому запаху, вызванному растворителями, которые обычно включают ксилол и различные кетоны.Они должны быть указаны на банках.

Лаковые морилки трудно использовать из-за их очень быстрого высыхания. Профессионалы обычно работают парами: один человек распыляет пятно, а другой следует сразу за ним, вытирая излишки.

Выберите морилку для лака, если вы хотите сократить время между окрашиванием и отделкой и работаете вместе с кем-то еще или окрашиваете небольшие поверхности. Также выберите морилку для лака, если вы хотите добавить краситель в лак.

Водорастворимый краситель

Водорастворимые красители продаются в виде порошка, что упрощает их идентификацию.Эти красители, также называемые «анилиновыми» красителями, были разработаны в конце девятнадцатого века для использования в текстильных изделиях, а затем адаптированы для дерева. Они были очень популярны в мебельной промышленности до 1950-х годов, когда были разработаны металлокомплексные красители, и они продолжают оставаться популярными среди любителей и небольших мастерских по дереву из-за их богатства, широкого выбора цветов и простоты использования.

Чтобы сделать жидкий краситель из порошка, просто растворите его в воде. Соотношение одной унции порошка в одной литре воды обычно дает стандартный цвет, но вы можете растворить больше или меньше порошка, чтобы получить более или менее интенсивный цвет.Чем горячее вода, тем больше порошка вы сможете растворить. Используйте дистиллированную воду, если в водопроводной воде так много остатков металла, что это влияет на цвет.

Краситель имеет неограниченный срок хранения как в порошковой, так и в жидкой формах.

Водорастворимые красители имеют два больших преимущества и один недостаток по сравнению с красителями, указанными выше.

Одним из преимуществ является то, что краситель не затемняет древесину, какой бы темной она ни была. Черный краситель, например, может окрасить дерево в черный цвет, не скрывая полностью фигуры.

Кроме того, поскольку в красителе нет связующего вещества, вы можете затемнить, осветлить или изменить цвет прямо на дереве даже после того, как краситель полностью высохнет. Нанесите больше краски, чтобы сделать цвет темнее. Протрите влажной или влажной тканью, чтобы осветлить цвет. Нанесите краситель другого цвета, чтобы изменить цвет.

Проблема с красителем заключается в том, что он тускнеет в ультрафиолетовом свете, что означает солнечный свет и флуоресцентный свет. Возможно, вы не захотите использовать краситель, если ваш проект будет подвергаться воздействию одного из этих источников света.

Два родственных, но более редко используемых красителя — это растворимые в спирте и растворимые в масле порошковые красители. Специалисты по подкраске иногда используют спирторастворимые красители в сочетании с шеллаком, чтобы воспользоваться преимуществом быстрого высыхания, а маслорастворимые красители иногда добавляют к масляным пятнам.

Выберите водорастворимый краситель, если вы хотите более глубокий или более равномерный цвет, чем можно получить с морилками, содержащими связующее, или если вы хотите лучше контролировать цвет после нанесения морилки на дерево.

Металлокомплексный (металлизированный) краситель

Слабость красителя заключается в том, что он довольно быстро тускнеет в УФ-свете, поэтому в 1950-х годах был разработан более устойчивый к выцветанию краситель, названный «металлокомплексный» или «металлизированный» краситель. Этот краситель все еще тускнеет, но не так быстро.

Металлизированные красители, как правило, разбавлены ацетоном (когда-то использовался метанол) и готовы к использованию. Эти красители имеют маркировку «не для выращивания зерна» или «NGR» и очень популярны в промышленности и в магазинах, которые распыляют их пятна.Краситель можно распылять прямо на дерево, чтобы действовать как морилка, и он очень быстро сохнет, так что отделку можно нанести в течение нескольких минут. Краситель также можно добавлять в лак и распылять в качестве тонера.

Металлизированные красители также доступны в концентрированной жидкой форме, которую можно разбавить водой, спиртом, ацетоном или разбавителем для лака. Использование воды, конечно, дает больше времени для внесения, но дает возможность выращивать зерно.

Выберите металлизированное пятно, если вы хотите более глубокий или ровный цвет, чем можно получить с помощью пигмента.Выберите также, хотите ли вы сократить время между окрашиванием и отделкой или добавить краситель в лак.

Дифференциальные методы окрашивания — Микробиология: лабораторный опыт

Просмотр бактериальных клеток

Микроскоп — очень важный инструмент в микробиологии, но есть ограничения, когда дело доходит до его использования для наблюдения за клетками в целом и бактериальными клетками в частности. Двумя наиболее важными проблемами являются разрешение и контраст.Разрешение — это ограничение, с которым мы ничего не можем поделать, поскольку большинство бактериальных клеток уже приблизились к пределу разрешения большинства световых микроскопов. Контраст, однако, можно улучшить либо с помощью оптической системы другого типа, например, фазового контраста или микроскопа с дифференциальным интерференционным контрастом, либо путем окрашивания клеток (или фона) хромогенным красителем, который не только добавляет контраст, но и дает им тоже цвет.

В микробиологии используется множество различных красителей и процедур окрашивания.Некоторые включают одно пятно и всего несколько шагов, в то время как другие используют несколько пятен и более сложную процедуру. Прежде чем вы сможете начать процедуру окрашивания, клетки должны быть закреплены (размазаны) и зафиксированы на предметном стекле.

Бактериальный мазок — это просто небольшое количество культуры, растекающееся очень тонкой пленкой на поверхности предметного стекла. Чтобы предотвратить вымывание бактерий во время этапов окрашивания, мазок может быть химически или физически «прикреплен» к поверхности предметного стекла.Тепловая фиксация — это простой и эффективный метод, который достигается путем кратковременного пропускания предметного стекла через пламя горелки Бунзена, в результате чего биологический материал становится более или менее прочно прикрепленным к поверхности стекла.

Термофиксированные мазки готовы к окрашиванию. При простом окрашивании в мазок добавляются красители, которые либо притягиваются зарядом (катионный краситель, такой как метиленовый синий или кристаллический фиолетовый), либо отталкиваются зарядом (анионный краситель, такой как эозин или тушь). Катионные красители связывают бактериальные клетки, что хорошо видно на ярком фоне.Анионные красители отталкиваются клетками, поэтому клетки становятся яркими на окрашенном фоне. Примеры того и другого см. На рисунках 1 и 2.

Рисунок 1. Отрицательное окрашивание Cyptococcus neoformans , инкапсулированных дрожжей. Рисунок 2. Положительное окрашивание на Staphylococcus aureus.

Вероятно, наиболее важной особенностью, которая становится очевидной при окрашивании бактериальных клеток, является их клеточная морфология (не путать с морфологией колоний, которая представляет собой появление бактериальных колоний на чашке с агаром).Большинство гетеротрофных и культивируемых бактерий имеют несколько основных форм: сферические клетки (кокки / кокки), палочковидные клетки (палочки / бациллы) или палочковидные клетки с изгибами или изгибами (вибрионы и спириллы соответственно). Существует большее разнообразие форм среди архей и других бактерий, встречающихся в экосистемах, отличных от человеческого тела.

Часто бактерии создают определенные структуры клеток, которые образуются в результате бинарного деления бактериями во время их размножения. Договоренности особенно очевидны с неподвижными бактериями, потому что клетки имеют тенденцию оставаться вместе после завершения процесса деления.И форма, и расположение клеток являются характеристиками, которые можно использовать для различения бактерий. Наиболее часто встречающиеся формы бактерий (кокки и бациллы) и их возможное расположение показаны на рисунках 3 и 4.

Рисунок 3. Возможное расположение бактериальных клеток для кокков. Рисунок 4. Возможное расположение бактериальных клеток для бацилл.

Дифференциальные методы окрашивания

В микробиологии методы дифференциального окрашивания используются чаще, чем простые окрашивания, как средство сбора информации о бактериях.Методы дифференциального окрашивания, которые обычно требуют более одного окрашивания и нескольких этапов, называются таковыми, потому что они позволяют дифференцировать типы клеток или клеточные структуры. Самым важным из них является окраска по Граму. Другие методы дифференциального окрашивания включают окрашивание эндоспор (для выявления бактерий, образующих эндоспоры), кислотостойкое окрашивание (для отличия видов Mycobacterium от других бактерий), метахроматическое окрашивание для выявления гранул, накапливающих фосфаты, и окрашивание капсул (для идентификации инкапсулированные бактерии).Мы будем выполнять процедуры окрашивания по Граму и эндоспор в лаборатории и просматривать подготовленные слайды, которые выделяют некоторые другие клеточные структуры, присутствующие в некоторых бактериях.

Пятно по грамму

Рисунок 5. Бактерии, окрашенные по Граму.

В 1884 году врач Ганс Кристиан Грам изучал этиологию (причину) респираторных заболеваний, таких как пневмония. Он разработал процедуру окрашивания, которая позволила ему идентифицировать бактерии в легочной ткани, взятой у умерших пациентов, как этиологический агент фатальной пневмонии.Хотя метод окрашивания по Граму мало помог в лечении болезни, он значительно упростил диагностику причины смерти человека при вскрытии. Сегодня мы используем методы окрашивания по Граму, чтобы помочь в идентификации бактерий, начиная с предварительной классификации на одну из двух групп: грамположительных или грамотрицательных .

Дифференциальный характер окраски по Граму основан на способности некоторых бактериальных клеток сохранять первичное окрашивание (кристаллический фиолетовый), сопротивляясь процессу обесцвечивания.Окрашивание по Граму включает четыре этапа. Сначала клетки окрашивают кристаллическим фиолетовым с последующим добавлением фиксирующего агента для окрашивания (йода). Затем применяется спирт, который выборочно удаляет пятно только с грамотрицательных клеток. Наконец, добавляется вторичный краситель, сафранин, который окрашивает обесцвеченные клетки в розовый цвет.

Хотя в то время Грам не знал этого, основное различие между этими двумя типами бактериальных клеток — это их клеточные стенки. Стенки грамотрицательных клеток имеют внешнюю мембрану (также называемую оболочкой), которая растворяется во время мытья спиртом.Это позволяет ускользнуть кристально-фиолетовому красителю. Только обесцвеченные клетки поглощают розовый краситель сафранин, что объясняет разницу в цвете между двумя типами клеток. По завершении процедуры окрашивания по Граму грамположительные клетки выглядят пурпурными, а грамотрицательные — розовыми.

При интерпретации мазка, окрашенного по Граму, необходимо также описать морфологию (форму) клеток и их расположение. На рисунке 5 представлены два различных типа бактерий, которые можно различить по реакции окрашивания по Граму, а также по их форме и расположению.Ниже опишите эти характеристики для обеих бактерий:

Грамположительные бактерии: Грамотрицательные бактерии:
Морфология
Расположение

Кислотостойкое пятно

Некоторые бактерии производят воскообразное вещество миколик кислоту , когда они конструируют свои клеточные стенки.Миколиновая кислота действует как барьер, защищающий клетки от дегидратации, а также от фагоцитоза клетками иммунной системы хозяина. Этот восковой барьер также предотвращает проникновение пятен в клетку, поэтому окраска по Граму не работает с микобактериями, такими как Mycobacterium , которые являются патогенами людей и животных. Для этих бактерий применяется метод окрашивания кислотой быстро .

Рисунок 6. Кислотоустойчивые бациллы в мокроте.

Для проведения кислотостойкого окрашивания термофиксированный мазок заливают основным красителем карбол фуксином, а предметное стекло нагревают на водяной бане с паром.Тепло «плавит» восковую клеточную стенку и позволяет клеткам поглощать краситель. Затем слайду дают остыть и добавляют раствор кислоты и спирта в качестве обесцвечивающего средства. Клетки, которые являются «кислотоустойчивыми» из-за миколовой кислоты в их клеточной стенке, сопротивляются обесцвечиванию и сохраняют первичное окрашивание. Все остальные типы клеток обесцвечиваются. Затем метиленовый синий используется в качестве контрастного красителя. В конце концов, кислотоустойчивые бактерии (КУБ) будут окрашены в ярко-розовый цвет, а все другие типы клеток станут синими.

Методы окрашивания для выделения специфических клеточных структур

Капсула : полисахаридная слизь, окружающая некоторые виды бактерий и несколько типов эукариотических микробов, лучше всего визуализируется при отрицательном окрашивании клеток. В этом методе бактерии сначала смешиваются с пятном, а затем капля смеси распределяется по поверхности предметного стекла в виде тонкой пленки. При использовании этого метода капсулы выглядят как прозрачный слой вокруг бактериальных клеток с темным фоном.

Метахроматические гранулы или другие внутрицитоплазматические тельца : Некоторые бактерии могут содержать накопительные тельца, которые могут окрашиваться. Одним из примеров является грамположительная палочка Corynebacterium , которая накапливает фосфат в структурах, называемых «волютин», или метахроматических гранулах, находящихся внутри клеточной мембраны. Для визуализации внутрицитоплазматических тел у бактерий используются различные методы окрашивания, которые часто дают ключ к идентификации при наблюдении в клетках.

Окрашивание эндоспор

Эндоспоры — это спящие формы живых бактерий, и их не следует путать с репродуктивными спорами, продуцируемыми грибами. Эти структуры производятся несколькими видами грамположительных бактерий, почти всеми бациллами, в ответ на неблагоприятные условия окружающей среды. Две распространенные бактерии, продуцирующие эндоспоры, — это Bacillus или Clostridum . Оба живут в основном в почве и как симбионты растений и животных и производят эндоспоры, чтобы выжить в быстро и часто меняющейся среде.

Процесс эндоспоруляции (образование эндоспор) включает несколько стадий. После того, как бактериальная клетка реплицирует свою ДНК, образуются слои пептидогликана и белка, окружающие генетический материал. После полного формирования эндоспора высвобождается из клетки и может бездействовать в течение нескольких дней, недель или лет. Когда преобладают более благоприятные условия окружающей среды, эндоспоры прорастают и возвращаются к активной работе в качестве вегетативных клеток.

Зрелые эндоспоры обладают высокой устойчивостью к условиям окружающей среды, таким как тепло и химические вещества, что позволяет бактериям выжить в течение очень долгого времени.Эндоспоры, образовавшиеся миллионы лет назад, были успешно возвращены к жизни, просто обеспечив их водой и пищей.

Поскольку оболочка эндоспор очень устойчива к окрашиванию, был разработан специальный метод, чтобы их было легче увидеть в светлопольном микроскопе. Этот метод, называемый «красителем эндоспор » , использует либо тепло, либо длительное время воздействия, чтобы побудить эндоспоры принять первичное пятно, обычно водорастворимый краситель, такой как малахитовый зеленый, поскольку эндоспоры проницаемы для воды.После этапа обесцвечивания, который удаляет краситель из вегетативных клеток в мазке, наносится контрастное сафранин для обеспечения цвета и контраста. При окрашивании этим методом эндоспоры становятся зелеными, а вегетативные клетки окрашиваются в розовый цвет, как показано на Рисунке 7.

Рисунок 7. Бактериальные клетки с эндоспорами, окрашенные методом окраски эндоспор. Рисунок 8. Бациллы с эндоспорами, просматриваемые с помощью фазово-контрастной микроскопии.

Хотя сами эндоспоры устойчивы к методу окрашивания по Граму, бактериальные клетки, захваченные в процессе создания этих структур, могут быть окрашены.В этом случае эндоспоры выглядят как четкие овальные или сферические области внутри окрашенной клетки. Эндоспоры можно также непосредственно наблюдать в клетках с помощью фазово-контрастной микроскопии, как показано на Рисунке 8.

Поскольку многие методы дифференциального окрашивания требуют нескольких этапов и длительного времени, мы не будем выполнять все методы дифференциального окрашивания, описанные выше.

Предварительно окрашенные слайды будут использоваться для визуализации бактериальных капсул, метахроматических гранул и кислотоустойчивых бацилл.Возьмите по одному слайду каждой из трех бактерий, перечисленных в таблице ниже. Просматривая эти слайды, обращайте внимание на «выделенные» структуры. У вашего изолята из окружающей среды может быть одна или несколько из этих клеточных функций, и умение распознавать их поможет в идентификации. Все это следует рассматривать с помощью масляной иммерсионной линзы объектива.

Бактерии Пятно Описание или эскиз ячеек с указанным признаком
Flavobacterium capsulatum Пятно для капсул
Corynebacterium diphtheriae Метиленовый синий (метахроматические гранулы)
Mycobacterium tuberculosis Кислотостойкое краситель

Пятно по грамму

Все процедуры окрашивания следует проводить над раковиной.Будет продемонстрирована процедура окрашивания по Граму, а ее обзор представлен в таблице 1.

Таблица 1. Процедура окрашивания по Граму.
Шаг Процедура Результат
Первичная окраска (кристально-фиолетовый) Добавьте несколько капель кристаллического фиолетового в мазок и оставьте на 1 минуту. Промойте предметное стекло водой. И грамположительные, и грамотрицательные клетки будут окрашены в пурпурный цвет кристаллическим фиолетовым красителем.
Протрава (йод) Добавьте несколько капель йода в мазок и оставьте на 1 минуту. Промойте предметное стекло водой. Йод «устанавливает» кристаллический фиолетовый цвет, поэтому оба типа бактерий остаются фиолетовыми.
Обесцвечивание (этанол) Добавьте капли этанола одну на a время , пока сток не станет чистым.Промойте предметное стекло водой. Грамположительные клетки сопротивляются обесцвечиванию и остаются пурпурными. Краситель высвобождается из грамотрицательных клеток.
Контркрашивание (сафранин) Добавьте несколько капель сафранина в мазок и оставьте на одну минуту. Промойте предметное стекло водой и просушите салфеткой. грамотрицательные клетки будут окрашены сафранином в розовый цвет. Этот краситель не действует на грамположительные клетки, которые остаются фиолетовыми.

Волонтер из вашего лабораторного стола должен получить культуры бактерий, которые вы будете использовать в этой лаборатории, в соответствии с указаниями вашего инструктора.Одна из культур будет грамположительной бактерией, а другая — грамотрицательной. Ниже напишите названия бактерий, которые вы будете использовать, вместе с BSL для каждой культуры:

__________________________________________________________________________________

Возьмите два предметных стекла и приготовьте мазок каждой из двух бактериальных культур, по одному на предметное стекло, как показано. Дайте ПОЛНОСТЬЮ высохнуть на воздухе и закрепите при нагревании. Окрашивайте оба мазка методом окраски по Граму.Наблюдайте за предметными стеклами с помощью светового микроскопа при увеличении в 1000 раз и запишите свои наблюдения в таблице ниже.

Название культуры Реакция окрашивания по Граму Морфология клетки Расположение

Пятно по Граму «Заключительный осмотр»: приготовьте мазок, содержащий смесь грамположительных И грамотрицательных бактерий, добавив небольшое количество каждой бактерии в одну каплю воды на предметном стекле.Тепло зафиксируйте мазок и окрасите его по Граму. Вы должны быть в состоянии определить реакцию окрашивания по Граму, клеточную морфологию и расположение ОБЕИХ бактерий в этом смешанном мазке. Ваш инструктор может попросить показать этот слайд и предложить конструктивный комментарий.

Окрашивание эндоспор

Лишь несколько родов бактерий продуцируют эндоспоры, и почти все они являются грамположительными бациллами. Наиболее заметными являются виды Bacillus и Clostridium , которые естественным образом обитают в почве и являются обычными загрязняющими веществами на поверхностях.Рост Clostridium spp. обычно ограничивается анаэробной средой; Bacillus spp. может расти как в аэробных, так и в анаэробных условиях. Эндоспорообразующие бактерии отличаются от других групп грамположительных бацилл и различаются по их эндоспорам.

Обзор процедуры окрашивания эндоспор представлен в таблице 2.

Таблица 2. Этапы процедуры окрашивания эндоспор.
Шаг Процедура Результат
Первичная окраска (малахитовый зеленый) Добавьте несколько капель малахитового зеленого в мазок и оставьте на 10 минут.Если пятно начинает высыхать, добавьте дополнительные капли. Вегетативные клетки немедленно поглощают первичную окраску. Эндоспоры устойчивы к окрашиванию, но со временем впитывают краситель.
Обесцвечивание (вода) Промойте предметное стекло под слабой струей воды в течение 10-15 секунд. После окрашивания эндоспоры остаются зелеными. Тщательное ополаскивание водой обесцвечивает вегетативные клетки.
Контркрашивание (сафранин) Добавьте несколько капель сафранина в мазок и оставьте на 1 минуту.Промойте предметное стекло и промокните насухо. Обесцвеченные вегетативные клетки принимают контрастное пятно и кажутся розовыми; эндоспоры светло-зеленые.

После окрашивания эндоспоры обычно выглядят как светло-зеленые овальные или сферические структуры, которые можно увидеть внутри или за пределами вегетативных клеток, которые выглядят розовыми.

Форма и расположение эндоспор внутри бактериальных клеток, а также то, расширяет ли спорангий (D) или не расширяет (ND) стороны клетки, являются важными характеристиками, которые помогают в дифференциации между видами (см. Рисунок 9) .

Рисунок 9
  1. Овальный, центральный, без вздутия (ND)
  2. Овальный, концевой, ND (и параспоральный кристалл)
  3. Овальный, концевой, растянутый (D)
  4. Овальный, центральный, D
  5. Сферический, концевой, D
  6. Овальный, боковой, D

Эндоспоры довольно устойчивы к большинству процедур окрашивания; однако в мазках с обычным окрашиванием они могут быть видны как «очертания» с чистым пространством внутри. Если вы наблюдаете «очертания» или то, что кажется «призраками» клеток в мазке, окрашенном по Граму, грамположительных бацилл, то также следует выполнить окрашивание эндоспор, чтобы подтвердить наличие или отсутствие эндоспор.

Волонтер из вашего лабораторного стола должен получить бактериальные культуры для окрашивания эндоспор в соответствии с указаниями вашего инструктора. Обратите внимание, что все это будут виды Bacillus . Приготовьте мазки и прокрасьте каждый, используя технику окрашивания эндоспор. Посмотрите на слайды и отметьте форму и расположение эндоспоры, а также внешний вид спорангия (опухший или не опухший) в таблице ниже:

Название культуры Форма эндоспоры Место нахождения Спорангий

Кроме того, выберите ОДНУ из представленных выше культур и окрасите ее по Граму.Запишите свои результаты ниже в отведенных местах:

Название культуры, окрашенной по Граму: __________________________________________________

Реакция окрашивания по Граму и клеточная морфология: ______________________________________

Видны ли эндоспоры в мазке, окрашенном по Граму? _________________ Если вы видите эндоспоры, опишите, как они выглядят в препарате, окрашенном по Граму, и чем он похож и отличается от того, что вы видите в препарате, окрашенном по Граму.

3.1: Введение — Биология LibreTexts

Цели обучения

  • Узнайте о различиях между методами простого и дифференциального окрашивания.
  • Узнайте, как приготовить бактериальный мазок из культивируемых организмов.
  • Узнайте о различиях между грамположительными и грамотрицательными бактериями.
  • Узнайте, как выполнять процедуру окрашивания по Граму.
  • Используйте микроскопию для исследования окрашенных по Граму клеток.
  • Узнайте о некоторых специальных процедурах окрашивания и просмотрите их примеры под масляной иммерсией.

Большинство типов клеток не имеют большого количества естественного пигмента, поэтому их трудно увидеть под световым микроскопом, если они не окрашены. Чтобы сделать бактериальные клетки более заметными, используются несколько типов красителей. Кроме того, можно использовать специальные методы окрашивания для определения биохимических или структурных свойств клеток, таких как тип клеточной стенки и наличие или отсутствие эндоспор.Этот тип информации может помочь ученым идентифицировать и классифицировать микроорганизмы, а также может использоваться поставщиками медицинских услуг для диагностики причины бактериальной инфекции.

Одним из типов процедуры окрашивания, который можно использовать, является простое пятно , в котором используется только одно пятно, и все типы бактерий выглядят как цвет этого пятна при просмотре под микроскопом. Некоторые пятна, обычно используемые для простого окрашивания, включают кристаллический фиолетовый, сафранин и метиленовый синий. Простые красители можно использовать для определения морфологии и расположения бактерий, но они не дают никакой дополнительной информации.

Ученые часто предпочитают проводить дифференциальное окрашивание , поскольку это позволяет им собрать дополнительную информацию о бактериях, с которыми они работают. В дифференциальных красителях используется более одного красителя, и клетки будут иметь разный внешний вид в зависимости от их химических или структурных свойств. Некоторыми примерами дифференциальных красителей являются окраска по Граму, кислотостойкая окраска и окраска на эндоспоры. В этой лаборатории вы узнаете, как подготовить бактериальные клетки к окрашиванию, и узнаете о технике окрашивания по Граму.

Пятно по Граму

Эта очень часто используемая процедура окрашивания была впервые разработана датским бактериологом Гансом Кристианом Грамом в 1882 году (опубликована в 1884 году) при работе с образцами тканей легких пациентов, умерших от пневмонии. С тех пор процедура окрашивания по Граму широко используется микробиологами во всем мире для получения важной информации о видах бактерий, с которыми они работают. Знание реакции по Граму клинического изолята может помочь медицинскому работнику поставить диагноз и выбрать подходящий антибиотик для лечения.

Результаты окрашивания по Граму

отражают различия в составе клеточной стенки. Грамположительные клетки имеют толстые слои пептидогликана (углевода) в клеточных стенках; Грамотрицательные бактерии имеют очень мало. Грамположительные бактерии также содержат тейхоевую кислоту, а грамотрицательные — нет. Грамотрицательные клетки имеют внешнюю мембрану, которая напоминает бислой фосфолипидов клеточной мембраны. Наружная мембрана содержит липополисахариды (ЛПС), которые высвобождаются в виде эндотоксинов при гибели грамотрицательных клеток.Это может беспокоить человека с инфекцией, вызванной грамотрицательным организмом.

На рис. 3.1.1 показаны основные различия между грамположительными и грамотрицательными клеточными стенками (дополнительную информацию см. Также в вашем учебнике). Различия в составе клеточной стенки отражаются в том, как клетки реагируют с красителями, используемыми в процедуре окрашивания по Граму.

Окрашивание по Граму

лучше всего проводить на свежих культурах — более старые клетки могут иметь поврежденные клеточные стенки и не давать правильной реакции по Граму.Кроме того, некоторые виды известны как с грамм-переменной , поэтому на вашем слайде могут быть видны как грамположительные, так и грамотрицательные реакции.

Хотя подавляющее большинство бактерий являются грамположительными или грамотрицательными, важно помнить, что не все бактерии могут быть окрашены с помощью этой процедуры (например, микоплазмы, у которых нет клеточной стенки, плохо окрашиваются красителем по Граму).

Рисунок 3.1.1: грамположительных и грамотрицательных клеточных стенок

специальных красителей

Существует множество процедур окрашивания, используемых для идентификации определенных внешних или внутренних структур, которые не обнаруживаются у всех видов бактерий (см. Таблицу в конце этого упражнения для сравнения процедур окрашивания).Некоторые из этих процедур окрашивания вы проделаете в следующей лаборатории (кислотостойкое окрашивание и окрашивание эндоспор). В сегодняшней лаборатории вы увидите подготовленные слайды со специальными красителями: окраска капсулы ( Klebsiella pneumoniae ), окраска жгутиков ( Proteus vulgaris ) и окраска спирохет ( Treponema pallidum ).

Капсульное пятно

Некоторые бактерии выделяют богатую полисахаридами структуру вне клеточной стенки, называемую гликокаликсом. Если гликокаликс тонкий и неплотно прикрепленный, его называют слоем слизи; если она толстая и плотно прилегает к клетке, ее называют капсулой .Гликокаликс может защитить клетку от высыхания и может позволить клетке прилипать к поверхностям, таким как ткани в организме. Они также могут обеспечивать клетки защитой от обнаружения и фагоцитоза иммунными клетками и способствовать образованию биопленки: таким образом, гликокаликс может действовать как фактор вирулентности; (способствует способности организма вызывать болезнь).

Капсулы могут быть обнаружены с помощью процедуры отрицательного окрашивания , при которой фон (слайд) и бактерии окрашиваются, но капсула не окрашивается.Капсула выглядит как чистая неокрашенная зона вокруг бактериальной клетки. Поскольку капсулы разрушаются при нагревании, процедура окрашивания капсулы выполняется без термической фиксации бактерий.

Серебряное пятно

Жгутики (длинные шиповидные структуры, используемые для подвижности бактерий) и некоторые бактерии (например, спирохет ) слишком тонкие, чтобы их можно было наблюдать с помощью регулярных процедур окрашивания. В этих случаях используется морилка . Нитрат серебра применяется к бактериям вместе со специальной протравой; нитрат серебра осаждается вокруг жгутиков или тонких бактерий, утолщая их, чтобы их можно было наблюдать под световым микроскопом.

Ключевые термины

Окрашивание по Граму, бактериальный мазок, простое окрашивание, дифференциальное окрашивание, грамположительный, грамотрицательный, переменный по Граму, капсула, спирохеты, жгутики, отрицательное окрашивание, окрашивание серебром

Типы методов окрашивания, используемых в микробиологии, и их применения

Спора Clostridium botulinum Источник: ASM

Кислотостойкое окрашивание (метод Циля-Нильсена):

Кислотостойкая палочка

Отличает кислотоустойчивые бактерии, такие как Mycobacterium spp , от некислотных бактерий; которые плохо окрашиваются при окрашивании по Граму.Используется для окрашивания видов Mycobacterium ( Mycobacterium tuberculosis, M. ulcerans, и M. leprae )

Акридиновый апельсиновый краситель : Этот метод окрашивания используется для подтверждения присутствия бактерий в культурах крови, когда результаты окрашивания по Граму трудно интерпретировать или когда наличие бактерий сильно подозревается, но не обнаруживается с помощью световой микроскопии. Акридиновый оранжевый связывается с нуклеиновой кислотой и окрашивает их. Он также используется для обнаружения микоплазм (бактерий с дефицитом клеточной стенки)

Метод аурамина-родамина : Этот метод окрашивания флуорохромом используется для улучшения обнаружения микобактерий непосредственно в образцах пациентов и первоначальной характеристики клеток, выращенных в культуре.

Calcofluor White Staining: Обычно используется для прямого обнаружения грибковых элементов и наблюдения за тонкими характеристиками грибов, выращиваемых в культуре. Клеточные стенки грибов будут связывать пятно калькофлюорового белого цвета, что значительно улучшает видимость грибковых элементов в тканях или других образцах.

Окрашивание капсулы: Это помогает продемонстрировать присутствие капсулы в бактериях или дрожжах. Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae являются обычными капсулированными бактериями.

Стафилококк в пятнах по Граму

Цитоплазматические пятна включения: Определяет внутриклеточные отложения крахмала, гликогена, полифосфатов, гидроксибутирата и других веществ. Например. Окрашивание по Альберту используется для окрашивания волютина или метахроматических гранул C. diphtheriae.

Окрашивание эндоспор: Показывает структуру спор у бактерий, а также наличие свободных спор. Относительно небольшое количество видов бактерий продуцирует эндоспор , поэтому положительный результат методов окрашивания эндоспор является важным ключом к идентификации бактерий. Bacillus spp и Clostridium spp — это основные роды бактерий, продуцирующих эндоспоры.

Окрашивание по Граму:

Окрашивание по Граму

— очень важный метод дифференциального окрашивания, используемый для первоначальной характеристики и классификации бактерий в микробиологии. Окрашивание по Граму помогает идентифицировать бактериальные патогены в образцах и культурах по их реакции по Граму (грамположительные и грамотрицательные) и морфологии (кокки / палочка).

Спора Clostridium botulinum
Источник: ASM

Окраска жгутиков: Продемонстрируйте наличие и расположение жгутиков.Жгутиковые пятна тщательно готовятся, чтобы покрыть поверхность жгутиков краской или металлом, например серебром.

Количество и расположение жгутиков имеют решающее значение для идентификации видов подвижных бактерий.

Подготовка индийских чернил (отрицательное окрашивание):

Отрицательные пятна используются, когда образец или его часть, например капсула, не впитывают пятно. Препарат India Ink рекомендуется использовать для идентификации Cryptococcus neoformans.

Пятно Гимзы: Пятно Гимзы — краситель Романовского. Широко используется в микробиологической лаборатории для окрашивания:

  1. Малярия и другие паразиты крови
  2. Chlamydia trachomatis тельца включения
  3. Borrelia видов
  4. Yersinia pestis
  5. Histoplasma видов
  6. Pneumocystis jiroveci кисты (ранее Pneumocystis carinii )

лактофеноловый синий (LPCB) мокрое крепление

Крепление LPCB — наиболее широко используемый метод окрашивания и наблюдения за грибами.

Связанные

7 различных типов морилки (руководство по покупке)

Не все морилки одинаковы. Фактически, существует 7 различных типов морилки, которые вы можете выбрать для своих проектов по окрашиванию древесины, таких как палуба, проекты по обработке дерева и многое другое. Мы перечислим и подробно опишем все ваши варианты морилки.

Окрашивание дерева — это практика, уходящая корнями в прошлое. Если вы хотите пойти по стопам первых мастеров по дереву, вы можете сделать простую морилку по дереву:

  • замачивание железных гвоздей в уксусе (черное дерево или темно-серый).
  • замачивание табака в воде и нашатырном спирте (морилка для древесины).

Если у вас нет такого времени (или чана достаточно велика, чтобы приготовить достаточно продукта, чтобы испачкать всю вашу палубу), доступные коммерчески продаваемые морилки для древесины основаны на технологии массового производства, которая использовалась веками. Пройдя по проходу, отделанному морилкой, вы обнаружите широкий спектр вариантов — прозрачный или непрозрачный; на минеральной, растительной или синтетической основе; Радуга цветов от насыщенных цветов натурального дерева до необычных синих, зеленых и пурпурных.

Морилки для древесины классифицируются не только по цвету, но и по автомобилю .

Связано: Варианты цвета белой краски | Варианты цвета бежевой краски | Параметры визуализатора краски виртуального дома

Что такое морилка для дерева?

Морилки для дерева состоят из пигментов или красителей, растворенных в растворителе, также известном как средство . Обычные транспортные средства включают воду, дистиллированный бензин, спирт или отделочное средство, такое как лак, полиуретан, шеллак или лак.Некоторые транспортные средства не являются настоящими растворителями, поэтому пятно суспендировано в автомобиле и должно быть смешано перед нанесением. Более мелкие молекулы, такие как красители, имеют тенденцию растворяться в носителе, тогда как более крупные молекулы пигмента с большей вероятностью остаются в носителе.

Красители имеют тенденцию впитываться в древесину, в то время как пигменты обычно остаются на поверхности дерева, как краска. Многие коммерческие красители содержат как красители, так и пигменты, а также связующие вещества, такие как льняное масло, которые помогают более крупным молекулам пигмента прилипать к древесине.Красители хорошо работают с мелкозернистой древесиной, а пигменты лучше работают с пористой древесиной. Красители делают пятна прозрачными, пигменты — более непрозрачными или «твердыми».

Морилка обычно не проникает так глубоко в поверхность древесины, как краска, а это означает, что она имеет тенденцию постепенно переходить в естественный цвет древесины по мере ее износа.

Свойства морилки для дерева

Различные морилки для древесины обладают рядом свойств перекрытия, в том числе…

  • Прозрачный. Мастера по дереву любят использовать прозрачные морилки на дереве с красивой натуральной текстурой. Морилка окрашивает дерево, но позволяет текстуре сиять во всей красе.
  • Полутвердый. Эти морилки сохнут, полупрозрачны, сохраняя некоторые признаки текстуры древесины, но выделяя окраску на передний план.
  • Твердый. Эти непрозрачные пятна представляют собой более светлую или специализированную форму краски, которая высыхает непрозрачной и полностью скрывает текстуру древесины.
  • Натуральный краситель или пигмент. Встречающиеся в природе металлы и органические соединения дают пятна самых разных цветов.
  • Синтетический краситель или пигмент. Эксперименты с синтетическими пигментами или красителями привели к получению более однородных, легко наносимых пятен по сравнению с натуральными составами.
  • Растворители на нефтяной основе. Эти растворители помогают равномерно перемешать пятно, но они испаряются, превращаясь в токсичный газ, и с ними необходимо обращаться осторожно.
  • Нетоксичные растворители. Эти растворители более вредны для окружающей среды, но в результате образуются пятна, которые труднее нанести.

Различные типы морилки могут совпадать по характеристикам в зависимости от марки и рецептуры. Например, пятна от лака могут содержать натуральные пигменты, а пятна на водной основе могут содержать нефтяные растворители.

7 типов морилки

1. Масляное пятно

Щелкните изображение для получения дополнительной информации.

Когда большинство людей думают о «морилке», они имеют в виду масляную морилку. Это наиболее распространенная морилка для древесины, имеющаяся в продаже. Добавление полностью натурального, нетоксичного льняного масла дает вам некоторую передышку, чтобы убрать разливы или устранить несоответствия, в результате чего пятно станет более ровным.Это делает его идеальным для больших проектов, потому что вам не нужно тщательно контролировать каждый мазок, чтобы избежать образования пятен.

Масляные пятна можно разбавить или очистить с помощью алифатического углеводорода , уайт-спирита или разбавителя для краски. Масляные пятна могут содержать красители, пигменты или и то, и другое. На масляное пятно можно нанести любой вид отделки, кроме отделки на водной основе.

Слой масляного пятна сохнет за 1-2 часа. Подождите два часа, чтобы нанести второй слой, и не менее восьми часов, чтобы нанести финиш.

ПРИМЕЧАНИЕ: Некоторые масляные пятна содержат синтетические пигменты и, возможно, немного лака. Если вы ищете полностью натуральный продукт, обязательно проверьте его еще раз.

2. Лак

Щелкните изображение для получения дополнительной информации.

Лаковая морилка содержит связующее лака, часто полиуретанового лака, вместо масла. Лак сильно сохнет, а это значит, что вам не нужно вытирать излишки пятна с поверхности, чтобы получить ровный слой. Содержание лака также устраняет необходимость в финишном покрытии — морилка является финишным слоем .Если вы не можете сказать, на масляной или на лаковой основе тара для морилки, налейте немного на кусок древесины и посмотрите, не высохнет ли она или испарится.

Несмотря на то, что излишки не нужно вытирать, неравномерно нанесенный слой морилки все еще может выглядеть пятнистым, что потребует нанесения большего количества слоев.

Пятна от лака идеально подходят для небольших проектов, поверхностей, которые уже покрыты пятнами, или поверхностей, которые изношены или потерты.

3. Пятно на водной основе

Щелкните изображение для получения дополнительной информации.

Пятна на водной основе являются наиболее естественными, их легче всего удалить, и они с наименьшей вероятностью вызовут раздражение кожи, глаз или трахеи, когда вы будете находиться рядом с ними. Его можно смыть водой, и это лучший выбор, если вы собираетесь покрыть проект отделкой на водной основе. Не наносите полиуретановые или смолистые покрытия на водной основе на масляные или лаковые пятна, если у вас нет недели или больше, чтобы дать им высохнуть.

Обратной стороной является то, что морилку на водной основе сложно нанести.Вода усиливает текстуру древесины, влияя на ее текстуру. Вы можете избежать этого эффекта, предварительно намочив древесину и отшлифуя рельефную структуру, но это требует много времени.

Вода также быстро сохнет. Если сразу не стереть излишки пятна, на полученном покрытии могут появиться пятна. Вы можете добавить пропиленгликоль или замедлитель схватывания лака, чтобы замедлить процесс высыхания, но это приглушит цвет пятна. В противном случае разбейте проект на небольшие части, стирая лишнее по ходу дела.

4. Гель-краситель

Щелкните изображение для получения дополнительной информации.

Гелевые пятна обычно имеют масляную основу, но имеют густую консистенцию, как у майонеза. Нанесение гелевого красителя может быть неудобным, но гелевое окрашивание не имеет себе равных в создании покрытия без пятен. Не стоит недооценивать важность этого качества. Пятно от пятен нельзя исправить, нанеся еще один слой. Обычно вам нужно отшлифовать всю шерсть. Очевидно, что это исправление, требующее много времени.

Если вам нужно красить сосну, серьезно подумайте о гелевой морилке.Как известно, сосну трудно окрасить без пятен и пятен. Для достижения наилучших результатов перед окрашиванием рекомендуется нанести тушь или кондиционер для дерева.

5. Лак

Щелкните изображение для получения дополнительной информации.

Пятна от лака фактически не содержат лака. Средством для этих пятен является некий быстросохнущий лак, обычно содержащий ксилол и кетоны. Эти пятна получили свое название, потому что их можно смешивать с лаком для создания пигментированного лака.

Эти морилки высыхают очень быстро — всего за 15 минут, — что делает их популярным выбором среди профессиональных плотников.Нужна профессиональная рука, потому что быстрое высыхание делает ошибки. Для больших проектов подумайте о том, чтобы наносить это пятно в команде из двух человек: один человек будет наносить пятно, а другой — удалить излишки.

Растворители в пятнах от лака легко испаряются, вызывая резкий запах. Обязательно наносите в хорошо проветриваемом помещении. Вы также можете надеть защитную маску.

6. Пятно водорастворимого красителя

Щелкните изображение для получения дополнительной информации.

Эта разновидность морилки продается в виде порошка.Как и Kool-Aid, просто добавьте воды. Также называемые «анелиновыми красителями», они были разработаны для окрашивания тканей, но были перепрофилированы в морилки для древесины. Мастера по дереву любят их за разнообразие ярких цветов и простоту работы.

Типичное соотношение порошка к воде — одна унция на кварту, но здесь нет никаких правил. Методом проб и ошибок вы можете научиться добавлять больше или меньше воды, чтобы придать цвет вашей краске индивидуальный вид. Краситель лучше растворяется в горячей воде. Обратите внимание, что водопроводная вода может содержать минералы, такие как кальций, натрий и магний, которые могут испортить цвет вашей краски.Дистиллированная вода меньше всего искажает окраску.

Водорастворимая морилка отлично сохраняет текстуру древесины даже в самых темных тонах. Независимо от того, сколько пигмента вы добавляете или сколько слоев наносите, он никогда не станет непрозрачным.

Однако большим недостатком этого пятна является то, что оно выцветает под воздействием УФ-излучения, что делает его плохим выбором для проектов на открытом воздухе или в условиях с интенсивным УФ-излучением.

Некоторые порошкообразные пятна красителя растворимы в спирте или масле. Пятно от спирторастворимого красителя часто смешивают с шеллаком, чтобы получить быстросохнущее пятно.Маслорастворимый порошок можно добавить к масляным пятнам, чтобы настроить цвет.

7. Металлизированная (металлокомплексная) окраска красителем

Созданные в 1950-х годах пятна «металлокомплекса» или металлизированные красители были разработаны, чтобы противостоять выцветанию. Пятно от металлизированного красителя все еще тускнеет, но гораздо медленнее, чем пятно от водорастворимого красителя. Добавление металлов, таких как хром, кобальт, медь и никель, дает стойкий краситель. Обычно он поставляется предварительно разбавленным в ацетоне и готовым к нанесению. Некоторые пятна металлизированной краски необходимо разбавить ацетоном, спиртом или водой.

Поскольку они не содержат воды, они не поднимают зерна древесины — отсюда и общий ярлык «NGR», означающий «не выращивание зерна».

Пятна от красителей на основе металлокомплексов отлично подходят для распыления. Пятна металлизированной краски, нанесенные спреем, быстро сохнут, и их легче всего нанести. В результате шерсть становится более глубокой и ровной.

Металлизированные пятна красителя также можно смешивать с лаком, использовать в качестве тонера или смешивать с водой для более медленного высыхания пятен (однако, следите за появлением зерна).

Часто задаваемые вопросы о морилке для дерева

Пятно лучше наносить губкой или кистью?

Все зависит от вас — любой из них работает нормально. Вы также можете окунуть мелкие предметы в морилку или вылить морилку на большие проектные участки и даже вытереть их шваброй. Обратите внимание на то, как быстро сохнет ваше пятно и как долго вам нужно вытирать излишки, прежде чем бросить банку с пятном на колоду.

Сколько слоев морилки мне нужно нанести?

Нет смысла наносить морилку больше, чем может впитать древесина.В большинстве случаев это означает не более двух слоев. Плотная древесина твердых пород не может вместить более одного. Нанесение большего количества слоев морилки, чем может впитать древесина, не изменит ее внешний вид.

Нужно ли шлифовать поверхность дерева между слоями?

Нет, но легкая шлифовка может помочь нанести более ровный второй слой. После высыхания первого слоя отшлифуйте окрашенную поверхность мелкозернистой наждачной бумагой зернистостью 220 или 240. Также подойдет тонкая стальная вата.

Темнеет ли пятно при высыхании?

Да и нет.Сушка не приводит к затемнению цвета пятна — на самом деле, оно может стать светлее. Однако пятно со временем застывает , в результате чего оно темнеет. Чтобы пятно приобрело окончательный вид, может потребоваться месяц или больше.

Сколько времени нужно, чтобы морилка высохла?

Зависит от породы дерева и типа морилки. Большинству пятен требуется от 24 до 48 часов, чтобы они стали безопасными для пешеходов или прикосновений. Слой Olympic Smartguard или другого герметика может сократить время высыхания.Однако даже после того, как пятно высохнет, оно должно застыть, прежде чем достигнет своего окончательного цвета. Это может занять до 30 дней. Пятна с металлокомплексом и лаком сохнут намного быстрее, чем пятна на масляной или водной основе.

Защищает ли мое дерево морилка?

Нет, меняет только внешний вид. Если вы хотите защитить свой столярный проект от несчастных случаев или стихийных бедствий, подумайте о добавлении защитного покрытия после того, как морилка высохнет.

Надо ли запечатывать пятно?

Нет, но обычно пятно будет меньше кровоточить, если нанести герметик.Слой тонкого шеллака или шпатлевки обычно сохраняет ровность пятна. Помните, что нельзя использовать шеллак с пятнами на водной основе или NGR. Убедитесь, что герметик совместим с полиуретаном, если вы собираетесь нанести полиуретановое покрытие.

Как сделать пятно темнее?

Оставьте пятно на более длительное время, прежде чем стереть излишки. Подумайте о том, чтобы нанести второй слой раньше, прежде чем первый слой полностью высохнет. Обычно это приводит к более глубокому и богатому слою пятна.

Моя колода уже в пятнах. Могу я еще испачкать его?

Свежий слой пятен может украсить уже испачканную колоду. Вымойте палубу средством для чистки древесины премиум-класса. Выберите морилку, близкую по цвету к существующей морилке. Если вам нужен совершенно другой цвет пятна, возможно, вам сначала придется удалить имеющееся пятно. Используйте инструмент для удаления дек, а затем нанесите отбеливатель, чтобы удалить как можно больше имеющихся пятен.

Сколько времени требуется для высыхания между слоями?

Опять же, это зависит от морилки и дерева.Древесина с высокой впитывающей способностью выдерживает нанесение второго слоя всего за тридцать минут. Между слоями непористой древесины может потребоваться до двух часов. Между нанесением слоев металлизированных и лаковых пятен может потребоваться всего 15 минут для высыхания.

Можно ли красить красное дерево?

Красное дерево красиво выглядит при окрашивании. Выберите более светлый тон и убедитесь, что пятно не сплошное или непрозрачное. Вы же не хотите скрывать естественную красоту морилки.

Можно ли смешивать морилки для древесины?

На ваш страх и риск.Как правило, это не лучшая идея. Вы не хотите смешивать пятна от разных транспортных средств, и даже пятна от похожих транспортных средств могут плохо смешиваться. Различные химические вещества и пигменты могут привести к непредсказуемым результатам. Однако вы можете добавить больше воды к пятну на водной основе, чтобы его разбавить. Используйте дистиллированную воду, чтобы убедиться, что минералы жесткой воды не портят цвет. Порошковые пятна красителя также можно смешать с подходящим средством для окрашивания (вода для водорастворимых веществ, масло для маслорастворимых порошков). Обратите внимание: если вам нужен конкретный цвет, лучше всего будет профессионально смешать пятно, чтобы избежать проб, ошибок и дорогостоящих ошибок.

Является ли морилка естественной?

Некоторые из них есть, а некоторые нет. Пятна на водной и масляной основе, скорее всего, будут полностью натуральными, но они все равно могут содержать синтетические пигменты или связующие вещества. Металлы, такие как медь, кобальт или никель, могут быть натуральными и нетоксичными, но все же вредными для проглатывания. Резкое пятно выделяет летучие органические соединения (ЛОС) в окружающую среду, загрязняя атмосферу и повышая риск проблем со здоровьем.

Опасна ли морилка для древесины?

Некоторые пятна содержат химические вещества, опасные для проглатывания и вдыхания.Будьте особенно осторожны, если пятно содержит летучие вещества, такие как спирт или ацетон. Это видно по сильному запаху. Запах означает, что пятно заполняет окрестности химическими частицами. Никогда не проглатывайте морилку, наденьте маску и убедитесь, что ваше рабочее место хорошо вентилируется.

На какие деревянные изделия обычно можно наносить морилку?

Все деревянные детали можно окрашивать. Некоторые распространенные домашние проекты и предметы, которые окрашиваются, включают сайдинг, мясные блоки, настилы, паркетные полы, домашние бары, шкафы и туалетные столики.

Bios 318 Окрашивание и интерпретация


Страница приветствия

Расписание



Фон


Методы


Подготовка СМИ


и обучение
[Подготовка мазка] [Процедура окрашивания по Граму и исследование] [Отрицательный результат окрашивание] [Окрашивание спор [Наблюдение за живыми бактериями]

Важная информация, такая как форма и степень подвижности, может быть получена путем наблюдения за живыми бактериями с фазово-контрастный или темнопольный микроскоп.Однако бактерии обычно окрашивают разными красителями, чтобы для выявления различных свойств и увеличения контраста для просмотра с помощью обычной светлопольной микроскопии. Число красителей были разработаны для различения спор, ядерных тел, капсул и характеристик клеточной стенки.

Методы окрашивания, которые мы будем использовать, убивают бактерии, снижая риск заражения патогенными организмами. С жесткие клеточные стенки бактерий предотвращают искажение морфологии при высыхании, образцы можно разложить на стекле слайд и высушенный воздухом, затем закрепленный на поверхности, быстро пропуская слайд через пламя, расплавляя комплекс углеводы клеточных стенок к стеклу и убивают клетки.

Окрашивание по Граму обычно используется в качестве начальной процедуры при идентификации неизвестного вида бактерий. Бактерии несут небольшой чистый отрицательный заряд и обычно связывают положительно заряженные красители, такие как метиленовый синий и кристаллы. фиолетовый. Виды могут быть классифицированы как грамположительные, грамотрицательные или грамотрицательные в зависимости от способности, если клетки, чтобы удерживать синий краситель. Грамотрицательные бактерии не сохраняют темно-синий цвет, но их можно контрастировать. светло-красного цвета, чтобы их можно было увидеть в светлопольной микроскопии.Поскольку два красителя используются для различения типов бактерий, окрашивание по Граму называется методом дифференциального окрашивания.

Окраска по Граму — это прямой метод, так как сами клетки сохраняют краситель. При непрямом или отрицательном окрашивании мазки производятся путем смешивания материала с индийскими чернилами или кислотными красителями, такими как нигрозин. Кислотные красители имеют отрицательный заряд и отталкиваются отрицательно заряженными клеточными стенками. Клетки остаются неокрашенными на темном фоне.

Некоторые виды продуцируют споры, которые представляют собой спящие клетки с утолщенными клеточными стенками. Споры часто обнаруживаются в граммах окрашивания или с помощью фазово-контрастной микроскопии живых клеток, однако для подтвердить или опровергнуть наличие спор в культуре. Как и в случае с окраской по Граму, окраска от спор позволяет различить споры. на основе свойств клеточной стенки.

В лаборатории вы будете практиковать технику окрашивания по Граму на различных грамположительных и грамотрицательных бактериях. выращены на разных типах сред.Вы научитесь технике негативного окрашивания красителем нигрозин для того, чтобы чтобы четко различать формы бактерий. Вы также проведете окрашивание спор на соответствующие культуры. Ну наконец то, вы будете наблюдать за живыми бактериями, чтобы ознакомиться с особенностями, которые можно увидеть без окрашивания, в том числе с клеточными формы, модели ассоциаций и подвижность.

Подготовка мазка

Правильно приготовленный мазок выполняет две задачи. Это заставляет бактерии прилипать к предметному стеклу, так что они могут быть окрашены и наблюдал.Он также убивает их, делая безопасным обращение с патогенными бактериями. Цель приготовления мазков — научиться распознавать правильную плотность бактерий для размещения на слайде. Слишком много, и они перекрывают друг друга давать ложные срабатывания или теснить друг друга, чтобы создать беспорядок. Слишком мало, и их нельзя расположить на слайде.

  • С помощью инструмента для травления стекла наметьте кружок на нижней стороне предметного стекла в каждой позиции, на которой вы планируете сделать мазок.Может быть расположено несколько кругов на том же слайде. Кружки помогают найти мазки, которые трудно увидеть невооруженным глазом, и помогают определить поверхность предметного стекла, на котором вы нанесли мазок.
  • Ползун должен быть обезжиренным. Хороший способ очистить слайд — несколько раз подышать на него, а затем растереть энергично удалите туман салфеткой Kimwipe или бумажным полотенцем. Когда горка очищается от тумана сразу после дыхания на нем он достаточно чистый.
  • Чтобы приготовить мазок из колонии, поместите полную петлю (~ 25 мкл) деионизированной воды на обведенный кружком область. С соблюдением правил асептики удалите едва видимое количество материала из культуры с помощью петли или палочки и используйте петлю или палку, чтобы смешать его с каплей. Постарайтесь полностью развести культуральный материал, чтобы не было видимых кусков материала.
  • Чтобы приготовить мазок из бульонной культуры, асептически удалите несколько петель культуры и распределите по области, обведенной кружком.
  • Дайте капле полностью высохнуть на воздухе (обычно пару минут на одну петлю).
  • Зажгите конфорку Бунзена или Фишера и отрегулируйте ее, чтобы получить сильное пламя. Удерживая предметное стекло в горизонтальном положении с помощью прищепки, трижды пропустите его через пламя мазком вверх, чтобы убить бактерии и вызвать их прилипание. Каждый проход через пламя должен занимать около секунды.
  • После охлаждения предметного стекла проведите процедуру окрашивания.

Как испортить мазок

  • Забудьте чистить слайд
  • Используйте слишком много материала — перед сушкой на воздухе жидкость должна быть немного мутной и без твердых частиц
  • Используйте столько жидкости, чтобы она высыхала вечно
  • Нагрейте мазок перед тем, как дать ему высохнуть на воздухе, чтобы бактерии кипятили вместо того, чтобы прикреплять их
  • Перегрев мазка, расплавление стенок ячеек и возможное повреждение предметного стекла

верх

Окрашивание по Граму

При окрашивании по Граму бактерии, прикрепленные к предметному стеклу, обрабатываются основным красителем, который электростатически связывается с отрицательно заряженные клетки.Затем препарат обрабатывают протравой, такой как йод, с образованием нерастворимого комплекса краситель-йод. Затем предметное стекло промывают спиртом для растворения и удаления красителя-протравы с грамотрицательных клеток, но не с грамотрицательных клеток. положительные. Дифференциальная экстракция протравы обесцвечивающим агентом является критическим шагом, который отличает бактерии. На заключительном этапе наносится контрастное пятно — сафранин. Ячейки, которые были обесцвечены, примут нанесите второй основной краситель, тогда как те, которые уже были окрашены первым красителем, этого не сделают.

Механизм дифференциальной реакции окрашивания с уверенностью не выяснен. Одна теория гласит, что различия в химическом составе клеточной стенки объясняют реакцию окрашивания. Вторая теория утверждает, что толстые стенки грамположительных бактерий обезвоживаются обесцвечивающим раствором и сжимаются, что приводит к закрытие пор в стенке, улавливание протравы красителя внутри клетки. Более тонкая клеточная стенка грамотрицательных клеток Обесцвечивающее средство легко проникает в бактерии.Что известно с уверенностью, так это критическая роль клеточная стенка. Удаление или изменение стенки грамположительных организмов превращает их в грамотрицательные клетки.

Поскольку многие грамположительные бактерии с возрастом становятся грамотрицательными, окраску по Граму следует использовать в течение ночи. культур. Образец с края колонии, где клетки активно растут.

Возможно, вы захотите носить средства защиты рук и одежду, которая вас не слишком заботит.Эти химические вещества не особенно токсичны, но они могут пачкать кожу и одежду. Пятна на коже обычно стираются менее чем за день, но пятна на одежде обычно необратимы.

Компоненты

Были использованы различные формулы для кристаллического фиолетового, сафранина и обесцвечивающего средства, и все они эффективны. В учебной лаборатории эти решения будут предоставлены в готовом виде.

  1. кристаллический фиолетовый Грама: 1% водный раствор кристаллического фиолетового красителя; [Кристаллический фиолетовый Хакера] 2 г кристаллического фиолетового с содержанием красителя 90%, 20 мл этилового спирта, 0.8 г оксалата аммония, 80 мл дистиллированной воды
  2. Йод по грамму: 1 г йода, 2 г йодида калия, 300 мл дистиллированной воды
  3. Сафранин по Граму: 4 г порошка сафранина, 200 мл безводного этанола, 800 мл дистиллированной воды
  4. Обесцвечивающее средство по Граму: 25% ацетон, 75% изопропиловый спирт

Если оставить предметное стекло, покрытое пятном, дольше рекомендованного времени, это не повредит, если пятно не высохнет. Никакой пользы тоже нет.

  • Поместите предметное стекло с мазками вверх на штатив в лотке для окрашивания. Возможно, вам будет удобно оставить прищепку прикрепленной. Залейте предметное стекло кристально-фиолетовым цветом Грама, чтобы покрыть весь высохший материал. Хорошей практикой является заливка всего слайда от края до края.
  • Через 60 секунд возьмите предметное стекло прищепкой и промойте пятно водой, разбрызгивая предметное стекло над пятном и смывая водой. над ним, пока вода не станет прозрачной.Чтобы слайд оставался «чистым», вы можете также промыть его нижнюю часть и убедиться, что пятно не осталось под прищепкой, где вы захватили слайд. Обратите внимание, что мазки будут окрашены в ярко-синий цвет.
  • Залейте предметное стекло йодом Грама (протравой), оставьте на 60 секунд, затем возьмите предметное стекло и снова промойте водой, как описано выше. Мазки должны были стать почти черными. Если нет, возможно, йод испортился или вы нанесли его не на ту сторону предметного стекла.
  • После ополаскивания водой осторожной струей из пипетки пастера промойте мазки средством для обесцвечивания по Граму. Сначала цвет должен соскользнуть. Продолжайте полоскание, пока белье не станет бесцветным, затем снова промойте водой.
  • Залейте слайд сафранином Грама на 60 секунд. с последующим ополаскиванием водой. На этом этапе мазки грамположительных культур должны быть окрашены почти в черный цвет, а мазки грамотрицательных культур должны быть окрашены от розового до красного.Но чтобы быть уверенным, вы должны наблюдать их в микроскоп.
  • Промокните мазок, чтобы удалить излишки воды, используя впитывающую бумагу или бумажное полотенце. Не вытирайте мазки, иначе их можно стереть. Дайте высохнуть на воздухе.

Как испортить окраску по Граму

  • испортите мазок, чтобы начать с
  • Нанесите морилку на изнаночную сторону предметного стекла
  • Окрашивание или неполное смывание мазка
  • Дайте пятну высохнуть перед полосканием
  • Забыть обесцвечивать или не полностью обесцвечивать
  • Сотрите материал при промокании

Наблюдение окраски по Граму под микроскопом

Мы используем светлопольную микроскопию для наблюдения пятен по Граму.Хороший подход к наблюдению за любым мазком очень мелких объектов — исследовать его при малом увеличении (окончательное 40-кратное увеличение). ориентироваться. После фокусировки можно работать с увеличением до 100x, 400x и, наконец, с масляной иммерсией на большой мощности (обычно 1000x). Погружение масло наносится прямо на мазок. Кстати, фокусные расстояния линз с высокой сухой и масляной иммерсией меньше чем толщина слайда. Мазок должен быть вверх, иначе фокусировка будет невозможна. Верх слайда можно определить нащупав вытравленный кружок в нижней части слайда.

При малых увеличениях материал, окрашенный по Граму, выглядит на предметном стекле как грязь. Для того, чтобы чтобы увидеть хоть какие-то детали. Бактерии часто концентрируются в кольце вокруг исходного мазка. Масляная иммерсия в светлом поле микроскопия необходима, чтобы увидеть неискаженное изображение любого непосредственно окрашенного бактериального мазка. Грамм отрицательный или положительный фенотип не может быть подтвержден с уверенностью, используя только сухое увеличение, поскольку типичные клетки имеют размер полмикрона. в диаметре меньше, чем лучшее разрешение высокосухого объектива.Фазовый контраст или просмотр темного поля улучшают разрешение, но оба искажают цвет. Большое сухое увеличение искажает как форму, так и цвет.

После нанесения иммерсионного масла на предметное стекло высокосохнущая (40x) линза не может можно использовать снова, если масло не будет удалено. Слайды обычно промокают до удалите излишки масла, затем несколько раз окуните в ксилол, чтобы растворить масляную пленку и сушку на воздухе в вытяжном шкафу.

верх

Непрямое (отрицательное) окрашивание

Кислый краситель нигрозин может использоваться для визуализации капсулы или оболочки, окружающей некоторые бактерии в процессе. называется отрицательным окрашиванием.Капсулы состоят в основном из полисахаридов или гликопротеинов и имеют студенистую форму. в текстуре. Они легко разрушаются при нагревании, поэтому методы прямого окрашивания использовать нельзя. В общем, размер и форма микроорганизмов часто меньше искажаются при процедурах непрямого окрашивания, особенно при взятии проб из бульонной культуры. Поэтому отрицательное окрашивание полезно всякий раз, когда морфология отдельных бактерий вопрос. Морфология часто может быть определена с уверенностью только с помощью высокосухой линзы.Считайте, что эта процедура не обязательно убивает организм, поэтому будьте осторожны.

  • После приготовления чистого, обезжиренного предметного стекла небольшая капля нигрозина смешивается с небольшой каплей бульона. культуры или с количеством сухого материала.
  • Капля распространяется по слайду, используя край другого слайда в качестве расширителя. Эта же процедура используется на мазки крови.


После сушки на воздухе пятно исследуют с помощью высокосухой линзы или, при желании, с помощью масляной иммерсии.Мазок будет максимально плотным где краситель нигрозин был нанесен на предметное стекло. Где-то на конусе копья плотность будет идеальной. В фон должен быть серо-голубым. Бактерии будут очевидны по отсутствию какого-либо цвета.

верх

Окрашивание спор

Следующая модификация метода Виртца, описанная ниже, по нашему опыту оказалась эффективной и беспроблемной. Однако вас предупреждают, что цвет может потускнеть через несколько дней.В результате получается нежное сочетание зеленого и красный, который легко распознается при оптимальном освещении. *** ВНИМАНИЕ *** Краситель малахитовый зеленый токсичен и не может дышать. испарений или контакт с кожей могут быть опасными. Эту процедуру следует проводить в вытяжном шкафу. Подставка, горелка, красители и пипетки будут доступны в вытяжках. Процедура грязная — наденьте лабораторный халат или старую одежду.
  • Мазок готовится и фиксируется за 20 проходов через пламя.
  • Мазок помещают на экран над умеренным пламенем горелки Бунзена.
  • Обильное количество насыщенного водного раствора малахитового зеленого наносят на предметное стекло и оставляют на 10 минут для испарения. до 20 минут. В идеале тепло поддерживают так, чтобы краситель почти не запаривался, то есть беловатые пары еле выделялись. видимый. Краситель нужно добавлять, чтобы жидкость не пересыхала.
  • После охлаждения предметное стекло ополаскивают водопроводной водой, чтобы удалить излишки пятна.
  • Затем предметное стекло контрастируют в течение минуты в 0,25% водном сафранине.Затем предметное стекло ополаскивают, промокают и сушеные.

Споры окрашиваются в светло-зеленый цвет, а остальные клетки окрашиваются в розовый цвет. Лучше всего видны споры при погружении в масло. микроскопия. Часто цвета не очень яркие, поэтому необходимо, чтобы микроскоп был хорошо совмещен с оптимальный контраст и освещение. Сразу же сделайте заметки о цвете, так как через несколько дней зеленый цвет может потускнеть.

верх

Наблюдения за живыми бактериями

Иногда результаты анализа ухудшаются из-за того, что в среде вместо этого растет контаминирующий организм. предполагаемого бактериального изолята.Для быстрой проверки соответствия морфологии клеток культуре. из которого был взят посевной материал, можно приготовить влажный образец и исследовать его в темном поле и / или на фазовом контрасте. Если присутствуют, эндоспоры часто видны в фазовом контрасте, что позволяет избежать окрашивания спор.

Очень часто для идентификации неизвестного организма требуется знание его подвижности, то есть его возможность поступательного движения. Результаты инкубации на подвижном агаре могут быть трудными для интерпретации, частично для аэробных бактерий, которые плохо растут глубоко в агар.Хорошая быстрая проверка на моторику — это осмотр очень молодая культура методом висячей капли. Молодая культура — это бульонная культура, привитая накануне вечером, или бульонная культура, которую утром разбавляли в 10 раз, инкубировали и исследовали днем. Висит Капельная культура готовится, помещая очень маленькую каплю среды на покровное стекло, а затем переворачивая покровное стекло. слайд с вдавлением так, чтобы дно капли не касалось самого слайда.Можно использовать вазелин при необходимости сделать герметичную камеру.

Висящие капли можно исследовать с использованием любых линз объектива, хотя глубина падения предел может быть 100x. Изогнутый ползун с углублением искажает эффекты фазового контраста, но темное поле может работать, и его будет достаточно для обнаружения движения. Все живые бактерии перемещаются по броуновскому (молекулярному) движение со скоростью вибрации, которая обратно пропорциональна размеру ячейки.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *