Секреты окрашивания волос в домашних условиях – PROFI.RU — За профи говорят дела
«Менять цвет волос стало так же просто, как менять цвет ногтей. Производители краски для волос предлагают широчайшую палитру оттенков и составы разного назначения — стойкие, полустойкие, оттеночные, тонирующие. Предлагаем вам пошаговую инструкцию окрашивания волос в домашних условиях, чтобы получить результат не хуже, чем в салоне красоты.
Какую краску выбрать
Для начала нужно определиться, какого результата вы хотите добиться. Если ваша цель состоит в том, чтобы слегка «освежить» натуральный цвет волос, подойдёт полустойкая краска с малым содержанием аммиака или вовсе без него. Выберите краску «тон в тон» или на тон-другой светлее (темнее). В этом случае волосы будут выглядеть естественно.
Учтите, что профессиональные стилисты всегда обращают внимание на цвет лица. Они знают, что оттенки рыжего не подходят девушкам средиземноморского типа, то есть с желтоватой или оливковой кожей.
Если же душа желает радикальных перемен, и вы точно решили из брюнетки превратиться в каштановую шатенку или из рыженькой — в блондинку, без стойкой краски не обойтись. При окрашивании стойкой краской происходит два параллельных процесса: перекись водорода удаляет из волоса натуральный пигмент, а искусственный краситель проникает на его место. Кстати, пришло время выдать первый секрет — смесь красителя и проявителя наиболее активно действует первые 10–15 минут после приготовления, поэтому при окрашивании волос дома вам придётся проявить профессиональную сноровку и действовать очень быстро.
Пошаговая инструкция окрашивания волос в домашних условиях
- Возьмите любой крем для лица и смажьте кожу по линии роста волос — на лбу, висках и шее — не придётся потом отмывать краску.
- Окрашивание волос начинают с затылочной части. Сделайте посредине вертикальный пробор и покройте краской волосы по обеим сторонам пробора на затылке — сначала у корней, затем по всей длине. Отступите от прокрашенного пробора на полсантиметра и проведите новый пробор, счёсывая волосы на уже окрашенные. Таким образом нужно пройтись по всей голове — от затылка к вискам и лбу.
- Окрасив все волосы, расчешите их и поднимите вверх. Через 25–30 минут (внимательно читайте инструкцию!) тщательно вымойте голову тёплой водой с шампунем. Затем нанесите бальзам, который, как правило, находится в упаковке вместе с красителем и окислителем, и ещё раз как следует промойте волосы.
- Вам понравился новый цвет? Запишите название оттенка!
- Не забывайте об особом уходе для окрашенных волос, используйте специальные шампуни и кондиционеры.
Когда салон — лучше
В стандартном окрашивании волос нет ничего сложного, разве что вам повезло быть обладательницей особо густой копны волос или длинной косы.
Но если попытка «сменить окраску» не увенчалась успехом, вы получили цвет гораздо светлее или темнее желаемого, не пытайтесь исправить ситуацию самостоятельно, а сразу обратитесь к мастеру.
Колорирование и тонирование также считаются слишком сложными процедурами для окрашивания в домашних условиях, лучше делать их в салоне. Хотя есть прекрасный компромисс — пригласить специалиста на дом. Профессионал понадобится и в том случае, когда вы захотите придать своей шевелюре какой-нибудь сложный оттенок. Вот вам и второй секрет — на этот случай готовой краски не предусмотрено, придётся составлять смесь из нескольких красок, подбирая компоненты таким образом, чтобы реакция с натуральным пигментом дала «тот самый» цвет.
Ещё один сложный случай — закрашивание седины. Дело в том, что волосы, лишённые натурального пигмента, становятся более жёсткими, и воздействовать на них можно только при помощи профессиональных средств. Колористам приходится решать довольно сложную задачу, подбирая разные оттенки краски таким образом, чтобы и седые, и «цветные» пряди имели одинаковый цвет.
Окрашивание волос в Одинцово Салон красоты СВ СПА
Окрашивание волос в Одинцово
Колористика – огромная сфера парикмахерского искусства, в которой придумываются все новые и новые техники окрашивания волос. Ведь подобрать клиенту цвет, тон, способ окрашивания волос, которые выгодно представят оттенок кожи, скроют седину, подчеркнут черты лица и создадут актуальный завершенный образ – настоящее мастерство!
В салоне красоты СВ СПА вы можете быть уверены в великолепном результате окрашивания волос в Одинцово. Мы тщательно подбираем персонал, у нас работают лучшие стилисты высокого класса, с большим опытом работы в престижных салонах красоты. Кроме того, салон СВ СПА регулярно проводит обучение стилистов по работе с новыми брендами, линейками, наши мастера изучают модные техники окрашивания, непрерывно повышая свою квалификацию.
Все самые модные тренды окрашивания волос в салоне красоты СВ СПА:
- Сложное окрашивание
- Колорирование
- Тонирование
- Мелирование
- Air touch
- Окрашивание шатуш
- Балаяж
- Омбре
- Креативное окрашивание
Актуальным трендом сегодня является сложное окрашивание волос. В сложном окрашивании мастер сочетает различные техники, работая с каждой прядкой отдельно, чтобы добиться желаемого эффекта, при этом максимально сохранить натуральность и блеск волос. Сложное окрашивание создает уникальный рисунок на прядях, переливы оттенков, игру света в волосах, визуально увеличивает объем прически. Кроме того, сложное окрашивание прекрасно маскирует седину и не требует частого окрашивания корней.
Fabuloso – революция в окрашивании волос!
Пигменты Fabuloso придают волосам невероятный глянцевый блеск, насыщенность цвета, волосы выглядят сильными и здоровыми!
Попробуйте Fabuloso обновление цвета между регулярными окрашиваниями, чтобы оживить цвет и придать яркость и живой блеск волосам.
Fabuloso наполнение цветом быстро насыщает волосы пигментом, без повреждения меняя оттенок волос, придавая им мощную энергию блеска и силы.
Fabuloso сияние цвета придает блеск натуральным волосам, создавая эффект сияния, игры солнечных бликов.
После салонного окрашивания волос стилисты СВ СПА составят для вас персональный цвет Fabuloso для поддержания насыщенности цвета в домашних условиях.
Биоламинирование волос
После окрашивания, особенно после кардинальной смены цвета, волосы могут стать сухими, пористыми, ломкими. В этом случае подойдет процедура биоламинирования волос.
При биоламинировании поврежденные участки волос заполняются, волосы выглядят более плотными, гладкими, блестящими, струящимися. Также биоламинирование отлично защищает от частого применения утюжка и фена.
Процедура имеет накопительный эффект.
Окрашивание волос для мужчин «Камуфляж седины»
У мужчин не принято использовать стойкое окрашивание, хотя от появления седых волосков мужчины страдают не меньше женщин.
Всем нам хочется сохранить свою красоту и молодость как можно дольше и выглядеть стильно и свежо в любом возрасте!
Для мужчин есть прекрасная услуга «камуфляж седины». Это легкое тонирование волос, которое вы можете делать каждый раз при стрижке во время мойки головы, процедура занимает лишь несколько минут.
«Камуфляж седины» подбирается под тон волос, слегка усиливая естественный оттенок волос, не создавая при этом резких переходов цвета. При этом седые волоски становятся незаметными. Можно также окрашивать усы, бороду и брови.
Окрашивание волос в салоне СВ СПА – это идеально подобранные цвет, тон и стиль окрашивания, а также забота о здоровье ваших волос!
Окрашивание волос в Пензе
Модное окрашивание, мелирование на темные волосы, блондирование, колорирование — все эти виды окрашивания волос Вы можете сделать у нас в салоне. Разнообразная палитра красок, шелковистость и мягкость волос после окрашивания, а также их кристальное сияние не оставят Вас равнодушными.
Мастера «Салона Красоты Ромира» подберут для Вас и Ваших волос идеальный цвет с учетом Вашего цветотипа.
Технология окрашивания волос
Выбор красителя для процедуры окрашивания волос: следует учесть, что перед процедурой окрашивания Вам не следует мыть голову — так Вы сохраните жировую защитную прослойку волос.
Проба на чувствительность — есть ли у Вас склонность к аллергии на тот или иной краситель.
Перед нанесением краски специалист разделит Ваши волосы перпендикулярными проборами на четыре зоны. Сперва краска наносится по проборам, после чего на затылочную зону, поскольку процесс окрашивания волос там протекает медленнее. Но при окрашивании седых волос краску наносят сначала на места с наибольшим количеством седины.
Смывка краски. Краску необходимо смыть большим количеством воды с применением качественного шампуня для окрашенных волос. Важно чтобы структура волос была полностью подготовлена для последующих процедур: стабилизации цвета и закрепления.
Разновидности окрашивания волос
Существует несколько видов окрашивания волос: мелирование, тонирование, колорирование, блондирование. Какое выбрать — решаете Вы! Наши мастера сделают все, для того, что бы выглядели идеально.
Омбре
Омбре (иногда клиенты говорят: Амбре) — это популярная разновидность сложного окрашивания волос. В «ORSET» сложное окрашивание представлено на материалах компании Schwarzkopf Professional
Омбре (от фр. Ombré — тенистый, растушеванный) — это технология окрашивания волос с плавным переходом от темного оттенка у корней к более светлому — на кончиках волос. Техники Шатуш, окрашивание бронд и брондирование — так же являются разновидностями Омбре.
Стилисты салона красоты «ORSET» воплотят в жизнь любое пожелание клиента: омбре может быть сделано «а-ля натюрэль» — с эффектом выгоревших на солнце волос. Или же «поднять» омбре (амбре) чуть выше, высветлив пряди у лица (свелые пряди у лица отлично «освежают» образ, Вы будете выглядеть более юной.
Омбре (Амбре) может быть решено как в натруальных оттенках, так и в «экстримальных» — всё зависит от пожеланий клиента, стилисты «ORSET» мастерски владеют разными технологиями окрашивания, что позволяет добиваться самых сложных и насыщенных оттенков волос.
Считается, что самый выигрышный вариант: омбре на длинных вьющихся волосах, подстриженных «каскадом», но это правило далеко не универсально. Вы всегда можете записаться на бесплатную предварительную консультацию, и стилист «ORSET» с радостью даст рекомендацию, исходя из Ваших индивидуальных особенностей — какой именно формат сложного окрашивания больше всего подойдёт.
Тонирование волос
Это щадящее окрашивание с применением специальных оттеночных красителей, без использования аммиака и перекиси водорода. Процедуру тонирования выполняют для того, чтобы придать насыщенность, глубину цвету волос.
Вашим волосам придается разный оттенок при помощи нескольких легких оттеночных средств. Так как используемые косметические средства не касаются внутренней структуры волоса, а окрашивают лишь его оболочку, менять тон волос можно часто.
Благодаря тому, что краситель смывается постепенно, волосы выглядят ухоженными и аккуратными очень долго. Многие тонирующие средства так же содержат в своем составе ухаживающие комплексы, которые обеспечивают волосам здоровый и блестящий вид. Если Вам нравится экспериментировать со своей внешностью, если Вы пока еще не определились с радикальной сменой цвета, или просто хотите восстановить свой естественный цвет — услуга «тонирование волос» то, что Вам нужно!
Колорирование волос
При колорирование волосы делятся на отдельные пряди, на которые наносят красители. Затем их оборачивают полосками фольги, плёнки или специальной бумаги.
Целью колорирования является создание ощущения естественности цвета. Для этого стилисты прокрашивают нижние и верхние волосы в разные цвета, выбирая при этом, либо близкие друг к другу оттенки, либо наоборот, контрастирующие. В итоге, получается принцип природного перехода цвета, который создаёт внутреннее свечение волос, которое подчеркивает стрижку и придает волосам объем.
Существует два варианта исполнения колорирования: продольное и поперечное. При продольном окрашивании наносится краска разных оттенков по всей длине волос. При поперечном — цветовые тона, от светлого к темному, нанося на части, на которые распределяют прядь. Переход здесь получается плавным и естественным. Поперечный способ окрашивания сложнее, но результат держится намного дольше.
Мелирование волос
Это способ окрашивания волос отдельными прядями в светлые тона. Процедуре окрашивания подвергаются не все волосы, а лишь часть. Порядок прядей разнообразен и часто зависит от желаемого эффекта.
Процедура мелирование осуществляется с помощью «шапочки», либо на фольге.
Мелирование через шапочку — это один из самых простых методов мелирования. На голову одевается шапочка с дырками, и отдельные пряди волос вытягиваются и окрашиваются через эти дырочки. Расположение бликов в этом случае будет создавать эффект легкого творческого беспорядка.
Процесс мелирования на фольге заключается в нанесении на выбранные пряди обесцвечивающего состава, после чего пряди аккуратно заворачивают в фольгу.
Существует несколько видов мелирования:
Мелирование темными и светлыми цветами. Контрасты и переходы цвета достигаются осветлением и затемнением отдельных прядей.
Американское мелирование. Для данного типа мелирования выбирается несколько оттенков краски. За счет такой техники окрашивания волосам придается дополнительный объем.
«Мажимеш» и «балияж». Щадящий способ окрашивания волос. Так как в этой технике мелирования используется краска на кремовой основе с частичным добавлением воска. «Балияж» – это способ мелирования коротких волос. При использовании этого вида мелирования осветляются только кончики волос.
При мелировании отросшие корни волос меньше бросаются в глаза, в сравнении с обычном окрашиванием. В отличие от полного окрашивания процедуру мелирования можно делать раз в 2-3 месяца, так как после того как волосы отрастают, мелирование делается только на корни. Так же мелирование придает волосам визуальный объем. Противопоказанием к процедуре является недавно сделанная окраска хной или химическая завивка.
Блондирование волос
Блондирование – это крайний вариант осветления, когда волосам придается цвет намного более светлый, чем изначальный. Суть блондирования заключается в полном обесцвечивание пигмента волос. Лучше всего блондированию поддаются светлые от природы волосы. Существует несколько технологий осветления.
Скандинавский поинт, когда корни волос на макушке окрашивают в светлый холодный тон, а концы — в более темный, блондирование Платифиз, где основной оттенок — платиновый серебристый. «Шнурочек» или ватная техника — способ окрашивания, когда осветленные места не имею четких контуров, а беспорядочно «разбросаны» по голове. Для создания такого эффекта пряди волос накручивают на шнуры или накладывают на них ватные полоски с кремообразным осветлителем, при этом осветляется только верхний слой. Следующая технология блондирования — «Ситечко», цель которой – создание эффекта игры света. И «Зиг-заг». При таком способе волосы накручивают на мелкие и крупные бигуди в шахматном порядке, и окрашивают темным и светлым красителем.
Блондирования волос — один из наиболее жестких способов окраски волос, поэтому поддержания волос в хорошей форме потребуется постоянный уход.
Уход за волосами после окрашивания
Не стоит забывать, что правильный домашний уход после окрашивания волос – половина успеха для длительного результата. Обязательно прислушайтесь к советам нашего парикмахера. У нас Вы также сможете приобрести профессиональную косметику по уходу за окрашенными волосами от торговых марок Schwarzkopf Professional, LEBEL Cosmetics.
Окрашивание волос в домашних условиях
Окраска волос, а тем более мелирование, колорирование или тонирование — сложные процедуры, которые требуют ответственного подхода к работе. Поэтому доверять стоит только профессионалам. Окрашивание волос в домашних условиях может привести к неприятным последствиям — очень низкому качеству окраски и цвета, а также к серьезным заболеваниям волос.
Очень важно правильно определить цвет, подобрать концентрацию окислителя и определить впитывающую способность Ваших волос. В домашних условиях сделать это практически невозможно. В студии «ORSET» за Вас все сделают мастера, с использованием только профессиональной косметики, что надолго обеспечит стойкость цвета без травмирования волос.
При необходимости Вам предложат восстановить волосы, а также дадут полезные рекомендации по уходу за ними. Качество услуг салона красоты «Ромира», индивидуальный подход к каждому клиенту, а также конечный результат приятно удивят Вас!
| Услуга | Цена |
| Окрашивание волос | |
| Окрашивание волос Goldwell | |
| Окрашивание/Тонирование волос в 1 тон GOLDWELL | |
| Окрашивание, тонирование кор./сред. волос | 3950/4250 |
| Окрашивание, тонирование дл./супердл. волос | 4950/5250 |
| Окрашивание корней (до 2-х см) | 4250 |
| Тонирование Men Reshade седины кор./сред. волос | 1800/2000 |
| Экспресс-тонирование Colorance сред./длин. волос | 3200/4200 |
| NEW BLOND корни/NEW BLOND корни+длина | 3600/4500 |
| Препигментирование волос | 1400 |
| Окрашивание Goldwell Color Balancing | |
| Color Balancing кор./сред. волос | 4500/5300 |
| Color Balancing длин./супердл. волос | 5500/6350 |
| Окрашивание/Тонирование сложное GOLDWELL | |
| Сложное окрашивание кор./сред. волос | 5900/6400 |
| Сложное окрашивание длин./супердл. волос | 7400/8300 |
| Коррекция цвета (снятие цвета+тонирование) сред./длин. волос | 10900/12900 |
| Элементы дизайна (пряди) | 3500 |
| Мелирование (разные техники) Мелирование+Тонирование | |
| Мелирование (классика, фольга) кор./сред. волос | 4700 |
| Мелирование (классика, фольга) длин./супердл. волос | 5500/6500 |
| Тонирование при классическом мелировании (любая длина) | 2600 |
| Прикорневое классическое мелирование/частич. мелир. (тем. зона) | 4950 |
| Мелирование+тонирование кор./сред. волос | 5000/6200 |
| Мелирование+тонирование длин./супердл. волос | 7500/9000 |
| Мелирование+тонирование частич./тем. зона | 6200 |
| Растяжка цвета+тонирование сред./длин. волос | 8900/10900 |
| Растяжка цвета тем. зоны длин. волос | 6400 |
| Осветление корней+тонирование кор.сред./длин.супердл. волос | 4990/5990 |
| Мелирование Airtouch длин./супердл. волос | 10800/12800 |
| Мелирование Airtouch прикорневое | 9500 |
| Окрашивание LOreal Professional | |
| Окрашивание/Тонирование волос в 1 тон LOreal | |
| Окрашивание, тонирование кор./сред. волос | 3950/4250 |
| Окрашивание, тонирование длин./супердл. волос | 4950/5250 |
| Окрашивание корней (до 2-х см) | 4250 |
| Препигментирование волос | 1400 |
| Комбинированное окрашивание LOreal (корни+длина) | |
| Комбинированное окрашивание кор./сред. волос | 3950/4900 |
| Комбинированное окрашивание длин./супердл. волос | 5350/6250 |
| Окрашивание/тонирование сложное LOreal | |
| Сложное окрашивание кор./сред. волос | 5900/6400 |
| Сложное окрашивание длин./супердл. волос | 7400/8300 |
| Коррекция цвета (снятие цвета+тонирование) сред./длин. волос | 10900/12900 |
| Элементы дизайна (пряди) | 3500 |
| Мелирование (разные техники) Мелирование+Тонирование | |
| Мелирование (классика, фольга) кор./сред. волос | 5600 |
| Мелирование (классика, фольга) длин./супердл. волос | 6500/7200 |
| Тонирование при классическом мелировании (любая длина) | 2800 |
| Прикорневое классическое мелирование/частич. мелир. (тем. зона) | 5400 |
| Мелирование+тонирование кор./сред. волос | 6200/7300 |
| Мелирование+тонирование длин./супердл. волос | 8600/9990 |
| Мелирование+тонирование частич./тем. зона | 6900 |
| Растяжка цвета+тонирование сред./длин. волос | 8900/10900 |
| Растяжка цвета тем. зоны длин. волос | 6800 |
| Осветление корней+тонирование кор.сред./длин.супердл. волос | 5850/6700 |
| Мелирование Airtouch длин./супердл. волос | 13990/14990 |
| Мелирование Airtouch прикорневое | 10500 |
| Обесцвечивание PLATINIUM/Blondis LOreal | |
| Обесцвечивание кор./средн. волос | 2900/3150 |
| Обесцвечивание длин./супердл. волос | 3400/3850 |
| Декапирование LOreal | |
| Декапирование кор./сред. волос | 1200/1400 |
| Декапирование длин./супердл. волос | 1800/2200 |
| Декапирование глубокое кор./сред. волос | 1500/1900 |
| Декапирование глубокое длин./супердл. волос | 2600/3400 |
| Осветление Lightening Oil LOreal | |
| Осветление кор./сред. волос | 1850/2450 |
| Осветление длин./супердл. волос | 2900/3200 |
| Окрашивание CHI | |
| Окрашивание/Тонирование CHI | |
| Окрашивание кор.сред./длин.,супердл. волос | 5800/6800 |
| Сложное окрашивание кор.,сред./длин.,супердл. волос | 7500/9500 |
| Коррекция цвета (снятие цвета+тонирование) сред./длин. волос | 11990/14500 |
| Окрашивание корней (до 2-х см) | 5200 |
| Окрашивание Kydra | |
| Окрашивание/Тонирование Kydra | |
| Окрашивание кор.сред./длин.,супердл. волос | 5800/6800 |
| Сложное окрашивание кор.,сред./длин.,супердл. волос | 7500/9500 |
| Коррекция цвета (снятие цвета+тонирование) сред./длин. волос | 11900/14500 |
| Окрашивание корней (до 2-х см) | 5200 |
Окрашивание Airtouch | ВолосоМагия
Содержание:
Что такое Airtouch
Airtouch – дословно с английского означает «прикосновение воздуха».
При этом окрашивании, пряди волос выбираются по определенной схеме (на данный момент их несколько) и в определенном порядке. Но самое интригующее – использование незаурядных инструментов. Каждая прядь волос обдувается феном так, чтобы тонкие и короткие волоски выпали из этой массы, а прокрашиваться будут те, что остались в руках у мастера. Именно благодаря такому кропотливому разделению прядей, волосы в последствии имеют многогранные переходы и переливы. Осветленные таким образом, у них не будет жестких переходов, как это случается при мелировании или омбрэ.
Сколько носится окрашивание в технике Air touch. Как поддерживать окрашивание
Самое большое преимущество для воспользовавшихся таким окрашиванием – долгоиграемость. Носиться оно будет не менее 6 месяцев, а иногда и год. Это зависит от пожеланий клиента и правильности проведенной техники. Тем не менее, тонирование придется повторять ежемесячно, если хотите продлить жизнь холодному оттенку волос. Осветленные пряди будут отрастать постепенно, плавно. Согласно, Вашей генетической расположенности к росту волос.
Кто создатель техники
Кто же создал такую технологию, на обучение которой многие мастера тратят немыслимые суммы? Считается, что это был Владимир Сарбашев. Но есть мнения, что техника уже давно была опробована и принята сначала в Америке, голливудскими стилистами, а уже потом добралась и до наших краев. Получается, что Сарбашев только отточил технологию аир тач до совершенства, разработав схемы и правила. Мнения расхожи, но результат выглядит впечатляюще.
https://www.instagram.com/p/BfdlbSQl7C_/
Нюансы техники и схема разделения
А теперь подробней о нюансах техники и схеме разделения. Как и было сказано выше, каждая прядь разделяется посредством выдува волос феном.
Воздух фена должен быть при этом холодным, чтобы избежать излишней травматичности при нагреве пряди.
Сама прядь приподнимается от поверхности головы на градус прямого угла. Чем тоньше пряди разделения, тем качественней будет осветление. Каждая обрабатываемая красителем прядь, прокладывается фольгой, термобумагой или хлопковым валиком, чтобы избежать пятен.
Кому подойдет такая техника
Еще одно неоспоримое преимущество техники эир тач, перед техниками «свободной руки» –она не зависит от длины волос или степени их расслоенности в стрижке. А значит подойдет обладательницам всех текстур и форм, за исключением совсем коротких стрижек. Для таких случаев нужно воспользоваться другими техниками. Подойдет Балаяж, Контуринг или Nirvana Blond (темные корни, осветленные концы). Главное правильно донести свои пожелания мастеру.
Техниика balayageКак смотрится Airtouch на различных цветах волос
Окрашивание Airtouch для темных волос
Окрашивание Airtouch блондинок
Окрашивание Airtouch для рыжих волос
Вред
Существует ли вред для волос при данной технике? Знакомьтесь с самыми популярными видами окрашвиания в 2020 году на этой странице. Было бы крайне глупо утверждать, что нет. Как и любое осветление Airtouch вредит волосам, особенно если они находятся в руках неопытного мастера.
Читайте также:
Но это не значит, что эту проблему невозможно решить. К счастью мы живем в то время, когда разработаны новейшие системы защиты для волос. И это не только знаменитейший Olaplex, но и так же Wellaplex от Wella Proffessional, Bond Ultim8 от Marix, Niophlex и пр.
Можно ли воспользоваться техникой Airtouch дома
Повторить окрашивание в технике Air touch в домашних условиях невозможно. Процесс слишком затратный и долгий. Опытный мастер в салонных условиях, даже при наличии ассистента, будет выполнять работу от 4 до 9 часов. При этом, у него под рукой будут необходимые инструменты и широкий выбор красителей. А это еще один весомый аргумент в тему эксклюзивности техники и оправдание высокой цены.
Сложное окрашивание волос в Киеве
Сложное окрашивание волос
В женской природе заложено желание экспериментировать с внешностью, меняя образы. Каждая женщина знает, что поход к парикмахеру и стилисту снимает усталость и стресс, а новая стрижка или цвет волос – это первая ступенька к приятным изменениям в жизни.
Окрашивание отдельных прядей, при котором мастер использует от двух до десяти тонов, называется сложным окрашиванием или колорированием. Колорирование придает объем тонким волосам, подчеркивает структуру стрижки, добавляет ей эффектности.
По способу нанесения тонов колорирование бывает:
- продольным – оттенки накладываются по всей длине волос;
- поперечным – прядь условно разделяют на несколько частей, а нанесенные тона имеют вид градиента.
Колорирование включает в себя множество техник окрашивания. Омбре, балаяж и шатуш сегодня самые популярные в модном мире. И, судя по всему, не собираются сдавать позиции. Поэтому остановимся на них подробней. Техника окрашивания Омбре
Данная техника не теряет популярности уже много сезонов. Один из секретов ее востребованности – универсальность. Это двутональное окрашивание с плавным переходом будет одинаково хорошо смотреться на волосах любой длины и цвета. Обычно для покраски выбирают натуральные, близкие к естественным, оттенки – русый, кофейный, шоколадный и т.д.
По способу окрашивания ombré бывает двух видов:
- классическое – корни значительно темнее кончиков;
- обратное – кончики темнее, чем корни.
Смелым любительницам экспериментов подойдет цветное омбре. Для окрашивания используются яркие цвета – розовый, красный, синий, зеленый и т.д. Такое перевоплощение выполняется как краской, так и пастелью для волос. Подчеркнуть контраст тонов можно при помощи резкого омбре. В таком случае переход между оттенками будет ярким и четким.
Специалисты считают, что омбре отлично подходит для гладких волос. Девушкам с кучерявыми волосами следует быть аккуратными при выборе этого метода. Техника окрашивания Шатуш
Данный способ покраски волос подойдет блондинкам и брюнеткам. Эта щадящая техника позволяет создать плавные переходы между оттенками, благодаря чему пряди выглядят очень натурально. Самое главное в этой технологии – правильно подобрать необходимый тон для тонирования. Произвольно выбранные пряди окрашиваются не по всей длине, а с некоторыми промежутками. Затем границы между тонами растушевываются кистью. Близкие по оттенку тона создают эффект выгоревших прядей, поэтому волосы выглядят ухожено и натурально. Шатуш позволяет придать волосам объем и густоту.
Техника окрашивания Балаяж
В этом варианте окрашивания используется несколько оттенков, позволяющих создавать видимые четкие границы между ними. Выбор тонов и техники их нанесения зависит от длины волос и индивидуальных особенностей женщины. Если у вас короткая геометрическая стрижка, то подчеркнуть ее поможет balayage от середины или на самых кончиках. Обладательницам длинных волос можно делать балаяж по всей длине, отступив от корней на 4-5 см. Большой плюс такого окрашивания – «носиться» он будет от 10-ти недель. Эта техника хорошо смотрится на обладательницах кудрей.
Какую технику окрашивания выбрать?
Помимо описанных в статье, существует много других техник окрашивания: беби-лайтс (babylights), блонетирование, брондирование, голографическое, 3D, контуринг, мраморное, пиксельное, трафаретное, смоки-блонд, скво и др. Каждая из них отличается своим стилем, поэтому выбрать одну — достаточно сложно.
Если вы хотите придать объем тонким волосам — вам подойдет колорирование в натуральных тонах. При этом количество оттенков не должно быть слишком большим. На «жидких» волосах большое количество цветов просто не поместится, поэтому цвета будут выглядеть размыто и не аккуратно. Яркое окрашивание будет идти владелицам стильных креативных стрижек. Так же «авангардное» колорирование поможет оживить классические стрижки.
Самое главное правило при выборе цвета и техники окрашивания – ориентируйтесь не только на модные тенденции, а на особенности своей внешности. Ведь как бы красиво не выглядела покраска на понравившемся вам фото, не факт, что этот оттенок будет так же эффектно смотреться на вас. Поэтому перед покраской рекомендуем вам проконсультироваться с профессиональным колористом Салона красоты Руки-Ножницы.
Глядя на то, что Интернет пестрит статьями о колорировании в домашних условиях, хотим вас предостеречь от этого шага. Сделать качественное сложное окрашивание самостоятельно невозможно. Колорирование будет выглядеть потрясающе только при условии, что все оттенки подобраны правильно, пряди прокрашены равномерно, а между тонами соблюден плавный переход. Обладательницам темных и рыжих волос дополнительно может потребоваться предварительное осветление прядей. Как видим, тонкостей в этом сложном деле не мало. Поэтому лучше доверить свои волосы парикмахеру, который изучил все премудрости сложного окрашивания.
Не зависимо от природного цвета, опытный колорист поможет подобрать необходимую цветовую гамму, ориентируясь на оттенок вашей кожи, цвет глаз, стрижку и тип волос. Также парикмахер-стилист сориентирует в техниках колорирования и подскажет оригинальное решение, которое поможет подчеркнуть вашу индивидуальность и неповторимость.
Окрашивание волос в салоне красоты Tutto Bene в Костроме
REDKEN
Более 50 лет назад голливудская актриса Паула Кент совместно со своим личным стилистом создали принципиально новые, не вызывающие аллергии и раздражения средства по уходу за волосами Redken. Сегодня это одна из ведущих линий класса люкс.
Особенности окрашивания:
Redken предлагает несколько линий для окрашивания волос.
Стойкая краска Color Fusion — настоящий символ щадящего окрашивания: минимальное содержание агрессивных химических веществ позволяет мягко окрашивать даже ослабленные волосы. Эта стойкая краска глубоко проникает в волокна волос, а благодаря ухаживающим компонентам, не наносит вреда их структуре.
Если Вы любите часто менять цвет волос, рекомендуем использовать щадящую краску-блеск без аммиака Shades Eq. Мягкое окрашивание тон-в-тон не наносит никакого вреда волосам. Краска смывается очень медленно и равномерно, не создаваягрубой границы между окрашенными волосами и корнями.
Любительницы осветления и мелирования также смогут найти в Redken необходимые компоненты. Для стойкого, высококачественного эффекта (полного осветления до 6 – 7 уровней тона) есть пудра Up to 7. Результат – это равномерный цвет от корней до кончиков.
Система осветления без аммиака Lift 5/15 идеально отвечает требованиям техник быстрого мелирования, бережно осветляет до пяти уровней тона и ухаживает за волосами благодаря натуральным протеинам овса. Она безопасна для окрашенных волос и волос с химической завивкой.
Широкая палитра оттенков Redken позволяет создавать индивидуальные, яркие и неповторимые цвета во время окрашивания. Краска от Redken не просто обеспечивает длительное сохранение цвета, но и питает, восстанавливает, укрепляет и разглаживает поверхность волоса. Волосы становятся мягкими, шелковистыми, приобретают здоровый вид и зеркальный блеск.
ALTER EGO
Окрашивание волос при помощи средств этого бренда не преподнесет вам неприятных сюрпризов: никаких пережженных волос, никаких пятен, никакого неожиданного оттенка на выходе. Если, конечно, соблюдать при этом технологию, которую Alter Ego описывает для каждого средства отдельно.
В ассортименте Alter Ego Italy by Pettenon Cosmetics есть много линий для перманентного окрашивания, например, Technofruit Color, COLOREGO и безаммиачная Ammonia-Free: их агрессивные компоненты смягчены добавлением в формулы растительных экстрактов. Однако в первую очередь интерес представляют щадящие формулы красок Alter Ego – несмотря на отсутствие агрессивных оксидантов, аммиака, они дают очень стойкий эффект. К примеру, колорирующие кремы линии Passion Color Mask (рН 3,5) обеспечивают более естественное окрашивание, а также лечение и кондиционирование волос. Это самый быстрый и простой в использовании продукт, кислотность которого идеально подходит для лечения осветленных и поврежденных волос. Формула крем-краски Passion Color Mask обогащена питательным маслом инка, извлеченным из одноименного растения, произрастающего в Перу, а также жирными кислотами и антиоксидантами.
Отдельного упоминания заслуживают колорирующие бальзамы Alter Ego – их можно безбоязненно применять в домашних условиях самостоятельно даже на длинных волосах. Их консистенция достаточно жидкая для равномерного нанесения, но при этом не скапывает и не растекается. Такие тонирующие средства хорошо использовать, если вы хотите изменить имидж, но опасаетесь, что радикальное перекрашивание в итоге только испортит вашу внешность: тонирующий бальзам позволит примерить новый цвет, а в случае если вам он не понравится – смыть тон через неделю.
биологических пятен для микроскопа, которые можно найти дома
Поделиться — это забота!
Зачем нужны биологические красители для микроскопа?
Многие биологические образцы почти прозрачны и имеют очень слабый контраст между объектом и окружающей средой. Такие образцы трудно увидеть под обычным микроскопом.
Окрашивание — это наиболее распространенный метод улучшения видимости ваших образцов за счет увеличения контраста. Пятна или красители могут связываться с определенными типами компонентов образца по своей химической природе, в результате чего эти биологические структуры выделяются на фоне.
[На этом рисунке] Пример использования красителей для визуализации прозрачных образцов .
Можно легко снять кожуру с лука. Однако кожная ткань довольно прозрачна, поэтому вы можете видеть только лунки (или клетки), разделенные клеточными стенками. Благодаря быстрому и легкому окрашиванию Eosin Y ядра теперь видны.
Что могут делать биологические пятна?
Биологическое окрашивание — это наука. Ученые изучили тысячи химических красителей и красителей, чтобы пометить определенные компоненты, например, органеллы (например, ядра и митохондрии), биологические молекулы (например, сахар, липид, белок или ДНК) и микроорганизмы (например, Gram пятна от бактерий).
Более продвинутые методы, такие как иммунофлуоресцентное окрашивание на основе антител (IF) и флуоресцентная гибридизация на основе нуклеотидов in situ (FISH), могут пойти еще глубже и отличить один конкретный белок от тысяч других белков (IF) или один уникальный код ДНК из неограниченного количества комбинаций. возможности (РЫБА).
[На этом рисунке] Различные методы окрашивания — мощные инструменты для биологических и медицинских исследований.
(A) Поперечное сечение стебля Helianthus, окрашенного Fast Green, Congo Red и Toluidine Blue.(B) Окрашивание по Граму для различения грамположительных и грамотрицательных бактерий. (C) Окрашивание мазка крови человека по Райту-Гимзе для выявления эритроцитов и лейкоцитов. (D) Окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) показывает кровеносные сосуды в ткани мыши. (E) Иммунофлуоресцентное окрашивание (IF) митохондрий (зеленый) в эндотелиальных клетках человека. (F) гибридизация in situ (FISH) двух повторяющихся последовательностей на хромосомах дикого вида пшеницы; Предоставлено: доктор Пэт Хеслоп-Харрисон.
Что делать, если у меня нет доступа к стандартным биологическим пятнам?
Для любительской микроскопии у нас может быть нелегко получить доступ к этим новым методам и всем видам химикатов в домашних условиях.Обычно лаборатории получают окраски научного уровня у поставщиков реактивов для научных исследований или в специализированных магазинах микроскопов. Однако заказ небольших партий у этих поставщиков не может быть экономическим выбором. Как мы можем получить основные пятна от наших привычек?
[На этом рисунке] Мой микроскоп, инструменты и несколько пятен
К счастью, некоторые основные биологические пятна теперь доступны в Интернете. Я перечисляю несколько хороших вариантов в конце этой статьи. А пока хочу сообщить вам еще одну хорошую новость: , возможно, в вашем доме уже есть какие-то предметы повседневного обихода, которые можно использовать как пятна!
Метиленовый синий не только спасет ваших домашних рыбок, но и может окрасить вашу ДНК.
Метиленовый синий — популярный краситель для окрашивания клеток животных, чтобы сделать ядра более заметными.Метиленовый синий связывает ДНК, которой очень много в ядре. Клетки, окрашенные метиленовым синим, показывают ядра темно-синего цвета. Это также помогает клеткам выделяться на фоне, чтобы мы могли более четко видеть их окружение. Форма клеток может помочь вам определить, что они собой представляют (их морфологию).
[На этом рисунке] Проверить клетки, окрашенные метиленовым синим .
Левое изображение с меньшим увеличением. Вы можете увидеть ядра, окрашенные в темно-синий цвет (потому что метиленовый синий сильно окрашивает ДНК).Клеточная мембрана действует как воздушный шар и удерживает внутри все части клетки, такие как ядро, цитозоль и органеллы. Правое изображение с большим увеличением. Вы также можете увидеть небольшие палочковидные бактерии. Не волнуйтесь; это нормальные микробы полости рта.
Вы можете ознакомиться с нашим пошаговым руководством «Посмотрите на свои щечные клетки».
Метиленовый синий обычно используется любителями аквариума для лечения грибковых заболеваний. Его можно купить в зоомагазинах или в Интернете. Концентрация метиленового синего в аквариумных препаратах составляет около 2%.Мы предлагаем разбавить его водой в соотношении 1: 1. Это доведет концентрацию до 1%, что является стандартом для биологического окрашивания.
[На этом рисунке] Метиленовый синий для аквариума .
П.С. Несколько лет назад появились новости о том, что метиленовый синий обещает обратить вспять старение кожи человека. Однако мы, , не рекомендуем, вам это пробовать.
Малахитовый зеленый превращает клетки в изумрудные камни под микроскопом
Малахитовый зеленый — еще один распространенный предмет, который можно приобрести в магазине аквариумов.Он используется для лечения паразитарного заболевания, называемого ICH ( Ichthyophthirius Multifiliis; вид инфузорий) у рыб. Малахитовый зеленый — это краситель красивого зеленого цвета, который веками использовался для тканей, кожи и бумаги.
[На этом рисунке] Обычная обработка ICH, содержащая малахитовый зеленый .
[На этом рисунке] ICH — это болезнь рыб .
ICH (маленькие белые пятна) вызваны паразитами на коже рыб.Кредит: Джеймс Пикетт
Малахитовый зеленый — широко используемый биологический краситель для микроскопии. Например, малахитовый зеленый можно использовать как сине-зеленое контрастное пятно, чтобы выделить границу между бактериями и растительными клетками. Малахитовый зеленый также используется для окрашивания эндоспор, поскольку он может непосредственно окрашивать эндоспоры внутри бактериальных клеток.
[На этом рисунке] Это препарат палочковидных бактерий, называемый Bacillus subtitles.
Малахитовый зеленый окрашивает эндоспоры в зеленый цвет.Эндоспоры позволяют бактериям находиться в состоянии покоя в течение длительных периодов времени, даже столетий. Активно растущие бактерии (называемые вегетативными клетками) окрашиваются сафранином О.
П.С. Малахитовый зеленый часто использовался для поимки воров и грабителей путем посыпания денежных купюр порошком Малахитового зеленого. Любой, кто обращается с помеченными деньгами, обнаружит, что после мытья рук на коже остается зеленое пятно, которое держится несколько дней.
Йодные марки крахмала
Раствор йода является обычным антисептиком (предотвращает рост болезнетворных микроорганизмов).Возможно, у вас дома уже есть одна или две бутылки повидон-йода в аптечке. Его также можно приобрести в аптеке без рецепта.
[На этом рисунке] Раствор повидона йода является очень распространенным средством первой помощи.
Идеальная концентрация йода для биологического окрашивания 1-2%. Хотя на бутылке указано, что это 10%, вы можете посмотреть этикетку с содержимым на обратной стороне, и вы увидите «1% доступного йода», что означает, что этот раствор повидон-йода готов к использованию для окрашивания под микроскопом.
Йод может использоваться как индикатор крахмала. Крахмал — это разновидность сахара (или углеводов) с длинными разветвленными цепями. Крахмал производится большинством зеленых растений в качестве накопителя энергии. В зависимости от типа растений крахмал можно найти в их листьях, стеблях, плодах, семенах и корнях.
Например, и картофель, и сладкий картофель очень вкусны и богаты крахмалом. Однако знаете ли вы, что это очень разные части растений? Картофель — это особый утолщенный вид стеблей, называемый стеблевыми клубнями.С другой стороны, часть сладкого картофеля, которую мы едим, на самом деле является его корнем, называемым корневыми клубнями. Очень удивительно, правда?
[На этом рисунке] Есть два основных типа углеводов (или углеводов) в продуктах питания: простые и сложные.
Простые углеводы состоят из одной (моносахарид) или двух (дисахарид) основных сахарных единиц. Они содержатся в рафинированном сахаре, как белый сахар в сахарнице. Сложные углеводы представляют собой длинные и разветвленные цепи сахарных единиц.Их можно найти в растениях, таких как крахмал, и в животных, например, в гликогене.
В растворе йод может реагировать с крахмалом с образованием пурпурного цвета. При взгляде на образец, окрашенный йодом, плотные цвета указывают на область, где хранится крахмал.
Четыре способа приготовить микроскопические слайды тканей растений с вашим кулинарным талантом
Готовы ли вы попробовать пятна от йода (и других)? Перед этим вам понадобятся образцы, достаточно тонкие, чтобы их можно было увидеть под микроскопом.Вот четыре основных метода приготовления образца растительных тканей (да, используйте свой кулинарный талант!):
1. Пилинг
Вы можете снимать тонкие слои ткани с листьев, стеблей и кожуры лука.
2. Нарезка ломтиками
Вы можете использовать лезвие бритвы (будьте очень осторожны) или простой ручной микротом, чтобы разрезать тонкие срезы тканей растений.
3. Соскоб
Картофель и сладкий картофель можно разрезать пополам, соскрести немного картофеля (например, пюре) на предметное стекло микроскопа и добавить каплю воды.Это можно сделать ножом, ложкой или ногтями. На стакане не должно быть крупных кусочков картофеля.
4. Разбивание
Вы можете разбить кончик корня лука о тонкий слой ткани между предметным стеклом микроскопа и ложкой (будьте осторожны, чтобы не разбить предметное стекло). Мазок с корня лука отлично подходит для окрашивания йодом (для визуализации накопления крахмала) и метиленовым синим (чтобы увидеть, как клетки претерпевают митоз). Тот же метод можно использовать для фруктов (например, бананов) и семян (например, кукурузных зерен).Для некоторых твердых семян может потребоваться замачивание семян в воде в течение дня.
Другие красители могут использоваться в качестве лекарственных средств местного действия
Следующие предметы могут быть не такими распространенными, как метиленовый синий, малахитовый зеленый и йод. Однако, если оно у вас есть дома, оно может оказаться полезным биологическим пятном.
Горечавка фиолетовый
Gentian Violet (также называемый кристально-фиолетовым) является ключевым компонентом окрашивания по Граму для распознавания бактерий. Он также может окрашивать белые кровяные тельца, поскольку красные кровяные тельца не впитывают пятно.Горечавка фиолетовая иногда входит в аптечку в качестве антисептика для предотвращения грибковых инфекций.
[На этом рисунке] Горечавка фиолетовая
Эосин
Эозин является очень полезным красителем в микроскопии и может использоваться сам по себе или как часть одного из различных красителей, таких как гематоксилин и эозин (H&E). Эозин окрашивает цитозоль и определенный матрикс вне клеток в розовый цвет. Эозин (2% водный раствор) широко используется в нескольких странах Европы от опрелостей.Однако в США широко распространена цинковая паста.
[На этом рисунке] Раствор эозина
То, что делает кексы восхитительными, делает ваши микроскопические слайды красочными
Будьте изобретательны! Пищевой краситель также можно использовать для вашего хоббита-микроскопа! Если вам нравится печь пирожные, возможно, на вашей кухне есть пищевые красители.
[На этом рисунке] краситель пищевой
Красный № 3 (эритрозин)
Красный No.3 (эритрозин) представляет собой вишнево-красный краситель, обычно используемый в конфетах и пирожных, имеет свойство, подобное эозину Y, которое дает контраст цитозоля.
Зеленый № 3 (Fast Green FCF)
Зеленый № 3 (Fast Green FCF ) окрашивает белки и может быть хорошим контрастным средством для тканей растений.
Синий № 1 (бриллиантовый синий)
Blue No. 1 (бриллиантовый синий) — тот же самый, который используется в биохимических лабораториях для измерения содержания белка.Вы можете использовать бриллиантовый синий для окрашивания биологических образцов, богатых белками, например, бактерий.
Синий № 2 (индигокармин или индиготин)
Синий № 2 (индигокармин или индиготин) можно использовать для замены трипанового синего для различения живых и мертвых клеток. Здоровые клетки имеют неповрежденные клеточные мембраны, препятствующие проникновению индигокармина в клетки, и поэтому они выглядят неокрашенными. Мертвые клетки протекают, поэтому они окрашиваются индигокармином.
Желтый No.5 (тартразин) или красный № 40 (аллура красный)
Некоторые другие пищевые красители, такие как Yellow No. 5 (тартразин ) или Red No. 40 ( Allura Red ), могут быть не такими хорошими в качестве основного красителя для компонентов клеток. Тем не менее, вы все равно можете использовать их как контрастное пятно для добавления визуального контраста, например, для создания фона для структур, которые приобрели другой цвет.
П.С. Некоторые пищевые красители также являются индикаторами pH (означают, что они меняют цвет в кислых или основных растворах).Вы можете проверить, добавив немного уксуса, лимонного сока (оба кислые) или пищевой соды (щелочной).
Вам также предлагается попробовать все виды «натурального пищевого красителя », такие как свекольный сок, шафран и даже матча! Натуральный пищевой краситель хорош тем, что не убивает клетки, что удобно и безопасно для наблюдения за микрожизнью прозрачного пруда, такой как амебы, коловратки и инфузории.
Ищете красочный уголок в своем кабинете
Не забывайте свои художественные принадлежности, такие как чернила и акварель.Хотя они могут не окрашивать определенные клеточные компоненты, их все же можно использовать для усиления контраста в качестве контрастных красителей. Поскольку большинство биологических образцов представляют собой водянистые ткани (вода составляет 70% веса наших клеток), пигменты на водной основе будут работать лучше. Масляные или акриловые краски могут быть несовместимы.
Заключение
Сотни лет назад, когда только изобрели микроскоп, никто не умел окрашивать клетки. Ученые пробовали, испытывали и записывали то, что они нашли, и постепенно усваивали знания о биологических пятнах микроскопии.
Теперь у нас, вероятно, есть сотни или даже тысячи разноцветных химикатов, которые можно использовать для изучения каждого аспекта микроскопической страны чудес. Я хочу призвать вас попробовать, просто попробовать и попробовать, все, что вы можете придумать. ЭТО ПЕРВЫЙ ШАГ НАУКИ!
Номер ссылки
http://www.crscientific.com/microscope-stain.html
http://www.microscopy-uk.org.uk/mag/indexmag.html?http://www.microscopy-uk.org.uk/mag/artmay04/wdstains.html
Похожие сообщения
Урок 2: Установите слайд и «Посмотрите на клетки своей щеки»
Урок 3: Рассечение лука и «Посмотрите на клетки растений»
Поделиться — это забота!
Простое окрашивание: принцип, процедура и результаты
Последнее обновление 14 мая 2021 г.
Простое окрашивание можно использовать как быстрый и простой способ определения формы, размера и расположения клеток бактерий.В соответствии со своим названием, простое пятно — это очень простая процедура окрашивания, включающая один раствор красителя. Для окрашивания бактериальных клеток можно использовать любой базовый краситель, такой как метиленовый синий, сафранин или кристаллический фиолетовый.
Эти пятна легко выделяют гидроксид-ион или поглощают ион водорода, что оставляет пятно положительно заряженным. Поскольку поверхность большинства бактериальных клеток и цитоплазмы заряжена отрицательно, эти положительно заряженные пятна легко прилипают к поверхности клетки. После окрашивания можно оценить морфологию бактериальных клеток (форму и расположение).
Процедура
Простая процедура окрашивания Приготовление мазка- Используя стерильную инокуляционную петлю, перенесите полную петлю жидкой суспензии, содержащей бактерии, на предметное стекло (чистое обезжиренное микроскопическое предметное стекло) или перенесите изолированную колонию с культурального планшета на предметное стекло с каплей воды.
- Рассеяните бактерии на петле в капле воды на предметном стекле и распределите каплю по площади размером с монету. Это должен быть тонкий ровный мазок.
- Дайте мазку полностью высохнуть.
- Осторожно зафиксируйте пятно нагреванием, пропустив нижнюю часть предметного стекла через пламя горелки два или три раза. Фиксирует ячейку в слайде. Не перегревайте предметное стекло, так как это приведет к деформации бактериальных клеток.
- Покройте мазок метиленовым синим и дайте красителю остаться в мазке примерно на одну минуту (время окрашивания здесь не критично; где-то от 30 секунд до 2 минут должно дать вам приемлемое пятно, чем дольше вы оставите краситель в мазке). тем темнее будет пятно).
- Используя промывочную бутылку с дистиллированной водой, осторожно смойте излишки метиленового синего с предметного стекла, направляя легкую струю воды по поверхности предметного стекла.
- Смойте также любое пятно, попавшее на нижнюю часть предметного стекла.
- Снова пропитайте мазок, но на этот раз йодом. Йод закрепит пятно.
- Вымойте излишки йода проточной водой из-под крана. Тщательно промыть. (Вы можете не упомянуть шаги 4 и 5 в некоторых учебниках)
- Протрите заднюю часть предметного стекла и промокните загрязненную поверхность библейской бумагой или бумажным полотенцем.
- Поместите окрашенный мазок на предметный столик микроскопа мазком вверх и сфокусируйте мазок с помощью 10-кратного объектива.
- Выберите область мазка, в которой клетки хорошо распределены в монослое. Отцентрируйте исследуемую область, нанесите иммерсионное масло прямо на мазок и сфокусируйте мазок под маслом с помощью объектива 100X.
Бактериальные клетки обычно окрашиваются равномерно, и цвет клетки зависит от типа используемого красителя.Если используется метиеновый синий, некоторые гранулы внутри клеток некоторых бактерий могут быть более окрашенными, чем остальная часть клетки, что связано с присутствием различных химических веществ.
ИспользуетЛаборатория диагностической микробиологии обычно не занимается простыми методами окрашивания. Дифференциальное окрашивание, такое как окрашивание по Граму и окрашивание AFB , обычно используется для идентификации и дифференциации бактериальных изолятов.Простое окрашивание может быть полезно в следующих случаях.
- Для дифференциации бактерий от дрожжевых клеток: при культивировании эндоцервикального мазка на кровяном агаре и Staphylococcus spp, и дрожжевые клетки могут давать похожие на вид колонии в кровяном агаре (распространенная ошибка для нового технолога или микробиолога с меньшим опытом). Может оказаться полезным выполнение мокрого монтажа или простое окрашивание изолятом.
- Для предположительной идентификации бактериального изолята
Из-за повсеместного присутствия Bacillus spp могут присутствовать в качестве контаминанта в чашках для культивирования.В некоторых случаях (например, рост в кровяном агаре , но не рост в агаре MacConkey ) определение формы бактерий (палочка или кокки) может помочь устранить изолят как возможные контаминанты (например, Bacillus spp) или дальнейший процесс как потенциальный возбудитель (кокки).
Здравствуйте, спасибо, что посетили мой блог. Я Танкешвар Ачарья. Ведение блога — моя страсть. Я работаю ассистентом.Профессор и микробиолог отделения микробиологии и иммунологии Академии медицинских наук Патана, Непал. Если вы хотите, чтобы я писал о каких-либо постах, которые вы сочли запутанными / сложными, пожалуйста, укажите в комментариях ниже.
Окраска пограмм под микроскопом — цель, процедура и подготовка
Назначение, процедура и подготовка
Окрашивание по Граму, вероятно, является одной из наиболее часто используемых процедур окрашивания, используемых в области микробиологии. Это одно из дифференциальных красителей, которые используются для характеристики бактерий в одной из двух групп: грамположительные бактерии или грамотрицательные бактерии.
Грамположительные бактерии обычно имеют более сильное сродство к кристаллическому фиолетовому при нанесении грамм йода, чем грамотрицательная клеточная стенка.
Будучи протравой, грамм-йод образует комплекс с кристаллическим фиолетовым в пятне, который крепче прикрепляется к клеточной стенке грамположительных бактерий, чем грамотрицательных бактерий.
В то время как грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет из-за наличия толстого пептидогликанового слоя в стенках их клеток, грамотрицательные бактерии окрашиваются в красный цвет из-за более тонкого пептидогликанового слоя в их клеточной стенке (более толстый пептидогликановый слой позволяет для удержания пятна, но более тонкий слой — нет).
Техника
Окрашивание включает 3 основных этапа / процесса, которые включают:
o Окрашивание кристаллическим фиолетовым (водорастворимым красителем)
o Обесцвечивание (с использованием этанола / ацетона)
o Контрастное окрашивание (с использованием Safranin)
Из-за различий в толщине пептидогликанового слоя на клеточных стенках этих бактерий грамположительные бактерии сохранят окраску кристаллического фиолетового цвета после процесса обесцвечивания с использованием этилового спирта / ацетона.
После окрашивания образца кристаллическим фиолетовым для обесцвечивания образца используют этиловый спирт. Он достигает своей цели за счет обезвоживания пептидогликанового слоя путем его сжатия и сжатия. При этом большой кристаллический фиолетовый не может проникнуть через плотный слой пептидогликана, и, следовательно, он попадает в клеточную стенку грамположительных бактерий.
С другой стороны, внешняя мембрана грамотрицательных клеток не может удерживать комплекс кристаллического фиолетового йода, и, следовательно, цвет теряется.
Сафранин — более светлая окраска по сравнению с кристаллическим фиолетовым и, таким образом, нарушает пурпурную окраску грамположительных клеток.
Теория
В водном растворе кристаллический фиолетовый диссоциирует на ионы CV + и CV-. Эти ионы проникают через стенки и мембраны как грамположительных, так и отрицательных клеток.
CV + будет взаимодействовать с отрицательно заряженными компонентами бактериальных клеток и приобретать пурпурный цвет.При добавлении йода катионы йода (I- или I3-) взаимодействуют с CV +, что приводит к образованию более крупных комплексов CVI в цитоплазме и внешних слоях клетки.
При добавлении обесцвечивающего агента (этанола) он взаимодействует с липидами мембран как грамположительных, так и грамотрицательных положительных и грамотрицательных веществ.
Это приводит к потере внешней мембраны, что, в свою очередь, оставляет пептидогликановый слой открытым. Для грамотрицательных клеток этанол вызывает неплотность стенок и, следовательно, они не могут удерживать большие комплексы CV-L во время обесцвечивания.
В некоторых процессах окрашивания с использованием окрашивания по Граму получают образец грамм-переменных, который представляет собой смесь розового и пурпурного.
У некоторых родов, таких как Arthrobacter, Actinomyces и Corynebacterium, клеточная стенка особенно чувствительна к разрушению во время деления клеток.
Это приводит к грамотрицательному окрашиванию грамположительных клеток.
С другой стороны, в культурах Clostridium и Bacillus уменьшение толщины пептидогликана во время роста совпадает с увеличением количества клеток, которые, в свою очередь, окрашивают грамотрицательные.
Препараты
1. Первичный краситель (реагенты кристаллического фиолетового для окрашивания)
— Раствор A
o 2 грамма кристаллического фиолетового (сертифицировано 90 процентов содержания красителя)
o 20 мл этанола (95 процентов) объем / объем)
— Раствор B
o 0,8 грамма оксалата аммония,
o 80 мл дистиллированной воды,
Смешайте A и B, чтобы получить реагент для окрашивания кристаллическим фиолетовым, и храните в течение 24 часов.
2. M Ордант (граммы йода)
грамм йода,
грамм йодида калия,
или 300 мл дистиллированной воды,
Использование ступки, йодида и калия молотый, медленно добавляя воду и продолжая измельчать до полного растворения йода. (Храните это в янтарной бутылке)
3. Обесцвечивающее средство
o Этанол, 95% (об. / Об.)
Однако ацетон или ацетон 1: 1 с этанолом,
o 50 мл ацетон
o 50 мл этанола (95%)
4. Контраститель (сафранин)
— Рабочий раствор :
o 10 мл исходного раствора (2,5 грамма сафранина O и 100 мл 95-процентного этанола)
o 90 мл дистиллированной воды
Процедура
Подготовка мазка
Важно отметить, что толщина мазка образца на предметном стекле является важным фактором во время подготовки образца.Мазок не должен быть слишком тонким или слишком тонким.
Пометьте слайд.
Бактерии — нанесите образец на предметное стекло с помощью посевной иглы. Это также можно сделать, нанеся на предметное стекло каплю физиологического раствора, затем образец и затем перемешав.
Затем его следует дать высохнуть на воздухе перед термофиксацией, осторожно пропустив предметное стекло через горелку Бунзена (избегайте ожога образца).
Актиномицеты — то же самое, что и бактерии, но если попытаться получить часть колонии на предметном стекле, пока она еще не повреждена, это может быть достигнуто с помощью скальпеля.
Процедура окрашивания
o Залейте предметное стекло реагентом для окрашивания кристаллическим фиолетовым примерно на 1 минуту,
o Промойте предметное стекло слабой непрямой струей водопроводной воды в течение примерно 2 секунд, залейте предметное стекло протравой (йодом Грама), затем подождите, пока минута,
o Промойте предметное стекло еще раз в слабой непрямой струе водопроводной воды в течение примерно 2 секунд,
o Залейте предметное стекло обесцвечивающим средством и подождите 15 секунд.Это также можно сделать, добавляя по капле к предметному стеклу, пока обесцвечивающий агент, стекающий с предметных стекол, не станет прозрачным,
o Залейте предметное стекло контрастным сафранином (и подождите около минуты (от 30 секунд до 1 минуты)
o Промойте предметное стекло слабой непрямой струей воды из-под крана до точки, где появляется цвет в сточных водах, а затем промокните абсорбирующую бумагу,
o Добавьте каплю иммерсионного масла на окрашенный образец и наблюдайте под микроскопом
Окрашивание по Граму помогает охарактеризовать бактерии как грамположительные или грамотрицательные, позволяя энтузиастам / профессионалам-микроскопистам проверить стенку и мембрану бактериальной клетки, что, в свою очередь, влияет на различные аспекты ее патогенности и уровня вирулентности.
См. Также:
Эндоспорное пятно — определения, методика и процедура
Капсульное пятно — определения, методы и процедуры
Дополнительная литература: деление клеток, дифференциация клеток и цитопатология и узнайте о наборах для окрашивания для микроскопов.
Вернуться на главную страницу о бактериях
Вернуться к изучению различий между грамположительными и грамотрицательными бактериями
Возврат от окрашивания по Граму к окрашиванию клеток при микроскопии
Возврат пятен по Граму в информационный центр для микроскопии
сообщить об этом объявлении
Ссылки
Visca, P, Petrucca, A., Де Мори, П., Феста, А., Эвангело, Б., Антинори, А., и Петросилло, Н. (2001) Сообщество — Acinetobacter radioresistens Bacteremia у ВИЧ-положительных пациентов. Emerging Infectious Disease 7 (6): 1032 — 1035. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2631918/pdf/11747736.pdf
Anderson, G.K. Беверидж, Т. Дж., И Х. К. Кларк. 1983. Химический механизм окраски по Граму и синтез нового электронно-непрозрачного маркера для электронной микроскопии, который заменяет йодную протраву красителя.J. Bacteriol. 156 (2): 837-845.
Макклелланд Р., 2001. Пятно по Граму — ключ к микробиологии. Наблюдатель в медицинской лаборатории [сериал в Интернете]. Апрель 2001 г. [цитировано 6 августа 2005 г.]
Ссылки
faculty.stcc.edu/rapp/BIOT251/gram_stain_procedure.htm
http://serc.carleton.edu/ /research_methods/microscopy/viable_quant.html
Процедура окрашивания пограмм в микробиологии
Окрашивание по Граму — это дифференциальный метод окрашивания, используемый для отнесения бактерий к одной из двух групп (грамположительные и грамотрицательные) на основе свойств их клеточных стенок.Он также известен как окрашивание по Граму или метод Грама. Процедура названа в честь человека, разработавшего эту методику, датского бактериолога Ганса Христиана Грама.
Как работает краситель по Граму
Процедура основана на реакции между пептидогликанами в клеточных стенках некоторых бактерий. Окрашивание по Граму включает окрашивание бактерий, закрепление цвета протравой, обесцвечивание клеток и нанесение контрастного красителя.
- Первичный краситель (кристаллический фиолетовый) связывается с пептидогликаном, окрашивая клетки в пурпурный цвет.Как грамположительные, так и грамотрицательные клетки содержат пептидогликан в клеточных стенках, поэтому изначально все бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет.
- Грамм йод (йод и йодид калия) применяется в качестве протравы или фиксатора. Грамположительные клетки образуют комплекс кристаллический фиолетовый-йод.
- Для обесцвечивания клеток используют спирт или ацетон. У грамотрицательных бактерий гораздо меньше пептидогликана в клеточных стенках, поэтому на этом этапе они по существу обесцвечиваются, в то время как только часть цвета удаляется с грамположительных клеток, которые содержат больше пептидогликана (60-90% клеточной стенки).Толстая клеточная стенка грамположительных клеток обезвоживается на этапе обесцвечивания, заставляя их сжиматься и удерживая комплекс краситель-йод внутри.
- После этапа обесцвечивания наносится контрастное пятно (обычно сафранин, но иногда и фуксин) для окрашивания бактерий в розовый цвет. И грамположительные, и грамотрицательные бактерии захватывают розовое пятно, но оно не видно поверх более темного пурпурного цвета грамположительных бактерий. Если процедура окрашивания выполнена правильно, грамположительные бактерии будут фиолетовыми, а грамотрицательные — розовыми.
Назначение техники окрашивания по Граму
Результаты окрашивания по Граму просматривают с помощью световой микроскопии. Поскольку бактерии окрашены, можно не только идентифицировать их группу окраски по Граму, но и наблюдать за их формой, размером и структурой комкования. Это делает окраску по Граму ценным диагностическим инструментом для медицинской клиники или лаборатории. Хотя окраска не может однозначно идентифицировать бактерии, часто знание того, являются ли они грамположительными или грамотрицательными, достаточно для назначения эффективного антибиотика.
Ограничения техники
Некоторые бактерии могут быть грамм-переменными или грамм-неопределенными. Однако даже эта информация может быть полезна для сужения бактериальной идентичности. Этот метод наиболее надежен, когда возраст культур составляет менее 24 часов. Хотя его можно использовать с бульонными культурами, лучше сначала их центрифугировать. Основным ограничением метода является то, что он дает ошибочные результаты, если в методике допущены ошибки. Для получения надежного результата необходимы практика и навыки.Также инфекционный агент не может быть бактериальным. Эукариотические патогены окрашивают грамотрицательные. Однако большинство эукариотических клеток, за исключением грибов (включая дрожжи), не прилипают к предметному стеклу во время процесса.
Процедура окрашивания по Граму
Материалы
- Кристально-фиолетовый (первичная окраска)
- Йод по Граму (протрава для фиксации кристаллического фиолетового в клеточной стенке)
- Этанол или ацетон (обесцвечивающее средство)
- Сафранин (вторичное окрашивание или контрастное окрашивание)
- Вода в бутылочке для шприца или бутылке-капельнице
- Предметные стекла для микроскопа
- Составной микроскоп
ступеней
- Поместите небольшую каплю бактериального образца на предметное стекло.Тепло зафиксируйте бактерии на предметном стекле, трижды пропустив его через пламя горелки Бунзена. Слишком большое или слишком продолжительное воздействие тепла может привести к расплавлению клеточных стенок бактерий, искажению их формы и получению неточного результата. Если приложить слишком мало тепла, бактерии смоют предметное стекло во время окрашивания.
- Используйте пипетку, чтобы нанести основное краситель (кристаллический фиолетовый) на предметное стекло и оставить на 1 минуту. Осторожно промойте предметное стекло водой не дольше 5 секунд, чтобы удалить излишки пятна.Слишком долгое полоскание может удалить слишком много цвета, в то время как недостаточное полоскание может привести к тому, что на грамотрицательных клетках останется слишком много пятен.
- Используйте пипетку, чтобы нанести йод Грама на предметное стекло, чтобы закрепить кристаллический фиолетовый на клеточной стенке. Оставьте на 1 минуту.
- Промойте предметное стекло спиртом или ацетоном примерно 3 секунды, а затем сразу же осторожно ополосните водой. Грамотрицательные клетки потеряют цвет, а грамположительные останутся фиолетовыми или синими. Однако, если оставить обесцвечивающее средство слишком долго, все клетки потеряют цвет!
- Нанесите вторичное пятно, сафранин, и оставьте на 1 минуту.Осторожно смойте водой не дольше 5 секунд. Грамотрицательные клетки должны быть окрашены в красный или розовый цвет, а грамположительные клетки по-прежнему будут иметь фиолетовый или синий цвет.
- Просмотрите слайд с помощью сложного микроскопа. Для различения формы и расположения ячеек может потребоваться увеличение от 500x до 1000x.
Примеры грамположительных и грамотрицательных патогенов
Не все бактерии, идентифицированные окрашиванием по Граму, связаны с заболеваниями, но несколько важных примеров включают:
- грамположительные кокки (круглые): Staphylococcus aureus
- Грамотрицательные кокки: Neisseria meningitidis
- Грамположительные палочки (палочки): Bacillus anthracis
- Грамотрицательные палочки: Escherichia coli
грамм для выявления бактерий
Есть вопросы? Поговорите со специалистом.406-256-0990 или же Живой чат в
- Возраст 12+
- На складе, готово к отправке
- Это нужно быстро? Смотрите варианты доставки в корзине.
Узнайте, как различать бактерии с помощью метода окрашивания по Граму. Определите грамположительные и грамотрицательные бактерии с помощью этого практического набора для окрашивания по Граму высшего качества! Читать Подробнее
My Science Perks получают не менее $ 0.44 обратно на этот товар. Войдите или создайте Бесплатный HST Аккаунт, чтобы начать зарабатывать сегодня
Ограничения на доставку:ОПИСАНИЕ
Используйте этот привлекательный 5-звездочный набор для окрашивания по Граму, чтобы узнать все о дифференциации бактерий с помощью метода окрашивания по Граму.Внутри вы найдете краситель кристаллического фиолетового Хакера, контрастное окрашивание сафранином, краситель йода по Граму, этиловый спирт, 12 простых предметных стекол, 100 покровных стекол, капельницу для лекарств, перчатки без латекса и наше собственное, хорошо проверенное руководство по изучению.
Проверьте различные типы бактерий, такие как грамположительные Bacillus cereus и грамотрицательные Rhodospirillum rubrum, и сравните различия в окраске. (Вы также можете заказать этот набор для сравнения культур бактерий.)
Что такое окрашивание по Граму?Ганс Христиан Грам, датский бактериолог, обнаружил, что бактерии можно разделить на две разные группы — одну с сохранением окраски («грамположительные») и другую («грамотрицательные»).Его метод идентификации этих двух групп — «метод Грама» — стал первым шагом в любом процессе идентификации бактерий.
Как работает метод Грама:- Образец бактерий помещается на предметное стекло микроскопа;
- Затем он окрашивается и «фиксируется» раствором йода;
- Затем предметное стекло промывают растворителем / обесцвечивателем, чтобы «обесцветить» первое пятно;
- Грамположительные клетки сохранят окраску даже после промывки в растворителе, и окраска будет удалена с грамотрицательных клеток.
- Это связано с тем, что клеточные стенки G баран-отрицательных клеток содержат больше липидов (жирных веществ). Растворитель растворяет липидный слой, позволяя окрашивать клетку. Растворитель вызывает дегидратацию клеточной стенки G ram-positive , закрывая поры и задерживая пятно внутри клетки.
- На последнем этапе грамотрицательные клетки окрашиваются в другой цвет, чтобы отличать их от грамположительных клеток.
- Узнайте, действуют ли антибактериальные чистящие средства более эффективно против грамположительных или грамотрицательных бактерий
- Узнайте, одинаково ли эффективны обычные антибиотики против грамположительных и грамотрицательных бактерий
Делайте потрясающие снимки крупным планом с помощью микроскопа!Получите отличную цену на 2.0 Мегапиксельная цифровая камера от Home Science Tools. Вы сможете делать четкие снимки всего, что видите под оптическим прицелом. Кроме того, им легко пользоваться! См. Подробное описание >> |
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: Этот продукт может подвергнуть вас воздействию химических веществ, включая метилизобутилкетон, который, как известно в штате Калифорния, вызывает рак, и метанол, который, как известно в штате Калифорния, вызывает врожденные дефекты или другой вред репродуктивной системе.
БОЛЬШЕ ИНФОРМАЦИИ
ВКЛАДКА С СОДЕРЖАНИЕМ
Этот набор красителей по грамму включает:
- Кристаллический фиолетовый Hucker’s, 15 мл
- Спирт этиловый, 30 мл
- Краситель йодом по Граму, 15 мл
- Инструкции по набору красителей по грамму
- Нитриловые перчатки, пара
- Пипетка (капельница)
- Краситель Safranin O, 15 мл
- покровные стекла
- Обычные стеклянные слайды, 12 шт / уп
ТАБЛИЦА ТЕХНИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК
- Описание
- KT-GRAMSTN
- Технические характеристики
- СОДЕРЖАНИЕ
Ограничение на доставку: Этот товар доставляется только эконом-классом или UPS на почтовые адреса в 50 штатах США.
Предупреждение: ОПАСНОЕ ХИМИЧЕСКОЕ ВЕЩЕСТВО — Этот набор содержит опасные химические вещества. Не для детей младше 15 лет. Для использования под присмотром взрослых. Внимательно прочтите предупреждающие надписи.
Мы хотим, чтобы этот предмет был живым, когда вы его получите! Следовательно, нам необходимо знать, когда вы будете дома, чтобы получить его (минимизируя воздействие стихии).Укажите дату доставки, среда — Пятница, это минимум 7 дней с сегодняшнего дня.
Микроскопы / Принадлежности, предметные стекла и наборы / Принадлежности для изготовления слайдов
/ микроскопы /, / микроскопы / аксессуары-комплекты-слайды /, / микроскопы / аксессуары-комплекты-слайды / принадлежности-слайды /
Мы поняли. Наука может быть беспорядочной. Но продукты и услуги Home Science Tools справятся с этим.
Наша продукция долговечна, надежна и доступна по цене, позволяя вам перемещаться из полевых условий в лабораторию и на кухню. Они не подведут, с чем бы они ни боролись. Будь то (чрезмерно) нетерпеливые молодые ученые из года в год или строгие требования, которые возникают раз в жизни.
И если ваш научный запрос идет не так, как ожидалось, вы можете рассчитывать на помощь нашей службы поддержки клиентов. Рассчитывайте на дружеские голоса на другом конце телефона и советы экспертов в вашем почтовом ящике.Они не будут счастливы, пока вы не станете счастливыми.
Итог? Мы гарантируем, что наши продукты и услуги не испортят ваше научное исследование, каким бы беспорядочным оно ни было.
Вопросы? Свяжитесь с нашей службой поддержки клиентов.
Реагенты, использованные при окраске по Граму
Для окрашивания по Граму используются четыре реагента.
1. Кристаллический фиолетовый (CV) является основным красителем, который используется для окрашивания в пурпурный цвет как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий.
Молекулы CV заряжены положительно и связываются с отрицательно заряженными структурами клеточной стенки бактерий.
2. Йод (I) действует как фиксатор красителя (протравы), который фиксирует пурпурную окраску как у грамположительных, так и у грамотрицательных бактерий.
Молекулы йода связываются с молекулами кристаллического фиолетового с помощью электростатических сил, образуя большой нерастворимый комплекс кристаллического фиолетового и йода (комплекс CV-I).
3. 95% этиловый спирт (этанол) используется для обесцвечивания грамотрицательных бактерий.Спирт растворяет внешнюю мембрану и разрушает тонкий пептидогликан,
, позволяя пурпурным комплексам CV-I покинуть грамотрицательную клеточную стенку. Грамположительные бактерии после промывки спиртом остаются пурпурными,
из-за их густого и прочного пептидогликана, который выдерживает воздействие спирта и сохраняет комплексы CV-I.
4. Сафранин используется в качестве контрастного красителя, окрашивающего грамотрицательные бактерии в розовый цвет. Как и кристаллический фиолетовый, это положительно заряженная молекула, которая связывается с отрицательными структурами бактериальной клеточной стенки.
Грамположительные бактерии уже окрашены в пурпурный цвет из-за более темного кристально-фиолетового цвета и остаются пурпурными, несмотря на добавление розового сафранина.
Шаги по окрашиванию по Граму
Нанесите кристально-фиолетовый на предметное стекло и держите 60 секунд. Промойте горку водой .
Нанесите йод на предметное стекло и держите 60 секунд. Промойте горку водой .
Нанесите на предметное стекло 95% этиловый спирт и выдержите от 5 до 10 секунд. Промойте горку водой .
Наконец, нанесите сафранин на слайд и держите его 45 секунд. Промойте горку водой .
Рисунок 1: Рабочий процесс метода окрашивания по Граму
Лаборатория 5: Прямое и непрямое окрашивание
A.ВВЕДЕНИЕ В ОКРАШИВАНИЕ
ОБСУЖДЕНИЕ
В нашей лаборатории морфологию бактерий (форму и структуру) можно исследовать двумя способами:
- путем наблюдения за живыми неокрашенными организмами (влажный образец) или
- путем наблюдения за убитыми окрашенными организмами .
Поскольку бактерии почти бесцветны и поэтому мало контрастируют с бульоном, в котором они находятся во взвешенном состоянии, их трудно наблюдать в неокрашенном виде. Окрашивание микроорганизмов позволяет:
- видеть больший контраст между организмом и фоном,
- различать различные морфологические типы (по форме, расположению, граммовой реакции и т. Д.)),
- наблюдают определенные структуры (жгутики, капсулы, эндоспоры и т. Д.).
Перед окрашиванием бактерий вы должны сначала понять, как «закрепить» микроорганизмы на предметном стекле . Если препарат не зафиксировать, микроорганизмы будут смыты с предметного стекла во время окрашивания. Самый простой метод — это воздушная сушка и термофиксация. Организмы фиксируются теплом, пропуская высушенный на воздухе мазок организмов через пламя газовой горелки или удерживая его перед отверстием микроинсинератора.Тепло коагулирует белки организмов, заставляя бактерии прилипать к предметному стеклу.
Процедура для термофиксации выглядит следующим образом:
1. Если культура взята из агаризованной среды :
a. Используя бутылку-капельницу с деионизированной водой , которая находится в стойке для окрашивания , поместите 1/2 капли воды нормального размера на чистое предметное стекло, прикоснувшись пипеткой к предметному стеклу (см. Рис. 2). Также можно использовать стерилизованную петлю для посева, чтобы поместить на предметное стекло каплю деионизированной воды.
г. Используя стерильную петлю для посева, в асептических условиях удалите небольшое количество культуры с поверхности агара и осторожно прикоснитесь к нему 2-3 раза к капле воды , пока вода не станет заметно мутной (см. Рис. 3 ).
г. Сожгите оставшиеся бактерии в петле для посева. Если в воду добавить слишком много культуры, вы не увидите окрашенных отдельных бактерий.
г. После того, как инокуляционная петля остынет, распределит суспензию примерно по половине предметного стекла , чтобы сформировать тонкую пленку (см.рис.4).
эл. Дайте этой тонкой суспензии полностью высохнуть на воздухе (см. Рис. 5). Перед термической фиксацией предметного стекла мазок должен полностью высохнуть!
ф. Чтобы закрепить бактерии на предметном стекле путем нагревания, возьмите высушенное на воздухе предметное стекло с помощью пинцета и удерживайте нижнюю часть предметного стекла напротив мазка рядом с отверстием микроинсинератора в течение 10 секунд. (см. Рис. 6), как показано на рисунке. ваш инструктор. Если предметное стекло недостаточно нагреть, все бактерии смоются.При его перегреве структурная целостность бактерий может быть нарушена.
2. Если организм взят из бульонной культуры :
a. С помощью маркера нарисуйте круг размером с никель на дне предметного стекла микроскопа (см. Рис. 10)
b. Переверните слайд. Используя стерильную петлю для посева, асептически поместите 2 или 3 петли культуры внутри этого круга на верхней части предметного стекла (см. Рис.11). Не использовать воду .
г. Используя инокуляционную петлю, распределите суспензию по области, обозначенной кружком , чтобы сформировать тонкую пленку.
г. Дайте этой тонкой суспензии полностью высохнуть на воздухе .
e. Для термической фиксации бактерий на предметном стекле, возьмите высушенное на воздухе предметное стекло пинцетом для покровного стекла и удерживайте нижнюю часть предметного стекла напротив мазка рядом с отверстием микроинсинератора в течение 10 секунд.6) как показано вашим инструктором. Если предметное стекло недостаточно нагреть, все бактерии смоются. При его перегреве структурная целостность бактерий может быть нарушена.
Чтобы понять, как работает окрашивание, будет полезно немного узнать о физической и химической природе пятен. Пятна обычно представляют собой соли, в которых один из ионов окрашен. (Соль — это соединение, состоящее из положительно заряженного иона и отрицательно заряженного иона.) Например, краситель метиленовый синий на самом деле представляет собой соль хлорида метиленового синего, которая в воде диссоциирует на положительно заряженный ион метиленового синего синего цвета. и отрицательно заряженный ион хлорида, который не имеет цвета.
Красители и морилки можно разделить на две группы: основные и кислотные. Если цветная часть красителя находится в положительном ионе , как в приведенном выше случае, он называется основным красителем (примеры: метиленовый синий, кристаллический фиолетовый, сафранин). Если цветовая часть находится в отрицательно заряженном ионе , он называется кислотным красителем (примеры: нигрозин, конго красный).
Из-за своей химической природы цитоплазма всех бактериальных клеток имеет небольшой отрицательный заряд при росте в среде с почти нейтральным pH.Следовательно, при использовании основного красителя положительно заряженная цветная часть пятна соединяется с отрицательно заряженной бактериальной цитоплазмой (противоположные заряды притягиваются), и организм становится непосредственно окрашенным (см. Рис. 1). Кислотный краситель из-за своей химической природы реагирует иначе. Поскольку цветная часть красителя находится на отрицательном ионе, он не будет легко соединяться с отрицательно заряженной бактериальной цитоплазмой (подобно отталкиванию зарядов). Вместо этого он образует отложение вокруг организма , оставляя сам организм бесцветным (см.рис.1). Поскольку организм виден косвенно, этот тип окрашивания называется непрямым, или отрицательным, и используется для получения более точного представления о размере, форме и расположении бактерий.
В сегодняшней лаборатории мы будем производить как прямое, так и непрямое окрашивание нескольких микроорганизмов.
B. ПРЯМОЕ ПЯТНЕНИЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ОСНОВНОГО КРАСИТЕЛЯ
При прямом окрашивании положительно заряженная цветная часть основного красителя соединяется с отрицательно заряженной бактерией, и организм непосредственно окрашивается.
ОРГАНИЗМЫ
Ваши чистые культуры Staphylococcus epidermidis (кокк со стафилококком) или Micrococcus luteus (кокк с тетрадным или сарциновым расположением) и Escherichia coli (малая палочка) (малая палочка) из лаборатории 3.
ПРОЦЕДУРА (выполняется индивидуально)
1. Escherichia coli или Enterobacter aerogenes
a.Выполните тепловую фиксацию мазка Escherichia coli или Enterobacter aerogenes следующим образом:
1. Используя бутылку-капельницу с деионизированной водой , найденную в стойке для окрашивания , поместите 1/2 капли воды нормального размера. на чистом слайде, прикоснувшись пипеткой к слайду (см. Рис. 2). Также можно использовать стерилизованную петлю для посева, чтобы поместить на предметное стекло каплю деионизированной воды.
2. Используя стерильную петлю для посева, асептически удалите небольшое количество культуры с поверхности агара и осторожно прикоснитесь к ней 2–3 раза к капле воды , пока вода не станет заметно мутной ( см. рис.3).
3. Сожгите оставшиеся бактерии в петле для посева. Если в воду добавить слишком много культуры, вы не увидите окрашенных отдельных бактерий.
4. После того, как инокуляционная петля остынет, распределите суспензию примерно по половине предметного стекла , чтобы сформировать тонкую пленку (см. Рис. 4).
5. Дайте этой тонкой суспензии полностью высохнуть на воздухе (см. Рис. 5). Перед термической фиксацией предметного стекла мазок должен полностью высохнуть!
6.Чтобы закрепить бактерии на предметном стекле путем нагревания, возьмите высушенное на воздухе предметное стекло с помощью пинцета и удерживайте нижнюю часть предметного стекла напротив мазка рядом с отверстием микроинсинератора в течение 10 секунд. (см. Рис. 6), как показано на рисунке. ваш инструктор. Если предметное стекло недостаточно нагреть, все бактерии смоются. При его перегреве структурная целостность бактерий может быть нарушена.
г. Поместите предметное стекло на лоток для окрашивания и покройте всю пленку сафранином (см.рис.7А). Пятно на за одну минуту .
г. Возьмите предметное стекло за один конец и держите его под углом над лотком для окрашивания. Используя промывочную бутылку на столе, осторожно смойте излишки сафранина с предметного стекла (см. Рис. 7B). Также смойте любое пятно, попавшее на дно предметного стекла.
г. Используйте промокательную бумагу, чтобы промокнуть предметное стекло (см. Рис. 8). Наблюдайте с помощью иммерсионной микроскопии в масле.
2. Micrococcus luteus или Staphylococcus epidermidis
a.Выполните термофиксацию мазка Micrococcus luteus или Staphylococcus epidermidis следующим образом:
1. Используя бутылку-капельницу с деионизированной водой , найденную в стойке для окрашивания , поместите 1/2 капли воды обычного размера на чистом слайде, прикоснувшись пипеткой к слайду (см. Рис. 2). Также можно использовать стерилизованную петлю для посева, чтобы поместить на предметное стекло каплю деионизированной воды.
2. Используя стерильную петлю для посева, асептически удалите небольшое количество культуры с поверхности агара и осторожно прикоснитесь к ней 2–3 раза к капле воды , пока вода не станет заметно мутной ( см. рис.3).
3. Сожгите оставшиеся бактерии в петле для посева. Если в воду добавить слишком много культуры, вы не увидите окрашенных отдельных бактерий.
4. После того, как инокуляционная петля остынет, распределите суспензию примерно по половине предметного стекла , чтобы сформировать тонкую пленку (см. Рис. 4).
5. Дайте этой тонкой суспензии полностью высохнуть на воздухе (см. Рис. 5). Перед термической фиксацией предметного стекла мазок должен полностью высохнуть!
6.Чтобы закрепить бактерии на предметном стекле путем нагревания, возьмите высушенное на воздухе предметное стекло с помощью пинцета и удерживайте нижнюю часть предметного стекла напротив мазка рядом с отверстием микроинсинератора в течение 10 секунд. (см. Рис. 6), как показано на рисунке. ваш инструктор. Если предметное стекло недостаточно нагреть, все бактерии смоются. При его перегреве структурная целостность бактерий может быть нарушена.
г. Окрашивание кристально-фиолетовым на за одну минуту .
г.Смыть излишки кристаллического фиолетового водой.
г. Промокните насухо и наблюдайте с помощью иммерсионной микроскопии в масле.
3. Подготовьте третий слайд нормальной флоры и клеток полости рта следующим образом:
a. С помощью стерильного ватного тампона тщательно очистите внутреннюю часть рта и десны.
г. Протрите предметное стекло тампоном (, не используйте воду, ), , сушите на воздухе, и heat-fix .
г. Окрашивайте кристально-фиолетовым на 30 секунд.
г. Смыть излишки кристаллического фиолетового водой.
эл. Промокните насухо и наблюдайте. Найдите эпителиальные клетки с помощью 10-кратного объектива, отцентрируйте их в поле и переключитесь на масляную иммерсию, чтобы наблюдать за вашими нормальными бактериями флоры на ваших эпителиальных клетках и вокруг них.
4. Обязательно вылейте использованный краситель из лотка для окрашивания в контейнер для отработанного красителя, а не , а не , в раковину .
C. НЕПРЯМОЕ ПЯТНО С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КИСЛОТНОГО КРАСИТЕЛЯ При отрицательном окрашивании отрицательно заряженная цветная часть кислого красителя отталкивается отрицательно заряженной бактериальной клеткой.Поэтому фон будет окрашен, а ячейка останется бесцветной.
ОРГАНИЗМ
Используйте чистую культуру Micrococcus luteus из комплекта поставки.
ПРОЦЕДУРА (выполняется индивидуально)
1. Поместите маленькую каплю нигрозина на один конец чистого предметного стекла микроскопа.
2. Используя стерильную петлю для посева, асептически добавьте небольшое количество Micrococcus luteus к красителю и осторожно перемешайте петлей.
3. Используя край другого слайда, распределите смесь с переменным давлением по слайду так, чтобы образовалось чередующихся светлых и темных областей (см. Рис. 9). Убедитесь, что краситель не слишком толстый , иначе вы не увидите бактерии !
4. Дайте слайду полностью высохнуть на воздухе на слайде. Не нагревайте фиксатор и не смывайте краситель.
5. Обязательно вылейте использованный краситель из лотка для окрашивания в контейнер для отработанного красителя, а не , а не , в раковину .
6. Наблюдать с помощью иммерсионной микроскопии в масле. Найдите область, в которой нет ни слишком много, ни слишком мало красителя (область, которая выглядит светло-фиолетовой, там, где свет проникает через слайд). Если краситель будет слишком густым, сквозь него будет проходить недостаточно света; если краситель слишком тонкий, фон будет слишком светлым для достаточного контраста.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Сделайте чертежи трех препаратов для прямого окрашивания и препарата для непрямого окрашивания.